一种脱色用β-甘露聚糖酶及其用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105621630A(43)申请公布日2016.06.01(21)申请号201610031200.2(22)申请日2016.01.18(71)申请人黑龙江大学地址150080黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路74号黑龙江大学(72)发明人葛菁萍平文祥赵丹李兴霖金曼(74)专利代理机构北京市诚辉律师事务所11430代理人朗坚(51)Int.Cl.C02F3/34(2006.01)C12N9/24(2006.01)权利要求书1页说明书3页附图4页(54)发明名称一种脱色用β-甘露聚糖酶及其用途(57)摘要本发明涉及一种β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途，所述染料为偶氮类染料、三芳甲烷类染料，其中所述偶氮类染料为刚果红、甲基橙、达旦黄和铬黑T；所述三芳甲烷类染料为水溶苯胺蓝、孔雀石绿、结晶紫和苯酚红。所述β-甘露聚糖酶是由地衣芽胞杆菌，优选地是由地衣芽胞杆菌HDGLJT-01产出的，具体是由以下方法制备的：将过夜培养的地衣芽胞杆菌HDGLJT-01种子液转接至魔芋胶发酵产酶培养基中，37℃、160rpm振荡培养48h，取40mL发酵液，4500r/min、4℃离心20min，得到的上清液，即粗酶液；利用丙酮沉淀法纯化粗酶液，再采用离子交换层析和凝胶过滤层析进一步纯化。本发明的产品比商品化的β-甘露聚糖酶脱色效果好。CN105621630ACN105621630A权利要求书1/1页1.一种β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途。2.根据权利要求1所述的β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途，其中所述染料为偶氮类染料、三芳甲烷类染料。3.根据权利要求2所述的β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途，其中所述偶氮类染料为刚果红、甲基橙、达旦黄、铬黑T；所述三芳甲烷类染料为水溶苯胺蓝、孔雀石绿、结晶紫和苯酚红。4.根据权利要求1-3任一项所述的β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途，其中所述β-甘露聚糖酶是由地衣芽胞杆菌，优选地是由地衣芽胞杆菌HDGLJT-01产出的。5.根据权利要求1-4任一项所述的β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途，其中所述β-甘露聚糖酶是由以下方法制备的：将过夜培养的地衣芽胞杆菌HDGLJT-01种子液转接至魔芋胶发酵产酶培养基中，37℃、160rpm振荡培养48h，取40mL发酵液，4500r/min、4℃离心20min，得到的上清液，即粗酶液；利用丙酮沉淀法纯化粗酶液，再采用离子交换层析和凝胶过滤层析进一步纯化。6.根据权利要求5所述的β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途，其中，离子交换层析和凝胶过滤层析是指：将浓缩酶液加入已平衡好的DEAE-sepharoseFF离子交换柱中，用0.1mol/L的NaCl和0.005mol/L、pH为7.0的Tris-HCl进行梯度洗脱，收集洗脱液，检测酶活和蛋白含量；将5mL离子交换纯化的酶液加到以平衡好的sepadexG-75柱子中，用纯水作为洗脱液，洗脱流速为0.5mol/min，收集洗脱液。7.一种制备β-甘露聚糖酶的方法，其是将过夜培养的地衣芽胞杆菌HDGLJT-01种子液转接至魔芋胶发酵产酶培养基中，37℃、160rpm振荡培养48h，取40mL发酵液，4500r/min、4℃离心20min，得到的上清液，即粗酶液；利用丙酮沉淀法纯化粗酶液，再采用离子交换层析和凝胶过滤层析进一步纯化；优选地，所述离子交换层析和凝胶过滤层析是指将浓缩酶液加入已平衡好的DEAE-sepharoseFF离子交换柱中，用0.1mol/L的NaCl和0.005mol/L、pH为7.0的Tris-HCl进行梯度洗脱，收集洗脱液，检测酶活和蛋白含量；将5mL离子交换纯化的酶液加到以平衡好的sepadexG-75柱子中，用纯水作为洗脱液，洗脱流速为0.5mol/min，收集洗脱液。8.一种脱色用β-甘露聚糖酶，其特征在于，其是由地衣芽胞杆菌HDGLJT-01产出的；优选地，其是由权利要求7所述的方法制备而成的。2CN105621630A说明书1/3页一种脱色用β-甘露聚糖酶及其用途技术领域[0001]本发明涉及一种甘露聚糖酶的用途，具体涉及所述酶的脱色用途。背景技术[0002]染料广泛用于食品、制药、化妆品、纺织和皮革等行业，目前已报道的染料超过1万种，每年生产的染料超过7000万吨。在染料生产和使用过程中，大量的染料废水直接排放到环境中，不仅影响水体的透明度和溶氧量，而且会产生如联苯胺一类的致癌物质，因此染料废水的处理越来越受到人们的关注。传统的物理和化学方法由于其成本高，能耗大，且容易形成有毒的副产物，在实际应用中受到一定的限制。在这种情况下，迫切需要一种成本和能耗低、无二次污染、环境友好、操作简单的处理方法，研究者将视线转到生物酶降解法。该方法是通过微生