枯草芽孢杆菌S16菌株、菌剂及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115960758A(43)申请公布日2023.04.14(21)申请号202211253376.4C12P21/04(2006.01)(22)申请日2022.10.13C07K11/02(2006.01)C12P21/02(2006.01)(83)生物保藏信息C07K7/06(2006.01)CGMCCNo.1.600362022.08.22C12R1/125(2006.01)(71)申请人河北农业大学地址071000河北省保定市灵雨寺街289号(72)发明人毛晓曦刘文菊李博文陆秀君耿丽平李翔宇(74)专利代理机构河北国维致远知识产权代理有限公司13137专利代理师任青(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)A01N63/22(2020.01)权利要求书1页说明书10页A01P3/00(2006.01)序列表（电子公布）附图6页(54)发明名称枯草芽孢杆菌S16菌株、菌剂及其应用(57)摘要本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及一株枯草芽孢杆菌S16菌株，由该菌株制成的菌剂及其应用，该菌株已于2022年8月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNo.1.60036；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明的枯草芽孢杆菌S16菌株对甜瓜枯萎病菌尖孢镰刀菌有良好的拮抗活性，还具有分泌脂肽类抑菌物质表面活性素和丰产素的能力，并具有促进甜瓜植株生长以及激活抗氧化物酶系统的作用。在室内水培条件下，该菌对甜瓜枯萎病的防治效果达到79.6％，在甜瓜土传枯萎病的生物防治中有很好的应用前景。CN115960758ACN115960758A权利要求书1/1页1.一株枯草芽孢杆菌S16菌株，其特征在于，其分类名称为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，于2022年8月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNo.1.60036；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌S16菌株的发酵液、菌悬液和/或无菌上清液在抑制尖孢镰刀菌生长中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述发酵液的制备方法为：将活化的权利要求1所述的枯草芽孢杆菌S16菌株接至装有LB液体培养基中，30～37℃，180～220r/min振荡培养12～16h得到种子液，将种子液按照1％～2％的接种量接种于LB液体培养基中，30～37℃，180～220r/min振荡培养6～48h后，得到所述发酵液；所述菌悬液的制备方法为：将所述发酵液采用高速冷冻离心机4℃，8000r/min～10000r/min离心15～20min，收集菌体，采用无菌水重悬至OD600＝0.9～1.0，得到所述菌悬液；所述无菌上清液的制备方法为：将所述发酵液采用高速冷冻离心机4℃，8000r/min～10000r/min离心15～20min，收集上清液，将上清液过0.22μm滤膜后保存，得到所述无菌上清液。4.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌S16菌株在制备脂肽类抑菌物质中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述脂肽类抑菌物质包括表面活性素和丰产素。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述表面活性素包括：C13SurfactinA、C14SurfactinA、C15SurfactinA和C16SurfactinA。7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述丰产素包括：C14FengycinA、C15FengycinA、C16FengycinA以及C13FengycinB、C14FengycinB、C15FengycinB和C16FengycinB。8.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌S16菌株在制备防控甜瓜枯萎病的菌剂中的应用。9.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂包括权利要求1所述的枯草芽孢杆菌S16菌株的发酵液、菌悬液和无菌上清液中的至少一种。10.权利要求9所述的菌剂在防治甜瓜枯萎病中的应用。2CN115960758A说明书1/10页枯草芽孢杆菌S16菌株、菌剂及其应用技术领域[0001]本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及枯草芽孢杆菌S16菌株、菌剂及其应用。背景技术[0002]甜瓜是我国栽培的主要水果之一，种植面积超过48.19万公顷，占世界总面积的52.73％，使我国成为甜瓜生产第一大国。由于甜瓜品种众多，在全国各地形成了各具特色的优势产区，常年连片、大规模种植。近几年来，随着甜瓜需求量的增大，各地甜瓜种植模式逐渐由露地种植转向以塑料大棚和日光温室为主的设施种植。但是由于设施种植的集约化管理、常年连作以及施肥量大等特点，导致的甜瓜土传枯萎病发病现象也愈发严重。据统计，甜瓜枯萎病