蜡梅CpSNAC1基因启动子及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110229818A(43)申请公布日2019.09.13(21)申请号201910539962.7(22)申请日2019.06.21(71)申请人西南大学地址400700重庆市北碚区天生路2号西南大学农学与生物科技学院(72)发明人刘道凤黄敏田明杨李名扬眭顺照(74)专利代理机构成都蓉创智汇知识产权代理有限公司51276代理人谭新民(51)Int.Cl.C12N15/113(2010.01)C12N15/82(2006.01)A01H5/00(2018.01)A01H6/00(2018.01)权利要求书1页说明书12页序列表5页附图9页(54)发明名称蜡梅CpSNAC1基因启动子及其应用(57)摘要本发明涉及基因工程领域，具体涉及蜡梅CpSNAC1基因启动子及其应用。本发明的目的在于为提高蜡梅抗性提供一种新选择。本发明首次扩增获得蜡梅CpSNAC1基因的启动子，并克隆得到3个CpSNAC1启动子缺失片段，通过实时荧光定量PCR技术检测CpSNAC1基因的表达特性，通过转基因技术、GUS组织化学染色、GUS酶活性定量检测等方法初步验证了CpSNAC1基因启动子的表达调控特点。该结果可为研究蜡梅逆境胁迫相关调控提供参考。CN110229818ACN110229818A权利要求书1/1页1.蜡梅CpSNAC1基因启动子，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNo.15第974～1437位所示。2.蜡梅CpSNAC1基因启动子，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNo.15第727～1437位所示。3.蜡梅CpSNAC1基因启动子，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNo.15第215～1437位所示。4.蜡梅CpSNAC1基因启动子，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNo.15第1～1437位所示。5.权利要求1～4任一项所述的蜡梅CpSNAC1基因启动子在调控植物逆境抗性中的用途。6.如权利要求5所述的蜡梅CpSNAC1基因启动子在调控植物逆境抗性中的用途，其特征在于：所述的植物为拟南芥或蜡梅。7.如权利要求5或6所述的蜡梅CpSNAC1基因启动子在调控植物逆境抗性中的用途，其特征在于：所述的逆境为激素、高盐、干旱、高温或低温。具体的，所述的激素处理为浓度50μM·L-1脱落酸处理。具体的，所述的高盐为浓度150mM·L-1的NaCl处理。具体的，所述的干旱为浓度10％质量分数的PEG处理。具体的，所述的高温为42℃。具体的，所述的低温为4℃。2CN110229818A说明书1/12页蜡梅CpSNAC1基因启动子及其应用技术领域[0001]本发明涉及基因工程领域，具体涉及蜡梅CpSNAC1基因启动子及其应用。背景技术[0002]蜡梅(ChimonanthuspraecoxL.)，落叶丛生灌木，暖地常表现半常绿状，高度达3～4m，花期12月到第2年的3月，远在展叶前开放，果约8月成熟。蜡梅是蜡梅科蜡梅属的一种观赏性极强的树种，素以在寒冬腊月傲雪盛放而名，花朵颜色淡雅，花香扑鼻，沁人心脾，是我国的传统名贵花木，除了具有较高的观赏价值外，还有珍贵的文化价值、药用价值和经济价值。随着现代分子生物技术的发展，对蜡梅的研究已经从传统分类学研究和一些应用价值研究转向了分子水平的研究。[0003]NAC(NAM、ATAF1、ATAF2和CUC2)转录因子家族是植物基因组中最大的转录因子家族之一，也是植物特有的转录因子。NAC家族转录因子的名字取自最早发表的3个具有NAC结构域基因的首字母缩写，分别是从矮牵牛上发现的NAM基因和从拟南芥上发现的ATAF1/2和CUC2基因。植物NAC转录因子具有多种功能，对植物的生长发育调控、植物的逆境胁迫应答、调控植物的抗病性、参与植物次生生长调控以及激素信号转导等生理过程中具有重要作用。[0004]目前，有关NAC基因转录因子的研究已经比较广泛与透彻，但是对其启动子的相关研究并不多。相关研究发现NAC家族基因启动子序列中除了含有启动子TATA-box、CAAT-box等基本的组成元件之外，还含有一些特有的与激素、抗逆境、组织器官发育等相关的顺式作用元件，推测对NAC转录因子的激活和诱导起到调控作用。发明内容[0005]本发明的目的在于为提高蜡梅抗性提供一种新选择。[0006]本发明提供了蜡梅CpSNAC1基因启动子，其核苷酸序列如SEQIDNo.15第974～1437位所示。[0007]进一步的，所述的蜡梅CpSNAC1基因启动子，其核苷酸序列如SEQIDNo.15第727～1437位所示。[0008]进一步的，所述的蜡梅CpSNAC1基因启动子，其核苷酸序列如SEQIDNo.15第215～1437位所示。[0009]进一步的，所述