一种防治果树腐烂病的生防菌发酵液及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108077319A(43)申请公布日2018.05.29(21)申请号201810040275.6C12N1/16(2006.01)(22)申请日2018.01.16C12R1/645(2006.01)C12R1/885(2006.01)(71)申请人河北省农林科学院石家庄果树研究所地址050061河北省石家庄市学府路5号(72)发明人马文会杨阳李学华王景涛贾彦丽王越辉白瑞霞吴硕武晓红董辉(74)专利代理机构西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙)61223代理人韩晓娟(51)Int.Cl.A01N63/04(2006.01)A01P3/00(2006.01)C12N1/14(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种防治果树腐烂病的生防菌发酵液及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种防治果树腐烂病的生防菌发酵液，该生防菌发酵液由梅奇酵母Y-3发酵液与长枝木霉CD-6发酵液按照1：5-10的质量比混合配制而成；其中，生防菌发酵液中菌落总数为1.0×106-1.0×1010cfu/mL。此外，本发明还提供了一种防治果树腐烂病的生防菌发酵液的制备方法。本发明生防菌发酵液具有防治效果好、效率高、复发率低、适应环境能力强、稳定强、不易产生抗药性等多重优点，是生物防治的首选，对提高果树腐烂病等果蔬病原菌的防治效果、防止病原菌复发、保护环境具有重要意义。CN108077319ACN108077319A权利要求书1/1页1.一种防治果树腐烂病的生防菌发酵液，其特征在于，该生防菌发酵液由梅奇酵母Y-3发酵液与长枝木霉CD-6发酵液按照1：5-10的质量比混合配制而成；其中，所述生防菌发酵液中菌落总数为1.0×106-1.0×1010cfu/mL。2.根据权利要求1所述的防治果树腐烂病的生防菌发酵液，其特征在于，该生防菌发酵液由梅奇酵母Y-3发酵液与长枝木霉CD-6发酵液按照1：8的质量比混合配制而成；其中，所述生防菌发酵液中菌落总数为1.0×108cfu/mL。3.根据权利要求1所述的防治果树腐烂病的生防菌发酵液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，将梅奇酵母Y-3的纯菌株在PDA平板划线培养，28℃培养48h，然后挑取单菌落于NYDB液体培养基中以200r/min的振荡速度培养72h，得到梅奇酵母Y-3的初始发酵液；将长枝木霉CD-6的纯菌株在PDA平板划线培养，28℃培养48h，挑取单菌落于YSP液体培养基中以200r/min的振荡速度培养24h，得到长枝木霉CD-6的初始发酵液；步骤2，将梅奇酵母Y-3的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养72h，得到梅奇酵母Y-3发酵液；将长枝木霉CD-6的初始发酵菌液置于NYDB液体培养基中，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养24h，得到长枝木霉CD-6发酵液；步骤3，将步骤2中得到的梅奇酵母Y-3发酵液与长枝木霉CD-6发酵液按照1：5-10的质量比混合，即得到所述防治果树腐烂病的生防菌发酵液。4.根据权利要求3所述的防治果树腐烂病的生防菌发酵液的制备方法，其特征在于，每升所述NYDB液体培养基由以下组分制成：牛肉膏8g、酵母浸膏5g、葡萄糖10g，余量为水。5.根据权利要求3所述的防治果树腐烂病的生防菌发酵液的制备方法，其特征在于，每升所述YSP液体培养基由以下组分制成：蛋白胨10g、酵母膏5g、葡萄糖10g，余量为水。2CN108077319A说明书1/6页一种防治果树腐烂病的生防菌发酵液及其制备方法技术领域[0001]本发明属于果树病虫害防治技术领域，具体涉及一种防治果树腐烂病的生防菌发酵液及其制备方法。背景技术[0002]腐烂病是一种果树的主要枝干病害，在世界各地均有发生。多年来腐烂病在各地大量蔓延，是危害我国果林业的头等病害，被称为果树的癌症。果树腐烂病主要是由真菌引起的病害，该病菌属于弱寄生菌，主要通过伤口侵入，也可从枝干的皮孔和芽眼等处侵入。生长健壮、抗病能力强的树，病菌可潜伏相当长的时间不发病；而树势弱、抗病能力差的树，发病迅速，很快引起树皮腐烂。腐烂病是一种毁灭性的病害，腐烂病发生严重的果园，很可能会造成树体病疤累累，枝干残缺不全，甚至造成死树和毁园。[0003]当前，生产上主要使用化学药剂防治果树腐烂病。然而，长期大量使用化学药剂不仅使果园生态环境恶化并给食品安全带来极大隐患，而且容易导致腐烂病菌抗药性菌株的出现。生物防治技术作为一种安全有效的防治措施越来越受到人们的关注。国内外学者先后报道哈茨木霉(Trichodermaharzianum)、深绿木霉(Trichodermaatroviride)、螺旋毛壳(Chaeto