一种杜氏盐藻的连续培育方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111205986A(43)申请公布日2020.05.29(21)申请号202010240030.5(22)申请日2020.03.31(71)申请人湛江国联水产开发股份有限公司地址524022广东省湛江市开发区平乐工业区永平南路(72)发明人郭立赵阳娟何加发梁薏琳邵华(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102代理人刘瑶云陈伟斌(51)Int.Cl.C12N1/12(2006.01)C12R1/89(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种杜氏盐藻的连续培育方法(57)摘要本发明公开了一种杜氏盐藻的连续培育方法，所述培育方法包含以下步骤，A：在密闭光生物反应器中配制培养基，B：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min；C：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到所述培养基中，在控制温度为23-28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，D：在步骤C之后，释放一定体积的杜氏盐生藻培养液，接入经过紫外消毒后的新鲜培养液到密闭反应器中。该杜氏盐藻的连续培育方法，提高杜氏盐藻的培养效率，通过连续发酵大大减少前期种子培养时间，同时使用紫外消毒系统，可以保证培育过程中添加新鲜无菌培养基，保证连续培育过程的正常进行。CN111205986ACN111205986A权利要求书1/1页1.一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述培育方法包含以下步骤：A：在密闭光生物反应器中配制培养基，所述每1L培养基中含有：硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA，1ml的微量元素母液和1ml的维生素母液；B：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min；C：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到所述培养基中，在控制温度为23-28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，并通入气体，得到杜氏盐生藻培养液；D：在步骤C之后，释放一定体积的杜氏盐生藻培养液，接入经过紫外消毒后的新鲜培养液到密闭反应器中。2.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述步骤A中的培养基中的pH在6.5-8之间，且硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA的含量分别在0.2-1g、0.01-0.025g、0.01-0.1g、0.01-0.1g、0.01-0.1和0.01-0.04g之间。3.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述步骤A中微量元素母液和维生素母液的体积均为1mL，并且1mL的微量元素母液中包括：生物素0.5-1.5mg/L，维生素B61-5mg/L，微生物0.1-2.0mg/L。4.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述步骤B中紫外消毒方法为：紫外线消毒灯管所发出的紫外线波长为180-254nm，且培养液的消毒时间为10-30min，并且1m³水体体积配备30-100W功率的紫外线消毒灯。5.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述接种量为5-20%，且光照时间为12小时，并且交替培养的时间为5-10天，同时培养5-10天后通入的气体为二氧化碳。6.根据权利要求5所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述通入二氧化碳与空气的比例为1：100。7.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述步骤D中释放培育好的杜氏盐生藻体积为50%，重新接入等额的培养基体积。8.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述新接入的新鲜培养液需经过紫外线消毒灯灭菌处理，紫外消毒方法为，紫外线波长为180-254nm，消毒时间为10-30min，1m³水体体积配备30-100W功率的紫外线消毒灯。2CN111205986A说明书1/4页一种杜氏盐藻的连续培育方法技术领域[0001]本发明涉及微藻类的连续培养培育技术领域，具体为一种杜氏盐藻的连续培育方法。背景技术[0002]杜氏盐藻是微藻类的一种，盐藻对于稳定血糖血压，提升睡眠质量有着很好的效果，而杜氏盐藻是一种嗜盐的绿色微藻，常见于海盐田中，由于其具备较高的食用价值，所以人们会通过人工培育的方式增加其产量，以便于满足大量的市场需求，但是现有的培育方式存在以下问题：发酵时间设定不合理，导致前期种子的培养时间过长，消毒方式不合理，导致杜氏盐藻的存活率不高，同时，不能通过连续培育的方式，在培育过程中添加新鲜无菌培养基，导致杜氏盐藻的培养效率大大降低。发明内容[0003]本发明的目的在于提供一种杜氏盐藻的连续培育方法，以解决上述背景技术中提出发酵时间设定不合理，