苦豆子提取物及其组合物在制备治疗炎症药物中的应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115919926A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202310032073.8A61K131/00(2006.01)(22)申请日2023.01.10(71)申请人甘肃农业大学地址730000甘肃省兰州市安宁区营门村1号(72)发明人华永丽李芳魏彦明胡俊杰纪鹏袁子文姚万玲(74)专利代理机构东莞金凯云知识产权代理事务所(普通合伙)44780专利代理师陈凯玉(51)Int.Cl.A61K36/489(2006.01)A61P29/00(2006.01)C07G5/00(2006.01)C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图4页(54)发明名称苦豆子提取物及其组合物在制备治疗炎症药物中的应用(57)摘要本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及苦豆子提取物及其组合物在制备治疗炎症药物中的应用，所述的苦豆子提取物包括总生物碱、总黄酮、总多糖中的一种或几种，所述的总生物碱、总黄酮和总多糖的配比为2:1:2，所述的苦豆子提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症的抑制效果最好，且其在体外通过抑制NF‑κB炎症通路激活，发挥抗炎作用。CN115919926ACN115919926A权利要求书1/1页1.苦豆子提取物在制备治疗炎症药物中的应用，其特征在于，所述的苦豆子提取物包括总生物碱、总黄酮、总多糖中的一种或几种。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的苦豆子提取物包括总生物碱、总黄酮和总多糖。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的苦豆子提取物中总生物碱、总黄酮和总多糖的比例为1‑3:1‑3:1‑3。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的苦豆子提取物中总生物碱、总黄酮和总多糖的比例为2:1:2。5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述总生物碱的提取方法如下：准确称取过60目筛的苦豆子，置于烧瓶中，按固液比1:5加入65％的乙醇溶液，40℃超声提取，提取2次，合并滤液离心后取上清并减压浓缩，后经冷冻干燥机制成浸膏，使用pH＝3的盐酸溶液溶解后25％氨水调节溶液pH＝10，所得碱化液置于分液漏斗中，2倍体积的氯仿萃取2次后浓缩干燥，再使用25％乙醇配制浓度为2.5mg·mL‑1的料液，5％氢氧化钠调节其pH＝9，以2BV/h流速上样，6倍样品体积的70％乙醇洗脱，流速为4BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，按照1:1加入氯仿萃取2～3次，萃取液烘干，即得。6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述总黄酮的提取方法如下：准确称取过40目筛的苦豆子，置于烧瓶中，按固液比1:10加入75％乙醇溶液，85℃热回流提取2h，共提取2次，合并滤液离心后减压浓缩，后经冷冻干燥机制成浸膏，取适量加纯化水溶解，先用石油醚萃取，后用乙酸乙酯萃取，所得萃取液经浓缩烘干后称取0.24g，加入25％乙醇溶解配成浓度为2.5mg·mL‑1的料液，湿法上柱，以4倍样品体积的纯化水洗脱除去水溶性杂质，用6倍样品体积的80％乙醇洗脱，流速为4BV/h，收集洗脱液减压浓缩至无醇味，用乙酸乙酯萃取，烘干后即得。7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述总多糖的提取方法如下：准确称取过40目筛的苦豆子，按固液比1:3加入60mL石油醚，持续搅拌脱脂浸泡，后使用95％乙醇同样处理，溶液抽滤后60℃干燥，称取，按固液比1:10加入蒸馏水溶解，70℃热回流提取4h，离心取上清，凉至室温，加入4倍体积95％乙醇，4℃沉淀过夜，取沉淀烘干，即得。2CN115919926A说明书1/8页苦豆子提取物及其组合物在制备治疗炎症药物中的应用技术领域[0001]本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及苦豆子提取物及其组合物在制备治疗炎症药物中的应用。背景技术[0002]炎症是机体受到病原体攻击、感染等内外界有害刺激时产生的一种防御性反应，它会启动免疫反应以保护机体[1]，当免疫系统过度或持续的激活时，则会导致机体发生如类风湿性关节炎、炎症性肠病、肿瘤等一些列与炎症相关的疾病[2]，最终导致发生永久性或暂时性炎症[3]。巨噬细胞在炎症反应的启动、维持和缓解等过程中发挥核心作用，它的持续积累和活化是慢性炎症的标志。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可激活巨噬细胞并促使其分泌肿瘤坏死因子‑α(tumornecrosisfactoralpha,TNF‑α)、白介素1β(interleukin‑1β,IL‑1β)、白介素‑6(interleukin‑6,IL‑6)、一氧化氮(nitricoxide,NO)等炎症介质[6,7]，这些炎性介质的过度释放导致器官损伤和慢性疾病[8]。NF‑κB在调节细胞凋亡、炎症反应等过程中发挥重要作用[9]，是抗炎治疗的重要靶点。[0