一种芦笋茎枯病菌聚酮体合成酶及其编码基因和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115851654A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211398852.1C12N15/54(2006.01)(22)申请日2022.11.09C12N15/70(2006.01)C12N15/74(2006.01)(83)生物保藏信息C12N15/79(2006.01)CGMCCNo.403152022.09.16C12N1/15(2006.01)(71)申请人江西省农业科学院植物保护研究所C12N1/21(2006.01)地址330200江西省南昌市青云谱区南莲C12P7/26(2006.01)路602号C12R1/01(2006.01)(72)发明人杨迎青兰波赵凤孙强C12R1/19(2006.01)杜宜新石妞妞陈洪凡陈建C12R1/645(2006.01)李湘民(74)专利代理机构北京三聚阳光知识产权代理有限公司11250专利代理师李博洋(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书11页C12N9/10(2006.01)序列表（电子公布）附图23页(54)发明名称一种芦笋茎枯病菌聚酮体合成酶及其编码基因和应用(57)摘要本发明涉及一种芦笋茎枯病菌聚酮体合成酶及其编码基因和应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种聚酮体合成酶，所述聚酮体合成酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；研究表明，与野生型菌株XT3相比，聚酮体合成酶编码基因pks‑pa敲除菌株XT3‑KN的色素产量明显降低，并且，与聚酮体合成酶编码基因pks‑pa敲除菌株XT3‑KN相比，聚酮体合成酶编码基因pks‑pa导入菌株XT3‑KN‑RV产色素能力显著提高，说明氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的聚酮体合成酶以及核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的编码聚酮体合成酶的基因在天门冬拟茎点霉的色素产生过程中起着重要作用。CN115851654ACN115851654A权利要求书1/1页1.一种聚酮体合成酶，其特征在于，所述聚酮体合成酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.如权利要求1所述的聚酮体合成酶，其特征在于，所述聚酮体合成酶来源于芦笋茎枯病的致病菌天门冬拟茎点霉(Phomopsisasparagi)。3.一种基因，其特征在于，所述基因编码权利要求1或2所述的聚酮体合成酶。4.如权利要求3所述的一种基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。5.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒携带权利要求3或4所述的基因。6.如权利要求5所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒的表达载体为myp821质粒或pMD18质粒。7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞携带权利要求3或4所述的基因或权利要求5或6所述的重组质粒。8.如权利要求7所述的一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为天门冬拟茎点霉、大肠杆菌或根癌农杆菌。9.权利要求1或2所述的聚酮体合成酶或权利要求3或4所述的基因或权利要求5或6所述的重组质粒或权利要求7或8所述的宿主细胞在生产色素或生产聚酮类化合物中的应用。10.天门冬拟茎点霉在生产聚酮体合成酶、生产色素或生产聚酮类化合物中的应用，其特征在于，所述聚酮体合成酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，所述天门冬拟茎点霉的保藏编号为CGMCCNo.40315。2CN115851654A说明书1/11页一种芦笋茎枯病菌聚酮体合成酶及其编码基因和应用技术领域[0001]本发明涉及一种芦笋茎枯病菌聚酮体合成酶及其编码基因和应用，属于生物技术领域。背景技术[0002]合成色素即人工合成的色素，其色泽鲜艳、着色力强、色调多样，但具有毒性，这些毒性源于合成色素中的砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物和硫酸盐，均可对人体造成不同程度的危害。中国1982年公布了《食品添加剂使用卫生标准》，其中规定了只能使用5种合成色素，并定出了最大使用量，如合成色素的纯色素含量不得低于85～99％，1公斤合成色素中砷的含量应在1毫克以下，铅在10毫克以下，铜在20毫克以下，每100克色素中，苯酚不应超过5毫克，苯胺不应超过4毫克，各种氯化物不应超过0.5％等，这些规定是为了限制色素中的杂质，以减少对人体的毒害。[0003]天然色素(NaturalPigments)是由天然资源获得的食用色素，主要从动物和植物组织及微生物(培养)中提取而得。天然色素不仅具有给食品着色的作用，而且，相当部分天然色素具有生理活性。绝大多数天然色素无副作用、安全性高，因此，从各种天然资源中大量获取天然色素，同时探索其生理活性，对缓解并解决合成色素存在的毒性问题十分关键。[0004]天门冬拟茎点霉(Phomopsisasparagi)是芦笋茎枯病的致病菌，是寄主范围相对较窄，危害程度较重的一类真菌性病