一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112229930A(43)申请公布日2021.01.15(21)申请号202011103037.9(22)申请日2020.10.15(71)申请人陕西科技大学地址710021陕西省西安市未央大学城(72)发明人赵燕妮陈丹李悦任嘉敏张坤曾乔秦俊哲胡歆梁艳(74)专利代理机构西安新思维专利商标事务所有限公司61114代理人李罡(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/34(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法(57)摘要本发明公开了一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法。本发明的技术方案为：对原料未知的茯茶样本，利用茯茶中甘油三酯与甘油二酯含量的比值对原料未知的茯茶进行种类判别，待测品种中甘油三酯与甘油二酯含量的比值在1.0及以上的为杜仲茯茶样品，甘油三酯与甘油二酯含量的比值在0.5以下的为黑毛茯茶样品。本发明操作简单、检测结果可靠，可为茯茶代谢特征分析及相关茯茶脂质组学研究提供借鉴。CN112229930ACN112229930A权利要求书1/1页1.一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：利用茯茶中甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值对原料未知的茯茶进行种类判别，待测品种中甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在1.0及以上的为杜仲茯茶样品，甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在0.5以下的为黑毛茯茶样品。2.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：具体方法为：首先制备茯茶样品提取液，然后采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱的脂质组学分析方法对茯茶样品中的甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)进行相对定量分析，计算甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值，待测样本中甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在1.0及以上的为杜仲茯茶样品，甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在0.5以下的为黑毛茯茶样品。3.根据权利要求2所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：所述茯茶样品提取液的制备方法为：将茶样于-80℃冰箱取出，置于冷冻干燥机干燥，采用高速粉碎机对茶样进行粉碎；称取茶样20mg于离心管中，加入300μL甲醇溶液和1mLMTBE，摇匀涡旋1h后，加入300μLH2O涡旋30s，在4℃下静置10min，14000r·min-1转速离心10min，取500μL上清液冻干，于-80℃保存；进样分析前，复溶于100μL的乙腈/异丙醇/水=65/30/5（v/v/v）溶液中，涡旋3min，以14000r·min-1转速在10℃下离心10min，取上清液于进样瓶中。4.根据权利要求3所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：所述色谱的检测条件为：采用DionexUltiMate3000UPLCsystem系统（ThermoFisher）和色谱柱C8AQUITY（2.1×100mm×1.7μm，Waters）进行LC分离；所用流动相为：流动相A（ACN:H2O=6:4，含10mM乙酸铵），流动相B（IPA:ACN=9:1,含10mM乙酸铵）；洗针液（IPA:ACN:H2O=65:30:5)；流速：0.26mLmin-1；柱温：55℃；进样体积：5-10μL；进样室温度：10℃；洗脱梯度：0min68%A、1.5min68%A、15.5min15%A、15.6min3%A、18min3%A、18.1min68%A、20min68%A。5.根据权利要求4所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：所述质谱的检测条件为：UHPLC系统经电喷雾离子化（ESI）源与QExactiveOrbitrap质谱相连；分别采用正、负离子模式采集数据，鞘气35arb，辅助气5arb，毛细管电压3kV，离子传输管温度为320℃；质谱全扫模式下，仪器分辨率设置为120000，扫描范围为150-1600m/z，阶梯碰撞能量：15、30、45EV。2CN112229930A说明书1/4页一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法技术领域[0001]本发明属于分析化学领域