米糠粕浸汁在生产普伐他汀中的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108977469A(43)申请公布日2018.12.11(21)申请号201810082815.7C12R1/04(2006.01)(22)申请日2018.01.29(71)申请人北大方正集团有限公司地址100871北京市海淀区成府路298号方正大厦8层申请人北大医药重庆大新药业股份有限公司北大医疗产业集团有限公司(72)发明人陈华桥张葵(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君陈征(51)Int.Cl.C12P7/62(2006.01)C12N1/20(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称米糠粕浸汁在生产普伐他汀中的应用(57)摘要本发明涉及米糠粕浸汁在生产普伐他汀中的应用，具体的，在以美伐他汀为发酵底物，通过马杜拉放线菌发酵生产普伐他汀的过程中，将米糠粕浸汁添加到所述马杜拉放线菌的培养基中。本发明将米糠粕浸汁添加到马杜拉放线菌的培养基中，能够提高马杜拉放线菌对美伐他汀的耐受性，同时提高马杜拉放线菌对美伐他汀的转化能力和普伐他汀发酵水平，从而提高普伐他汀产量，降低生产成本。CN108977469ACN108977469A权利要求书1/1页1.米糠粕浸汁在以微生物发酵法生产普伐他汀中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，以美伐他汀为发酵底物，通过马杜拉放线菌发酵生产普伐他汀的过程中，在所述马杜拉放线菌的培养基中添加米糠粕浸汁。3.一种用于生产普伐他汀的马杜拉放线菌的培养基，其特征在于，所述培养基中添加有米糠粕浸汁。4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述米糠粕浸汁的添加量为3.0～10.0ml/L。5.根据权利要求4所述的培养基，其特征在于，每升所述的培养基，由包括如下重量份的原料制备而成：葡萄糖56～58g、酵母提取物22～24g、大豆蛋白胨6～7g、K2HPO4·3H2O1～2g、MgSO4·7H2O0.5～1g、(NH4)2SO41～2g、米糠粕浸汁3.0～10.0ml和消沫剂0.5～1.0g，水补足余量。6.根据权利要求5所述的培养基，其特征在于，所述培养基中米糠粕浸汁的添加量为4.0～8.0ml。7.根据权利要求4～6任一项所述的培养基，其特征在于，所述米糠粕浸汁由如下方法制备而成：取米糠粕，加入为其重量10～15倍量的水，浸泡3-8h，加热至50～100℃，回流提取1h，过滤，所得滤液即为米糠粕浸汁。8.一种利用权利要求3～7任一项所述的培养基生产普伐他汀的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将活化后的马杜拉放线菌接种到所述培养基中；2)所述马杜拉放线菌接种后30～40h，在所述培养基中添加美伐他汀，发酵生产普伐他汀，发酵过程中控制美伐他汀在发酵液中的浓度为0.6～1.0g/L，持续时间为120～145h，然后停止补加美伐他汀，继续发酵10～20h后结束发酵，得普伐他汀；优选的，所述步骤2)为：发酵过程中控制美伐他汀在发酵液中的浓度为0.8-1.0g/L；和/或，持续时间为125-140h，然后停止补加美伐他汀，继续发酵12-18h后结束发酵。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述马杜拉放线菌接种后，调整发酵温度为32-34℃，添加美伐他汀后，调整发酵温度为30-32℃。10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，每升所述的培养其中，由包括如下重量份的原料制备而成：葡萄糖56～58g、酵母提取物22～24g、大豆蛋白胨6～7g、K2HPO4·3H2O1～2g、MgSO4·7H2O0.5～1g、(NH4)2SO41～2g、米糠粕浸汁3.0～10.0ml和消沫剂0.5～1.0g，水补足余量。2CN108977469A说明书1/5页米糠粕浸汁在生产普伐他汀中的应用技术领域[0001]本发明属于发酵工程技术领域，具体涉及一种提高普伐他汀发酵产量的方法。背景技术[0002]普伐他汀是3～羟基3～甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂，最初用于治疗高血脂症和家族性高胆固醇。后来适应症不断扩大，可以减缓动脉粥样硬化的发展，减少冠状动脉粥样硬化病变和临床心血管事件的发生。长期服用普伐他汀，无论病人是否患有冠心病，都能减低各种原因所致的死亡率。因此，普伐他汀成为目前他汀类药物中仅有的可用于胆固醇水平较高的或者冠心病的病人进行心脏病、中风一级和二级防御的药物。也有研究显示，普伐他汀还能降低糖尿病和阿尔茨海默病的发生率；能抑制肝癌细胞的增殖；能有效地治疗溃疡性结肠炎，副作用少，半年复发率低；在治疗慢性心力衰竭、舒张性心力衰竭方面，可改善心功能，改善心室重塑。[0003]普伐他汀的生产通常由两步发酵过程获得，虽然也有报道或专利(WO99/10499、WO2007/147827、US6,274