一株枯草芽孢杆菌及其微生态制剂和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115927042A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202210812078.8A01N65/20(2009.01)(22)申请日2022.07.11A01N63/22(2020.01)A01P15/00(2006.01)(83)生物保藏信息A01P21/00(2006.01)CGMCCNo.130112016.09.19C12R1/125(2006.01)(71)申请人福建大北农华有水产科技集团有限公司地址363502福建省漳州市诏安金都工业集中区金都大道19号申请人北京大北农科技集团股份有限公司九江大北农水产科技有限公司(72)发明人王蕊汪攀宋国隆付维来胡婷段培枫杨浩辰米少辉(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C12P1/04(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表（电子公布）附图2页(54)发明名称一株枯草芽孢杆菌及其微生态制剂和应用(57)摘要本发明属于本发明属于微生态领域，特别涉及一株枯草芽孢杆菌及其微生态制剂和应用。本发明提供了一株新的芽孢杆菌菌株，该菌株具有显著的产纤维素酶及产IAA能力，纤维素酶活达824U/mL，促植物生长素IAA产生量为48.52mg/L。本发明利用该芽孢杆菌菌株发酵鱼藤粉，通过芽孢杆菌纤维素酶的破壁作用，加快鱼藤粉有效成分释放速度和释放量，从而达到增强野杂鱼清除效果的目的。经该芽孢杆菌发酵后的鱼藤根粉发酵液，鱼藤酮含量提高约30％～45％，除杂速度和效果增强。CN115927042ACN115927042A权利要求书1/1页1.一株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株，其特征在于，其保藏编号为CGMCCNo.13011。2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌菌株，其特征在于，所述枯草芽孢杆的16SrRNA基因序列如序列表SEQIDNo.1所示。3.一种鱼藤根粉发酵物，其特征在于，使用权利要求1或2所述的枯草芽孢杆菌菌株发酵鱼藤根粉制得。4.权利要求3所述的鱼藤根粉发酵物的制备方法，其特征在于，将所述枯草芽孢杆菌的种子液按1～3％的接种量接种到所述的发酵培养基中，温度35～37℃，转速180～300r/min，罐压0.05Mpa，通气比1：(0.4～0.5)，发酵时间15～18h，待芽孢生成率90％以上，活菌数达到109～1010cfu/ml，既得；其中，所述发酵培养基组成及含量为：鱼藤根粉50～60g/L，KH2PO40.8～1.5g/L，蔗糖2～4g/L，豆饼粉8～12g/L，FeSO40.25～0.5g/L，CaCO31～3g/L，MgSO42.5～3.5g/L，玉米面3～5g/L，鱼粉6～10g/L，消泡剂0.05～0.1％。5.含有权利要求1或2所述的枯草芽孢杆菌菌株的清杂微生态制剂。6.权利要求5所述的微生态制剂的制备方法，其特征在于，将所述的枯草芽孢杆菌的菌粉、鱼藤根粉、红糖、水按质量或体积比1:10:0.5:200搅拌均匀，室外塘口避光发酵24h，既得。7.根据权利要求6所述的微生态制剂的制备方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌菌粉的活菌数含量为109～1010cfu/ml。8.权利要求3或4所述的鱼藤根粉发酵物在虾蟹池塘中清除野杂鱼中的应用。9.权利要求5或6所述的微生态制剂在虾蟹池塘中清除野杂鱼中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述微生态制剂在所述河蟹塘中使用量为5～10L/亩。2CN115927042A说明书1/5页一株枯草芽孢杆菌及其微生态制剂和应用技术领域[0001]本发明属于微生态领域，特别涉及一株枯草芽孢杆菌及其微生态制剂和应用。背景技术[0002]近年来虾蟹养殖规模有逐年增加趋势，江苏近300万亩。对于甲壳类水产动物的养殖，野杂鱼的清除是困扰养殖户的一个难题。野杂鱼增多不仅会吃食龙虾母体和水体中的小虾苗，导致龙虾产量降低、还会搅浑池底导致虾蟹塘水浑，并且与虾蟹争食饵料、消耗氧气，影响虾蟹生长及退壳速度。目前市场中使用较多、安全的野杂鱼清除剂主要有两种：茶籽饼和鱼藤粉。茶籽饼主要成分为茶皂素，用量较大，为10‑20公斤/亩，虾蟹养殖池塘为大水面养殖，使用不便，且对虾蟹塘的水草有一定的副作用；鱼藤粉为药用豆科植物鱼藤根的粉末，自古以来被用作捕鱼剂，其有效成分为鱼藤酮。鱼藤粉通常以水浸泡液的方式均匀泼洒至虾蟹池塘中用于野杂鱼清除，但鱼藤酮几乎不溶于水，不容易从粉末中释放，存在效果不稳定问题。发明内容[0003]为了解决上述技术问题，本发明从河蟹养殖池塘分离到一株枯草芽孢杆菌3‑2，该枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号