痔宁片HPLC标准指纹图谱的构建方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111693630A(43)申请公布日2020.09.22(21)申请号202010686116.0(22)申请日2020.07.16(71)申请人华润三九（郴州）制药有限公司地址423000湖南省郴州市开发区科技工业园(72)发明人戚建中李军李柯陈丹唐湘黔刘春方龚小兵陈光建符国成陈海刚(74)专利代理机构郴州大天知识产权事务所(普通合伙)43212代理人徐起堂(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/34(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图4页(54)发明名称痔宁片HPLC标准指纹图谱的构建方法及其应用(57)摘要本发明公开了一种痔宁片HPLC标准指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：(1)取芍药苷对照品、黄芩苷对照品、没食子酸对照品、柚皮苷对照品、橙皮苷对照品、芦丁对照品、杨梅苷对照品，用50%甲醇溶液溶解，制成混合对照品溶液；(2)取痔宁片粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，加入50mL50%的甲醇溶液，超声处理30min，冷却，并以50%的甲醇溶液补重，摇匀，滤过，取续滤液；(3)将样品溶液在高效液相色谱中进行梯度洗脱，得到HPLC标准指纹图谱。还公开了一种根据上述构建方法得到的标准指纹图谱在痔宁片质量检测方面的应用。本方法更能准确的把关药品的质量，保证痔宁片的质量稳定性。CN111693630ACN111693630A权利要求书1/1页1.一种痔宁片HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取芍药苷对照品、黄芩苷对照品、没食子酸对照品、柚皮苷对照品、橙皮苷对照品、芦丁对照品、杨梅苷对照品，用50%甲醇溶液溶解，制成混合对照品溶液，每1mL混合对照品溶液中含芍药苷60μg、黄芩苷0.2mg、没食子酸25μg、柚皮苷0.2mg、橙皮苷35μg、芦丁0.2mg、杨梅苷0.1mg；(2)取痔宁片粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，加入50mL50%的甲醇溶液，称重，超声处理30min，冷却，重新称重，并以50%的甲醇溶液补重，摇匀，滤过，取续滤液；(3)将样品溶液在高效液相色谱中进行梯度洗脱，得到HPLC标准指纹图谱；高效液相色谱的流动相A为乙腈，流动相B为体积分数0.05-0.2％的磷酸水溶液。2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述痔宁片用地榆炭、侧柏叶炭、地黄、槐米、酒白芍、荆芥炭、当归、黄芩、枳壳、刺猬（制）、乌梅、甘草；所述痔宁片的制备方法为：当归、枳壳提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与地榆炭、侧柏叶炭、地黄、槐米、酒白芍、荆芥炭、黄芩、刺猬皮（制）、乌梅、甘草，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35（80℃）的清膏，低温干燥，粉碎，制粒，喷入上述挥发油，压片，包薄膜衣。3.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，流动相B为体积分数0.1％的磷酸水溶液。4.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，高效液相色谱的操作条件是：WelchultimateAQ-C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相A为乙腈，流动相B为体积分数0.1％的磷酸水溶液，梯度洗脱；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；进样量10μL，洗脱程序是：0～40min流动相A：B由5％：95％→20％：80％；40～50min流动相A：B由20％：80％→24％：76％；50～60min流动相A：B由24％：76％→30％：70％；60～70min流动相A：B由30％：70％→35％：65％；70～85min流动相A：B由35％：65％→5％：95％。5.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中的甲醇溶液的体积分数相同，且均为40-60％。6.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中的甲醇溶液的体积分数均为50％。7.一种根据权利要求1-6任一项所述的构建方法得到的标准指纹图谱在痔宁片质量检测方面的应用。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，将痔宁片制成待测品溶液，在与权利要求1-6任一项所述的构建方法中所使用的相同的高效液相色谱操作条件下进行梯度洗脱得到待测品HPLC指纹图谱，并与HPLC标准指纹图谱进行对比。2CN111693630A说明书1/7页痔宁片HPLC标准指纹图谱的构建方法及其应用技术领域[0001]本发明涉及痔宁片的质量检测领域，具体而言，涉及一种痔宁片HPLC标准指纹图谱的构建方法及其应用。背景技术[0002]痔宁片收录于2015版《中国药典》一部，由地榆炭、侧柏叶炭、地黄、槐米、酒白芍、荆芥炭、当归、黄芩、枳壳、刺猬皮（制）