抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110257473A(43)申请公布日2019.09.20(21)申请号201910585583.1(22)申请日2019.07.01(71)申请人湖北省农业科学院植保土肥研究所地址430064湖北省武汉市洪山区南湖大道6号(72)发明人杨小林张舒张佑宏吕亮常向前王佐乾袁斌张瑞洋(74)专利代理机构成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙)51241代理人胡文莉(51)Int.Cl.C12Q1/18(2006.01)C12Q1/6895(2018.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法(57)摘要本发明提供一种抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法，包括以下步骤，依托分子生物学和植物病理学研究手段，首先获知水稻品种推广应用稻区的稻瘟病菌种群的无毒基因型结构，其次获知推广应用的水稻品种的主要抗性基因型，然后对两项结果进行比对分析，以及利用稻区菌群对水稻品种进行综合接种，最终高效鉴定出水稻抗性品种是否在拟推广应用的稻区表现抗性。本发明通过抗性基因和无毒基因的分子检测，如对应存在，则表明该品种在大田生产中具有抗性；如不对应存在，则进一步通过喷雾鉴定结果，辨别该品种在大田生产中是否具有抗性。本发明极大地减少因盲目使用抗性品种带来的生产上的损失。CN110257473ACN110257473A权利要求书1/1页1.抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤，依托分子生物学和植物病理学研究手段，首先获知水稻品种推广应用稻区的稻瘟病菌种群的无毒基因型结构，其次获知推广应用的水稻品种的主要抗性基因型，然后对两项结果进行比对分析，以及利用稻区菌群对水稻品种进行综合接种，最终高效鉴定出水稻抗性品种是否在拟推广应用的稻区表现抗性。2.根据权利要求1所述的抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法，其特征在于：具体包括以下步骤：(1)稻瘟病菌无毒基因型分析(1.1)获得稻瘟病菌单孢菌株基于组织分离法，保湿培养在水稻品种拟推广应用稻区采集的穗颈瘟标本，通过孢子培养、飘落、镜检、标记、定位、挑取、培养，获得稻瘟病菌单孢菌株，保存备用；(1.2)获得稻瘟病菌单孢菌株基因组DNA利用CTAB法提取稻瘟病菌单孢菌株的基因组DNA；(1.3)获知稻区稻瘟病菌群的无毒基因结构利用已构建的稻瘟病菌无毒基因特异性引物，分别PCR扩增稻瘟病菌单孢菌株DNA，通过条带分析，获知单孢菌株的无毒基因型，对此进行数据分析获知菌群的无毒基因结构；(2)水稻品种抗性基因分析(2.1)获得抗性品种基因组DNA利用CTAB法提取稻瘟病菌单孢菌株的基因组DNA；(2.2)获知水稻品种抗性基因型利用已构建的水稻品种抗性基因特异性引物，分别PCR扩增水稻品种DNA，通过条带分析，获知水稻品种具有的抗性基因型；(3)抗性基因型与无毒基因型的比对分析比较水稻品种的抗性基因型与稻瘟病菌群的无毒基因型，如果抗性基因型与无毒基因型对应存在，表示抗性基因型与无毒基因型契合，该水稻品种在稻区大田生产中具备抗性；如果抗性基因与无毒基因不对应存在，表示抗性基因型与主要无毒基因型不契合；(4)水稻品种稻瘟病抗性室内接种鉴定分析于室内对抗性基因与无毒基因不对应存在的水稻品种进行喷雾接种稻瘟病菌群的混合分生孢子液，7d后获得抗性结果；如果稻瘟病抗性鉴定结果为抗性，表明检测出的抗性基因型与无毒基因型虽然不对应存在，但是表明水稻品种具有未知的抗性基因，稻瘟病菌群具有未知的无毒基因型，且二者对应存在，在大田生产中该水稻品种对稻瘟病具有抗性；如果稻瘟病抗性鉴定结果为感病，表明该水稻品种中的抗性基因与稻瘟病菌群的无毒基因型不存在契合，在大田生产中该水稻品种对稻瘟病不具有抗性。2CN110257473A说明书1/3页抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法技术领域[0001]本发明属于水稻品种鉴定技术领域，具体涉及一种抗性水稻品种在特定稻区栽种抗稻瘟病鉴定方法。背景技术[0002]水稻是湖北省乃至全国的重要粮食作物，稻瘟病是困扰水稻生产、妨碍水稻优质高产的重要病害之一。稻瘟病不仅具有流行的广泛性，而且稻瘟病菌生理小种(致病型)的分布会因不同地区的气候条件和耕作栽培方式的不同而不同，并且年度间也存在差异，因而稻瘟病在防控上具有复杂性和长期性。[0003]目前生产上防治稻瘟病最经济有效的手段是利用抗性品种。获知某品种是否为抗性品种，即要通过品种区试病圃园的自然诱发鉴定，鉴定结果分为高抗、抗病、中抗、中感、感病、高感。品种区试病圃园多选址于低洼山区，该地区常年阴雨寡照、雾浓露重、低温夏凉，稻瘟病菌种群结构复杂、毒性强，是稻瘟病的常发区和重发区。具有中抗以上鉴定结果的品种才能在生产