蛋白A结合多肽、抗EPHA2抗体及其使用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108778328A(43)申请公布日2018.11.09(21)申请号201780009432.0(72)发明人J·D·马克斯D·德拉蒙德M格(22)申请日2017.03.13·迪D·柯波廷N·克里A·卢格维斯凯(30)优先权数据62/309,3652016.03.16US(74)专利代理机构北京龙双利达知识产权代理62/309,3832016.03.16US有限公司1132962/309,3742016.03.16US代理人孙涛肖鹂(85)PCT国际申请进入国家阶段日(51)Int.Cl.2018.08.02A61K39/395(2006.01)C07K16/18(2006.01)(86)PCT国际申请的申请数据C07K16/46(2006.01)PCT/US2017/0221882017.03.13(87)PCT国际申请的公布数据WO2017/160775EN2017.09.21(71)申请人加利福尼亚大学董事会地址美国加利福尼亚州权利要求书11页说明书32页申请人梅里马克制药股份有限公司序列表104页附图25页(54)发明名称蛋白A结合多肽、抗EPHA2抗体及其使用方法(57)摘要本公开提供了诸多抗体(例如scFv)，所述抗体包括赋予所述抗体以有用性质的CDR和人构架区。在某些实施方案中，此类性质包括热稳定性(例如解链温度增高)、与金黄色葡萄球菌蛋白A有效结合或二者。在某些方面，所述抗体是特异性地结合至肿瘤相关抗原EphA2的内在化抗体。CN108778328ACN108778328A权利要求书1/11页1.一种抗A型Ephrin受体2(EphA2)抗体，所述抗体包含：VH，所述VH包含：VHCDR1，所述VHCDR1包含氨基酸序列SYAMH(SEQIDNO:17)；VHCDR2，所述VHCDR2包含以下具有17个氨基酸的氨基酸序列：X17ISPX18GX19NX20YYADSVKG(SEQIDNO:18)，其中：X17是A或V；X18是A、D、H、N、P、S或T；X19是A、R、H、N或P；并且X20是K或T；和VHCDR3，所述VHCDR3包含氨基酸序列ASVGATGPFDI(SEQIDNO:19)；以及VL，所述VL包含：VLCDR1，所述VLCDR1包含氨基酸序列QGDSLRSYYAS(SEQIDNO:20)；VLCDR2，所述VLCDR2包含氨基酸序列GENNRPS(SEQIDNO:21)；和VLCDR3，所述VLCDR3包含氨基酸序列NSRDSSGTHLTV(SEQIDNO:22)；其中所述抗体免疫特异性地结合EphA2的细胞外域。2.一种结合蛋白A的多肽，其中所述多肽包含以下氨基酸序列：a)XaX17ISXbX18GX19NX20(SEQIDNO:198)，其中Xa是S、T或A；X17是A或V；Xb是P、R、N或H；X18和X19是任何氨基酸；并且X20是K或T；b)XaVISXbX18GX19NX20(SEQIDNO:199)，其中Xa是S或T；Xb是P、R或N；X18是任何氨基酸；X19是H、N、R、T、A、D、P或S；并且X20是K或T；c)XaVISXbX18GX19NX20(SEQIDNO:200)，其中Xa是S或T；Xb是P、R或N；X18是任何氨基酸；X19是H、N、R或T；并且X20是T或K；或d)XaX17ISXbX18GX19NX20(SEQIDNO:201)，其中2CN108778328A权利要求书2/11页Xa是S或T；X17是V；Xb是P；X18是任何氨基酸；X19是H、N、R或T；并且X20是T或K。3.如权利要求2所述的多肽，其中所述多肽包含氨基酸序列SEQIDNO:177-197之一。4.如权利要求2或3所述的多肽，其中所述多肽包含：VHCDR1，所述VHCDR1包含氨基酸序列SYAMH(SEQIDNO:17)；蛋白A结合序列，所述蛋白A结合序列包含氨基酸序列SEQIDNO:177至201之一；和VHCDR3，所述VHCDR3包含氨基酸序列ASVGATGPFDI(SEQIDNO:19)。5.一种抗体，所述抗体包含VH和VL，其中所述VH包含如权利要求2至4中任一项所述的多肽。6.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体是人抗体或人源化抗体。7.如权利要求5所述的抗体，其中所述抗体是人抗体或人源化抗体。8.如权利要求1或6所述的抗体，其中所述抗体包含至少一个选自由以下各项组成的组的构架区：(a)人VH构架区1(VHFR1)，所述人VHFR1包含氨基酸序列QVQLVX1SGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS(SEQIDNO:1)，其中X1是除E以外的氨基酸；(b)人VH构架区2(VHFR2)，所