用于肺部良恶性结节诊断的血清代谢标志物及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113960312A(43)申请公布日2022.01.21(21)申请号202111319457.5(22)申请日2021.11.09(71)申请人上海市第一人民医院地址200080上海市虹口区武进路85号(72)发明人娄加陶王琳范江王兴(74)专利代理机构上海元好知识产权代理有限公司31323代理人贾慧琴包姝晴(51)Int.Cl.G01N33/574(2006.01)G01N33/50(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图1页(54)发明名称用于肺部良恶性结节诊断的血清代谢标志物及其应用(57)摘要本发明提供一种用于诊断肺部良恶性结节的代谢标志物及其应用，该代谢标志物选自4‑羟基‑L‑脯氨酸、猪去氧胆酸、黄嘌呤、2‑羟基‑6‑氨基嘌呤、5,6‑二氢胸腺嘧啶、异丁酰肉碱、鸟嘌呤、谷氨酸、天冬酰胺、刺芒柄花素、丙氨酸和犬尿酸的一种或多种组合。本发明提供的12种代谢标志物能精确诊断区分肺部良恶性结节，灵敏度高，特异性强，能够很好地替代现有组织活检及影像学诊断模式，减少创伤和辐射风险，具备临床使用推广价值。CN113960312ACN113960312A权利要求书1/2页1.一种用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物，其特征在于，所述代谢标志物至少选自4‑羟基‑L‑脯氨酸、猪去氧胆酸、黄嘌呤、2‑羟基‑6‑氨基嘌呤、5,6‑二氢胸腺嘧啶、异丁酰肉碱、鸟嘌呤、谷氨酸、天冬酰胺、刺芒柄花素、丙氨酸、犬尿酸中的至少一种。2.根据权利要求1所述的用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物，其特征在于，所述代谢标志物至少选自4‑羟基‑L‑脯氨酸、猪去氧胆酸、黄嘌呤中的至少一种。3.根据权利要求2所述的用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物，其特征在于，所述代谢标志物还选自2‑羟基‑6‑氨基嘌呤、5,6‑二氢胸腺嘧啶、异丁酰肉碱、鸟嘌呤、谷氨酸中的至少一种。4.根据权利要求2或3所述的用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物，其特征在于，所述代谢标志物还选自天冬酰胺、刺芒柄花素、丙氨酸、犬尿酸中的至少一种。5.权利要求1至4任一项所述的用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物在制备诊断或监测肺部良恶性结节的代谢物数据库、试剂产品或者试剂盒中的应用。6.一种试剂产品或者检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1至4任一项所述的用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物的标准品。7.根据权利要求6所述的试剂产品或者检测试剂盒，其特征在于，还包括提取试剂和内标物。8.根据权利要求7所述的试剂产品或者检测试剂盒，其特征在于，所述内标物为L‑苯基丙氨酸。9.一种根据权利要求1至4任一项所述的用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：分别采集肺部良性结节组样本和肺部恶性结节组样本；随机挑选肺部良性结节组、肺部恶性结节组各20％的样本，采用增强离子扫描质谱和飞行时间质谱结合多反应监测采集模式的代谢组学方法，以及整合本地标准品数据库进行肺部良恶性结节血清代谢物数据库构建；采用构建肺部良恶性结节血清代谢物数据库和LC‑MS检测对采集的血清样本进行分析，得到各血清样本的原始质谱数据；使用MultiQuant软件，根据质荷比、保留时间对原始质谱数据进行预处理和校正；根据质谱峰强度计算峰面积得到代谢物相对含量信息；将代谢物相对含量信息进行多元统计正交‑偏最小二乘法判别分析，并根据变量权重值大于1及单变量统计分析的P值小于0.05的筛选标准，得到候选差异代谢物；将候选差异代谢物进行二元逻辑回归建模，筛选优异代谢物及其组合对肺部良恶性结节患者进行诊断，对筛选的优异代谢物及其组合进行受试者工作特征曲线分析，确定用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物。10.权利要求9所述的用于诊断或监测肺部良恶性结节的代谢标志物的筛选方法，其特征在于，LC‑MS检测的条件为：色谱柱：WatersACQUITYUPLCHSST3C181.8μm，2.1mm*100mm；流动相：A相为含0.1％乙酸水溶液，B相为含0.1％乙酸的乙腈溶液，流速0.4mL/min；洗脱梯度程序为：0min，A相与B相的体积比为95:5；2CN113960312A权利要求书2/2页11.0min，A相与B相的体积比为10:90；12.0min，A相与B相的体积比为10:90；12.1min，A相与B相的体积比为95:5；14.0min，A相与B相的体积比为95:5。3CN113960312A说明书1/10页用于肺部良恶性结节诊断的血清代谢标志物及其应用技术领域[0001]本发明涉及检测诊断技术领域，具体涉及一种用于肺部良恶性结节诊断的血清代谢标志物及其筛选方法和应用。背景技术[0002]肺癌是中