一种百合外植体的消毒方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115918528A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202110886744.8(22)申请日2021.08.03(71)申请人连云港市农业科学院地址222006江苏省连云港市海州区迎宾大道西首连云港市农业科学院(72)发明人孙明伟赵统利朱朋波邵小斌葛金涛汤雪燕王江英李双龙(74)专利代理机构南京天华专利代理有限责任公司32218专利代理师李德溅(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称一种百合外植体的消毒方法(57)摘要本发明公开了一种百合外植体的消毒方法，该消毒方法的步骤如下：A、花苞选择：从田间选取龄期为45～50d且无着色、无开裂的花苞；B、低温处理：花苞放入冰箱存储，使常温内的花器官完全冷却至10℃以下；C、酒精消毒：低温处理的花苞放入酒精中预消毒，然后用酒精灯的火焰灼烧消毒；D、花苞剥离：消毒后的花苞去掉从外到内的花被片、花丝和花药，仅保留子房及花柱；E、诱导培养：把高温消毒后的子房及花柱，从中间切成两半后、再切成2～3mm的小块放入诱导培养基中进行诱导培养。本发明的消毒方法通过酒精灼烧对外植体进行消毒，方法简单、可操作性强，能够极大降低百合组培的污染率，提高繁殖效率，从而能够规模化繁育百合种球。CN115918528ACN115918528A权利要求书1/1页1.一种百合外植体的消毒方法，其特征在于：该消毒方法的步骤如下：A、花苞选择：从田间选取龄期为45～50d且无着色、无开裂的花苞；B、低温处理：花苞放入冰箱存储，使常温内的花器官完全冷却至10℃以下；C、酒精消毒：低温处理的花苞放入酒精中预消毒，然后用酒精灯的火焰灼烧消毒；D、花苞剥离：消毒后的花苞去掉从外到内的花被片、花丝和花药，仅保留子房及花柱；E、诱导培养：把高温消毒后的子房及花柱，从中间切成两半后、再切成2～3mm的小块放入诱导培养基中进行诱导培养。2.根据权利要求1所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤A中的花苞需要连通花茎一块完整采下，采下的花苞采用含水量10%～15%的纸巾包裹后放入冰盒暂存。3.根据权利要求1或2所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤A中的花苞配置有一一对应的标签。4.根据权利要求1所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤B中的花苞连同包裹的纸巾一起放入2～4℃的冰箱存储。5.根据权利要求1或4所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤B中的花苞的花器官完全冷却至10℃以下后，减掉多余的花茎，使花茎长度处于3～5mm之间。6.根据权利要求1或2所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤C中的预消毒包括两个步骤：C11、经过低温处理的花苞去掉外面包裹的纸巾，然后放入95%酒精中消毒25～30s；C12、然后整体浸入65%的酒精中浸泡10～15s。7.根据权利要求6所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤C11中的95%酒精消毒时需要晃动95%酒精容器。8.根据权利要求1或2所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤C中的灼烧消毒具体方法为：采用机械手夹住花苞，在酒精灯上用外延火焰均匀灼烧共计20～30s，灼烧时要确保花苞的每个部位均灼烧到且每个部位停留时间1～2s，反复2～3次。9.根据权利要求1所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤D中的花苞放入无菌操作培养皿中进行剥离，且剥离前需要从子房末端连接花托1～2mm处切除花苞下端、然后花苞顶端切除2～3mm。10.根据权利要求1所述的百合外植体的消毒方法，其特征在于：所述步骤D中的花苞在剥离时需要避免子房及花柱碰触到高温花被片，且剥离的子房及花柱放入无菌滤纸中备用。2CN115918528A说明书1/3页一种百合外植体的消毒方法技术领域[0001]本发明涉及百合种苗培育技术领域，具体地说是一种百合外植体的消毒方法。背景技术[0002]植物组培已成为花卉种苗繁殖的重要途径，目前已在百合方面得到广泛应用。目前以子房、花柱为外植体组培材料，传统百合消毒仍以升汞、次氯酸钠等化学试剂消毒为主，不仅污染率高，且操作步骤复杂，严重影响子房及花柱的培养效率，同时消毒后的试剂要专业处理，易造成对环境的污染，难以满足绿色发展的需求。发明内容[0003]本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供一种百合外植体的消毒方法，该消毒方法通过酒精灼烧对外植体进行消毒，能够极大降低百合组培的污染率，提高繁殖效率，从而能够规模化繁育百合种球。[0004]本发明的目的是通过以下技术方案解决的：一种百合外植体的消毒方法，其特征在于：该消毒方法的步骤如下：A、花苞选择：从田间选取龄期为45～50d且无着色、无开裂的花苞；B