一种利用鱼加工副产物为氮源的嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115975885A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202211667745.4(22)申请日2022.12.23(71)申请人中国农业大学地址100193北京市海淀区圆明园西路2号(72)发明人谭雨青张锐张慧娟罗永康洪惠(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002专利代理师李正(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C12N1/38(2006.01)C12R1/01(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种利用鱼加工副产物为氮源的嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备(57)摘要本发明涉及微生物培养基技术领域，尤其涉及一种利用鱼加工副产物为氮源的嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备。所述培养基原料包括：脑心浸出液肉汤、L‑半胱氨酸盐酸盐和鱼加工副产物水解物；所述鱼加工副产物水解物的制备方法包括：将鱼加工副产物破碎、灭菌、去除脂肪后利用碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶酶解，将酶解产物过滤后即得鱼加工副产物水解物。在降低培养基成本、解决鲢鱼加工副产物资源的浪费和其丢弃后污染环境问题的同时，还可以提高Akk菌的培养效率。CN115975885ACN115975885A权利要求书1/1页1.一种嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，其原料包括：脑心浸出液肉汤、L‑半胱氨酸盐酸盐和鱼加工副产物水解物；所述鱼加工副产物水解物的制备方法包括：将鱼加工副产物破碎、灭菌、去除脂肪后利用碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶酶解，将酶解产物过滤后即得鱼加工副产物水解物。2.根据权利要求1所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，每60mL水中含有1.5‑2.5g脑心浸出液肉汤、0.01‑0.05gL‑半胱氨酸盐酸盐、0.05‑2g鲢鱼加工副产物水解物。3.根据权利要求1或2所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，所述鱼加工副产物选自淡水鱼的加工副产物，优选所述鱼加工副产物包括鲢鱼加工副产物、罗非鱼加工副产物、鲶鱼加工副产物中的一种或几种；进一步优选所述鱼加工副产物为鲢鱼加工副产物。4.根据权利要求1‑3任一项所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，所述鱼加工副产物包括鱼头和鱼骨，所述鱼头与鱼骨的质量比为2.5‑3.5:1.5‑2.5。5.根据权利要求1‑4任一项所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，将破碎后的鱼加工副产物与水按照质量比0.5‑1.5:1.5‑2.5混合后再灭菌。6.根据权利要求1‑5任一项所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，所述灭菌的方式为高温高压灭菌；所述灭菌的条件优选为120‑122℃处理0.8‑1.2h。7.根据权利要求1‑6任一项所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，按酶活比例1.8‑2.2:0.8‑1.2加入碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶。8.根据权利要求1‑7任一项所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法，其特征在于，在45‑55℃下酶解2.5‑3.5h。9.一种嗜黏蛋白阿克曼菌培养基，其特征在于，其原料包括鱼加工副产物水解物，所述鱼加工副产物水解物的制备方法包括：将鱼加工副产物破碎、灭菌、去除脂肪后利用碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶酶解，将酶解产物过滤后即得鱼加工副产物水解物；优选的，所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基由上述权利要求1‑8任一项嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备方法制备而成。10.权利要求9所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的使用方法，其特征在于，Akk菌在36‑38℃下活化46‑50h、传代34‑38h后，将Akk菌接种于所述嗜黏蛋白阿克曼菌培养基中，进行厌氧培养。2CN115975885A说明书1/6页一种利用鱼加工副产物为氮源的嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备技术领域[0001]本发明涉及微生物培养基技术领域，尤其涉及一种利用鱼加工副产物为氮源的嗜黏蛋白阿克曼菌培养基的制备。背景技术[0002]嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansiamuciniphila，Akk菌)是定植于肠道黏液层中可特异性降解黏蛋白的革兰氏阴性厌氧菌。研究发现，Akk菌具有良好的代谢调节能力，可以改善动物脂代谢和肠道通透性，成为治疗Ⅱ型糖尿病和肥胖的候选药物。此外，也相继报道了Akk菌具有改善肝损伤等疾病症状的作用。发现Akk菌的丰度在疾病的发展中起着重要的作用，有望成为改善因心脑血管系统紊乱引发的疾病的靶点。[0003]Akk菌作为当前研究热点，其培养及培养基的优化是一个必需而且至关重要的内容。目前国内外对于Akk菌的培养大都依赖于脑心浸出液肉汤和猪胃黏蛋白配置而成的培养基，但该种培养基配方成本较高。且猪胃黏蛋白来自于猪胃，可能会携带未知病毒和其他危险成分，该培养基成分的安全性无法得到充分保障。