一种虫草素纳米脂质体及其制备方法与抗肿瘤活性应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106798725A(43)申请公布日2017.06.06(21)申请号201510827735.6(22)申请日2015.11.26(71)申请人王春梅地址100102北京市朝阳区望京方舟苑6#楼401(72)发明人王春梅武鹏凯陶志欧阳召(51)Int.Cl.A61K9/127(2006.01)A61K31/7076(2006.01)A61P35/00(2006.01)A61P35/02(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图2页(54)发明名称一种虫草素纳米脂质体及其制备方法与抗肿瘤活性应用(57)摘要本发明属于医药技术领域，公开了一种虫草素脂质体及其制备方法与抗肿瘤活性应用。虫草素体内易被降解失活，本发明产物的体内外抗肿瘤活性结果表明虫草素脂质体对肝癌有显著抑制作用，表明本发明提供的脂质体剂型很好的保持了虫草素的体内活性。虫草素脂质体现有制备方法难以获得高包封率。本发明所述脂质体包括虫草素、磷脂、胆固醇、表面活性剂和抗氧化剂。其制备方法为pH梯度法与逆向蒸发法联合使用。该方法获得的脂质体包封率高(≥90％)，粒径均匀，稳定性好。CN106798725ACN106798725A权利要求书1/1页1.虫草素纳米脂质体，其特征在于所述脂质体中各成分的重量百分比为：虫草素1～20％，磷脂10～80％，固醇10～40％，脂质体表面活性剂0～30％，抗氧化剂0～10％，其余为去离子水。2.如权利要求1所述的虫草素纳米脂质体，其特征在于所述脂质体中各成分的重量百分比为：虫草素1～10％，磷脂20～70％，固醇10～30％，脂质体表面活性剂1～30％，抗氧化剂0.1～8％，其余为去离子水。3.如权利要求1所述的虫草素脂纳米质体，其特征在于：所述脂质体中磷脂可以为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、氢化大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱。4.如权利要求1所述的虫草素纳米脂质体，其特征在于：所述脂质体中固醇可以为胆固醇、二氢胆固醇或麦角固醇。5.如权利要求1所述的虫草素纳米脂质体，其特征在于：所述脂质体中脂质体表面活性剂可以为吐温80、甘露醇、脂肪酸甘油酯或单硬脂酸甘油酯。6.如权利要求1所述的虫草素纳米脂质体，其特征在于：所述脂质体中抗氧化剂可以为维生素C、E、丁基羟基茴香醚或二丁基羟基甲苯。7.如权利要求1所述的虫草素纳米脂质体的制备方法，其特征在于：采用如下方法“pH梯度法-逆向蒸发法”制备而成，具体包括以下步骤：(1)将磷脂、固醇和附加剂置于容器中，加入有机溶剂溶解，形成澄清透明液体，作为有机相；(2)将虫草素或其衍生物加入到内水相为pH4.0的酸性缓冲液中混匀，将其加入到有机相中，用高剪切分散乳化机乳化，得到W/O型乳状液；(3)将上述乳状液经减压旋转蒸发去除有机溶剂，至形成凝胶状脂质，继续旋蒸，直至凝胶脱落，形成脂质体混悬液；(4)将上述脂质体混悬液以1.0mol/L的碱性溶液调节pH至7-7.4，再以pH7.4的碱性缓冲液调节浓度至0.1-0.3mol/L；(5)将所得溶液经探头式超声乳化，并将其置于30～70℃水浴中一定时间，取出后立即冰水浴冷却，既得W/O型脂质体混悬液；(6)将得到的W/O型脂质体混悬液分别过0.45μm和0.22μm滤膜得到纳米脂质体。8.如权利要求7所述的虫草素纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中有机溶剂可以是氯仿或甲醇。9.如权利要求1所述的虫草素纳米脂质体的在制备抗肿瘤药物方面的应用，其中所述肿瘤包括：肝癌、白血病。10.如权利要求9所述的应用，其特征在于：药物剂型为静脉注射剂。2CN106798725A说明书1/8页一种虫草素纳米脂质体及其制备方法与抗肿瘤活性应用技术领域：[0001]本发明属于新药研发技术领域，特别涉及一种虫草素纳米脂质体及其制备方法与抗肿瘤活性应用。背景技术：[0002]虫草素(cordycepin)又称虫草菌素、蛹虫草素，是最早从蛹虫草中提取出来的活性单体成分，有研究表明，虫草素能促进细胞分化，抑制mRNA的合成，并诱导细胞凋亡，从而抑制多种肿瘤细胞生长(TuliHS，SharmaAK，SandhuSS，KashyapD.Cordycepin：Abioactivemetabolitewiththerapeuticpotential.LifeSci.2013，93(23)：863-869.)。不过，也有相关报道，在体外具有的广泛而强大的抑制肿瘤细胞生长的虫草素在体内几乎没有活性。研究表明，虫草素在体内易被体内的腺苷脱氨酶(ADA)降解成为无抗肿瘤活性的3′-脱氧肌苷(FrederiksenS，MallingH，KlenowH.Isolationof3’-deoxyadenosine