一种几丁质降解菌株及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115820459A(43)申请公布日2023.03.21(21)申请号202210932667.XC08L5/00(2006.01)(22)申请日2022.08.04C08L29/04(2006.01)C12R1/01(2006.01)(83)生物保藏信息GDMCCNo.626162022.07.11(71)申请人盐城工学院地址224051江苏省盐城市希望大道中路1号(72)发明人余晓红王冕章晓洋柳晓晨吕永梅王笃军靳文斌(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200专利代理师强萌(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)权利要求书1页说明书7页C08J5/18(2006.01)序列表（电子公布）附图3页(54)发明名称一种几丁质降解菌株及其应用(57)摘要本发明公开了一种几丁质降解菌株及其应用，所述菌株为发光杆菌菌株LYM‑1，分类命名为发光杆菌属(Photobacteriumsp.)，保藏编号为GDMCCNo.62616。将该菌株与出芽短梗霉分别降解虾壳和秸秆进行混菌发酵的发酵液，采用简单的分离纯化方法获得可降解膜多糖组分，通过与交联剂PVA和增塑剂甘油复配，获得性能优良的生物可降解膜。与现有的技术相比，本发明的原料取自农业副产物或者废弃物，原料加工过程绿色环保无污染，获得的产品可降解膜绿色环保。因此，本发明提供的产品和方法不仅绿色环保，操作过程简单，同时实现了秸秆和虾壳等废弃物的高值化利用。CN115820459ACN115820459A权利要求书1/1页1.一种几丁质降解菌株，其特征在于，所述菌株为发光杆菌菌株LYM‑1，分类命名为发光杆菌属(Photobacteriumsp.)，保藏编号为GDMCCNo.62616。2.根据权利要求1所述的一种几丁质降解菌株，其特征在于，所述菌株的16srDNA的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。3.如权利要求1所述的一种几丁质降解菌株在降解虾壳中的应用。4.如权利要求1所述的一种几丁质降解菌株在制备可降解膜中的应用。5.基于权利要求1所述的一种几丁质降解菌株的混菌发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)将如权利要求1所述的几丁质降解菌株接种到LB培养基放入37℃的培养箱中进行12h的活化培养，制备种子液A；步骤2)将出芽短梗霉接种到YPD培养基放入28℃的培养箱中进行72h的活化培养，制备种子液B；步骤3)将种子液A和种子液B按照1:1的体积比例接入装有100mL发酵培养基的容器中，接种量为5％，于28℃，180r/min条件下培养7d；所述发酵培养基的制备方法如下：秸秆15g/L，虾壳30g/L，pH自然，121℃灭菌20min。6.如权利要求5所述的混菌发酵方法制得的发酵液。7.如权利要求6所述的发酵液在制备可降解膜中的应用。8.一种可降解膜，其特征在于，包括以下重量份数的原料：如权利要求1所述的几丁质降解菌株0.1～10份、出芽短梗霉0.1～10份、秸秆粉1～10份、小龙虾壳粉1～10份、水70份、PVA1份，其中，所述出芽短梗霉购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC3.3984。9.根据权利要求8所述的一种可降解膜，其特征在于，还包括甘油0.2份、吐温200.05份。10.如权利要求8或9所述的一种可降解膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤a)混菌发酵：将0.1～10份如权利要求1所述的几丁质降解菌株接种到LB培养基放入37℃的培养箱中进行12h的活化培养，制备种子液A；将0.1～10份出芽短梗霉接种到YPD培养基放入28℃的培养箱中进行72h的活化培养，制备种子液B；将种子液A和种子液B按照1:1的比例接入装有100mL发酵培养基的容器中，接种量为5％，于28℃，180r/min条件下培养7d，得到发酵液；所述发酵培养基采用1～10份秸秆粉和1～10份小龙虾壳粉制备而成；步骤b)发酵液浓缩：将步骤a)制得的发酵液经过8000r/min离心5min除去发酵残渣，再经过旋转蒸发仪浓缩，使其多糖含量达到2mg/mL，将浓缩后的发酵液经过透析除去里面的小分子杂质，得到多糖溶液；步骤c)可降解膜的制备：将1份PVA溶于蒸馏水中，边加热边搅拌加速其溶解，得到浓度为2％的均一溶液，即为聚乙烯醇溶液；吸取等量的多糖溶液和聚乙烯醇溶液将其搅拌混匀，得到成膜液；所述成膜液中可加入0.2份甘油和0.05份吐温20；步骤d)将步骤c)制得的成膜液倒入聚苯乙烯膜具中，放入50℃的烘箱中干燥48h，待其成膜后将其揭下放入干燥器中平衡48h，即得。2CN115820459A说明书1/7页一种几丁质降解菌株及其应用技术领域[0001]本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种几丁质降