以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化杜仲叶桃叶珊瑚苷的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102702286A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102702286A(43)申请公布日2012.10.03(21)申请号201210196416.6(22)申请日2012.06.14(71)申请人湖南农业大学地址410128湖南省长沙市芙蓉区东湖湖南农业大学(72)发明人肖文军崔丽龚志华(74)专利代理机构长沙正奇专利事务所有限责任公司43113代理人何为袁颖华(51)Int.Cl.C07H17/04(2006.01)C07H1/08(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书44页页(54)发明名称以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化杜仲叶桃叶珊瑚苷的方法(57)摘要一种以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化杜仲叶中桃叶珊瑚苷的方法，包括以pH为中性的食用乙醇从杜仲叶中提取桃叶珊瑚苷粗提物，并将该桃叶珊瑚苷粗提物以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化以得到桃叶珊瑚苷提取物。该方法采用食用乙醇安全无毒地提取并分离桃叶珊瑚苷，不仅能工业化生产安全有效的不同纯度规格的桃叶珊瑚苷提取物，而且真正地实现了安全、简便、合理、经济的杜仲资源的高值化利用和系列产品的工业化生产，充分体现出绿色化学生产的理念和循环经济的策略。CN102786ACN102702286A权利要求书1/1页1.一种以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化杜仲叶桃叶珊瑚苷的方法，该方法包括以50～70%体积浓度的中性食用乙醇于70～90℃条件下从杜仲叶中提取桃叶珊瑚苷粗提物，其特征在于：还包括将所述桃叶珊瑚苷粗提物以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化的步骤：将所述桃叶珊瑚苷粗提物用50～70%体积浓度的中性食用乙醇溶解，配制成浓度为0.2～0.4mg/mL的溶解液，将2.5～3.5BV该溶解液以2.0～4.0BV/h的流速通过装有NKA-2大孔吸附树脂的分离柱进行吸附分离，至吸附饱和；然后用1～3BV的蒸馏水以1～2BV/h流速冲洗至无色，再用1.5～2.5BV的40～60%体积浓度的食用乙醇以2.0～4.0BV/h的流速洗脱桃叶珊瑚苷，收集洗脱液，将洗脱液在-0.05～-0.09MPa、45～55℃条件下浓缩，回收食用乙醇，真空冷冻干燥，即可。2.如权利要求1所述的以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化杜仲叶桃叶珊瑚苷的方法，其特征在于：所述以50～70%体积浓度且pH为中性的食用乙醇于70～90℃条件下从杜仲叶中提取桃叶珊瑚苷粗提物是指：将杜仲叶粉碎，用体积浓度为50～70%且pH值为中性的食用乙醇，在70～90℃下，按1克粉碎的杜仲叶加10～20毫升食用乙醇的比例，提取0.5～1.5小时，将浸提液过滤并将滤液在-0.05～-0.09MP、45～55℃下浓缩，回收食用乙醇溶剂，真空冷冻干燥，即得粗提物。2CN102702286A说明书1/4页以NKA-2大孔吸附树脂分离纯化杜仲叶桃叶珊瑚苷的方法技术领域：[0001]本发明涉及一种从杜仲叶中分离纯化桃叶珊瑚苷的绿色化学工艺技术，尤指一种采用NKA-2大孔吸附树脂分离纯化杜仲叶中桃叶珊瑚苷的绿色分离纯化方法。背景技术：[0002]杜仲（EucommiaUlmoidesOlive）是杜仲科杜仲属植物，落叶乔木。我国适应杜仲生长的地域十分广阔，可用于种植杜仲的土地达1000万hm2以上，目前全国杜仲栽培面积约35万hm2，占世界杜仲种植总面积的95％以上，具有独特的资源优势，我国每年可产叶400万吨。[0003]桃叶珊瑚苷(aucubin，AU)的化学名为β-D-吡喃葡萄糖苷，为环烯醚萜苷类化合物，味苦，具有清湿热、利小便、镇痛、降压、保肝护肝、抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、抗骨质疏松等多种生理活性，主要用于医药保健、日用化工和饲料添加剂等行业，与人类生活息息相关。[0004]目前分离纯化桃叶珊瑚苷常采用醇提铅盐沉淀法、薄层色谱分离法和大孔吸附树脂分离法：[0005]醇提铅盐沉淀法:用乙醇提取，将提取液浓缩制备浸膏，再加水转溶，然后加铅盐沉淀，滤过沉淀物，将滤液通入H2S除铅，减压浓缩后将残渣用丙酮溶解，将丙酮液浓缩，得到桃叶珊瑚苷粗品，最后重结晶得较高纯品的提取物。因为醇提铅盐沉淀法对桃叶珊瑚苷有一定的选择性，所以此方法可得到较纯的桃叶珊瑚苷提取物，但是由于使用了有毒的重金属铅，对桃叶珊瑚苷提取物的安全性有一定的影响。[0006]薄层色谱分离法：以甲醇-氯仿-石油醚-醋酸乙酯为展开剂，用薄层色谱法予以分离。该法每次分离前要制备一定数量的薄板，而薄板制备的好坏直接影响着色谱及分离效果，所以必须具备良好的制板技术，加之硅胶所吸附的桃叶珊瑚苷不能完全洗脱下来，导致分离结果偏低。[0007]大孔吸附树脂分离法：大孔吸附树脂是一种不含交换基团、具有大孔结构的高分子吸附剂，具有选择性好、