一种从杜仲叶中分离、纯化绿原酸的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102351700A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102351700A(43)申请公布日2012.02.15(21)申请号201110233829.2(22)申请日2011.08.15(71)申请人中国科学院过程工程研究所地址100190北京市海淀区中关村北二条1号(72)发明人陈洪章付小果(51)Int.Cl.C07C69/732(2006.01)C07C67/52(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种从杜仲叶中分离、纯化绿原酸的方法(57)摘要基于绿原酸中邻苯二酚结构不稳定，高温及长时间加热易氧化分解等特点，发明了一种汽爆辅助提取、纯化杜仲叶中绿原酸的方法：将在pH2.0-6.5的酸水中预浸5-180min的杜仲叶置于汽爆罐中，通入空气、二氧化碳、臭氧、液氮、氮气、水蒸气、超临界CO2、乙醇中的一种或任意两种的组合汽爆介质，在30-100℃汽爆处理1-30min，汽爆处理后的物料加入热水(40-80℃)直接提取绿原酸，合并提取液进行纯化得绿原酸精品。多介质组合低温汽爆预处理，保护活性成分绿原酸的稳定性的同时，有效的破坏杜仲叶的细胞壁，从根本上解除提取时杜仲叶细胞壁致密结构对绿原酸的溶出影响，提高杜仲叶中绿原酸提取率，为杜仲叶的高效综合利用提供一条新的技术途径。CN102357ACCNN110235170002351707A权利要求书1/1页1.一种从杜仲叶中分离、纯化绿原酸的方法，具体步骤包括：(1)将杜仲叶药材按照绝干药材与酸性水的质量1∶0-1∶4的比例加入酸性水，然后在常温下浸泡处理5-180min；(2)将浸泡处理后的物料置于汽爆罐中，通入汽爆介质，使罐内温度达到30-100℃，维持1-30min后进行汽爆处理；(3)将汽爆处理后物料加入其绝干重量3-20倍的水，在40-80℃提取2-3次，每次0.5-1h，合并提取液；(4)将提取液减压浓缩，加浓缩液3-4倍的乙酸乙酯萃取两次，得乙酸乙酯层，加入1％-5％NaOH液中和，使乙酸乙酯中的绿原酸进入水相，水相分离后再用浓盐酸酸沉析出绿原酸沉淀，沉淀分离后用少量的乙酸乙酯将绿原酸重结晶，干燥即得绿原酸粗品；(5)绿原酸粗品和去离子水按照质量比1∶3-1∶5的比例，在连续通入99.99％的高纯氮气保持正压，压差＞5Pa的条件下，溶解并加入5％-10％活性碳，加热到50-60℃回流0.5-1.0小时、过滤、冷却结晶，结晶中加入其质量比3-6倍的分析纯丙酮进行清洗、真空干燥得高纯度绿原酸。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)所述的酸性水为pH为2.0-6.5。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的酸性水pH调节用到的酸为：乙酸、磷酸、硫酸、盐酸、硝酸、碳酸、硼酸。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)所述的汽爆介质为空气、二氧化碳、臭氧、液氮、氮气、水蒸气、超临界CO2、乙醇中的一种或任意两种的组合。2CCNN110235170002351707A说明书1/4页一种从杜仲叶中分离、纯化绿原酸的方法技术领域[0001]本发明属于中草药加工技术领域，特别涉及一种汽爆辅助提取杜仲叶中绿原酸并分离纯化得绿原酸的方法。背景技术[0002]绿原酸是一种具有广泛生理活性和药理活性的物质，具有利胆、抗菌、降压、增加白血球及兴奋中枢神经等作用，它是许多中药材的有效成分之一，又是某些成药的质量指标。绿原酸广泛应用于医药、日用化工和食品等行业。[0003]绿原酸等植物活性成分的提取是一个突破细胞壁致密屏障，有效溶出的过程，增加对植物细胞的破碎程度，将直接影响提取效率以及后续加工工程。目前绿原酸提取中一般对原料进行简单的机械粉碎处理，研究主要集中在如溶剂提取法，超声提取法、超临界提取法、复合酶提取法以及超声法、溶剂法与酶法复合的方法等提取方法对提取率的影响，但上述研究方法不但溶剂用量大，而且没有从根本上解除提取时细胞壁致密结构对绿原酸的溶出影响，绿原酸的提取得率提高有限。[0004]蒸汽爆破技术近年来广泛应用于纤维素原料的预处理，它利用高温高压水蒸汽渗入物料组织的孔隙和细胞之中，然后瞬间高速释放出来，所产生的机械力可以产生一定程度上的机械撕裂作用，从而破坏物料。该法整合了化学水解和物理粉碎作用，能够在短时间(几分钟)内有效破坏木质纤维的致密结构，降低细胞壁的致密屏障作用，提高植物活性成分的提取效率。[0005]绿原酸易溶于热水，但由于绿原酸中邻苯二酚结构不稳定，高温及长时间加热易氧化分解，由此，提出一种汽爆辅助提取杜仲叶中绿原酸的方法，为杜仲叶的高效综合利用提供一条新的技术途径。发明内容[0006]为了从根本上解除提取时杜仲叶细胞壁致密结构对绿原酸的溶出影响，提高杜仲叶中绿原酸提