一种果蔬中草酸含量的检测方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116026957A(43)申请公布日2023.04.28(21)申请号202310046853.8(22)申请日2023.01.31(71)申请人安徽农业大学地址230000安徽省合肥市长江西路130号(72)发明人杨俊赵凯张影影(74)专利代理机构合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙)34146专利代理师洪玲(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/72(2006.01)G01N30/54(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图3页(54)发明名称一种果蔬中草酸含量的检测方法(57)摘要本发明公开了一种果蔬中草酸含量的检测方法，涉及天然产物的提取检测技术领域，本发明基于超高效液相色谱‑串联质谱技术的植物草酸的检测方法，以甲醇‑水溶液作为提取溶剂，采用超声波辅助浸提法，对植物样品进行前处理，获得草酸提取液，利用超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪检测草酸提取液中的草酸，对超高效液相色谱‑质谱检测的流动相、定性离子对、定量离子对等参数进行优化，提高了草酸的分辨率，缩短了样品的分析周期，适合样本量较大的植物样品草酸的快速分析。CN116026957ACN116026957A权利要求书1/1页1.一种果蔬中草酸含量的检测方法，其特征在于，以体积百分百为50％的甲醇‑水溶液作为提取溶剂，采用超声波辅助浸提法，对粉碎的果蔬样品进行超声波辅助浸提处理，获得草酸提取液，利用超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪检测草酸提取液中的草酸。2.根据权利要求1所述的一种果蔬中草酸含量的检测方法，其特征在于，所述果蔬样品的超声波辅助浸提处理的具体方法为：将果蔬样品进行称重、粉碎、匀浆，取粉碎匀浆后的果蔬样品置于5mL离心管中，加入5ml体积百分比为50％的甲醇水溶液超声果蔬样品；离心，取上清液过微孔滤膜，获得草酸提取液。3.根据权利要求1所述的一种果蔬中草酸含量的检测方法，其特征在于，所述超声处理的条件为：提取时间为20min，超声波功率180W。4.根据权利要求1所述的一种果蔬中草酸含量的检测方法，其特征在于，离心的条件为：4℃，12000rpm条件下离心10min。5.根据权利要求1所述的一种果蔬中草酸含量的检测方法，其特征在于，微孔滤膜孔径为0.22μm。6.根据权利要求1所述的一种果蔬中草酸含量的检测方法，其特征在于，超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪检测草酸的条件包括：超高效液相色谱仪器参数条件：色谱柱：WatersACQUITYUPLCBEHAmide色谱柱(2.1mm×100mm，1.7μm)；柱温：50℃；样品室温度：10℃；进样体积：5μL；流动相A：含有20mM乙酸铵的体积百分百为50％的乙腈水溶液；流动相B：含有20mM乙酸铵的体积百分百为85％的乙腈水溶液；流速：0.45mL/min，梯度洗脱；三重四极杆串联质谱仪质谱条件：电喷雾电离负离子模式，ESI‑；RADAR，同时进行全扫描(MS)和MRM(MS/MS)数据；毛细管电压：2KV；离子源温度:150℃；脱溶剂气温度：400℃；锥孔反吹氮气流量：150L/h；脱溶剂气流量:1000L/h。7.根据权利要求6所述的一种果蔬中草酸含量的检测方法，其特征在于，草酸的ESI‑‑MS/MS条件参数还包括：保留时间：2.6min；定性离子对：89/43(m/z)；定量离子对：89/61(m/z)；滞留时间：0.1s；锥孔电压：30V；碰撞能量：6eV。2CN116026957A说明书1/7页一种果蔬中草酸含量的检测方法技术领域[0001]本发明涉及天然产物的提取检测技术领域，特别涉及一种基于超高效液相色谱‑串联质谱技术的果蔬中草酸含量的检测方法。背景技术[0002]草酸又名乙二酸，是最简单的二元羧酸，是生物体的一种代谢产物。广泛存在于植物源食品、肉类以及真菌中，并在不同的生命体中发挥不同的功能。[0003]草酸多以可溶态的草酸钠、草酸钾和难溶态的草酸钙、草酸铁和草酸镁的形式存在。不同科属植物的草酸含量差异很大，同一植物不同部位(如茎、叶和种子)的草酸含量差异也很大。从环境毒理学和食品营养学的角度看，草酸是一种环境毒素和抗营养因子，长期食用草酸含量高的蔬菜、水果容易引发关节炎、低血钙、膀胱结石和肾结石等疾病。目前各类植物中草酸含量鲜见报道，也没有相关测定标准。为了解多种植物中草酸的含量，给消费者合理膳食提供参考，建立一个操作简单快速、结果准确的检测方法十分必要。[0004]在植物中进行草酸的检测，要先考虑的是如何从植物中提取到草酸。此外，在面对大量待提取草酸的检测物品时，还需要考虑提取的便捷和高效，同时在植物中提取草酸需要考虑到植物中含有的淀粉、糖类、