天山雪莲种子中的倍半萜内酯类化合物及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107118188A(43)申请公布日2017.09.01(21)申请号201710320098.2(22)申请日2017.05.09(71)申请人中国科学院新疆理化技术研究所地址830011新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市北京南路40号附1号(72)发明人阿吉艾克拜尔·艾萨马依拉·赛力哈孜李俊(74)专利代理机构乌鲁木齐中科新兴专利事务所65106代理人张莉(51)Int.Cl.C07D307/93(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图2页(54)发明名称天山雪莲种子中的倍半萜内酯类化合物及其制备方法(57)摘要本发明涉及一种天山雪莲种子中的倍半萜内酯类化合物及其制备方法，该化合物以天山雪莲种子药材为原料，用有机溶剂提取和萃取后，通过硅胶柱层析法、葡聚糖凝胶LH-20柱层析法、反相ODS柱层析、制备型高效液相色谱的三种或四种方式进行分离，采取薄层层析法检测分析，得到天山雪莲种子中的倍半萜内酯类化合物，化学名称为（3S，3aR，4S，6aR，8R，9aS，9bR）-4,8-二羟基-3-甲基-6,9-二甲基二氢薁基[4,5-b]呋喃-2（9bH-酮）。CN107118188ACN107118188A权利要求书1/1页1.一种天山雪莲种子中的倍半萜内酯化合物，其特征在于该化合物的结构式(Ⅰ)为：其中：化合物(Ⅰ)被命名为雪莲內酯D，其化学名称为(3S，3aR，4S，6aR，8R，9aS，9bR)-4,8-二羟基-3-甲基-6,9-二甲基二氢薁基[4,5-b]呋喃-2(9bH-酮)。2.根据权利要求1所述的天山雪莲种子中倍半萜内酯化合物的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a、以天山雪莲种子为原料，粉碎后，用3-10倍体积浓度的75-95％乙醇、无水乙醇或甲醇进行室温下冷浸提取，或温度20-70℃加热回流提取，提取液经减压浓缩后得到粗提物；b、将步骤a得到的粗提物用蒸馏水分散，用石油醚进行萃取3-5次后，水层用三氯甲烷或二氯甲烷萃取3-5次，将萃取液浓缩，得到萃取物浸膏；c、将步骤b得到的萃取物浸膏经正相硅胶柱层析分离，然后经过葡聚糖凝胶LH-20柱层析或反相ODS柱层析纯化后，再用高效液相色谱进行纯化，即得到倍半萜内酯类化合物雪莲內酯D。3.根据权利要求2所述雪莲种子中的倍半萜内酯类化合物的制备方法，其特征在于步骤c中所用正相硅胶柱层析法为常压或加压柱层析，所用洗脱剂为二氯甲烷或三氯甲烷和甲醇的混合溶剂，采用梯度洗脱。4.根据权利要求3所述的雪莲种子倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于步骤c中葡聚糖凝胶LH-20柱层析法的洗脱剂为体积比1:1的甲醇:三氯甲烷或甲醇:二氯甲烷等度洗脱，或体积浓度10-60％甲醇-水梯度洗脱。5.根据权利要求3所述的雪莲种子倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于步骤c中反相柱ODS柱层析采用体积浓度10-90％的甲醇-水或乙腈-水梯度洗脱。6.根据权利要求2所述的雪莲种子中的倍半萜内酯类化合物的制备方法，其特征在于步骤c中高效液相色谱进行分离，洗脱剂为体积浓度10-90％的甲醇-水溶液或体积浓度10-60％的乙腈-水溶液，采用梯度洗脱。2CN107118188A说明书1/6页天山雪莲种子中的倍半萜内酯类化合物及其制备方法技术领域[0001]本发明为植物化学领域，具体为中药有效成分的提取、分离与制备工艺领域，尤其涉及从雪莲种子中提取、分离具有药理活性的一个新的倍半萜内酯类化合物。背景技术[0002]天山雪莲(Saussureainvolucrata)系菊科(Asteraceae)风毛菊属(Saussurea)植物，是新疆的著名特产，又称新疆雪莲，全草入药。雪莲分布于我国新疆天山和昆仑山一带，生长在雪线以上。其国外分布很少，资料表明，仅在俄罗斯、哈萨克斯坦和蒙古有分布。天山雪莲又名雪莲花，学荷花，是维吾尔族医常用药材(名为“塔格依力斯”)。天山雪莲在医药应用上已有数百年的历史，中国传统中医理论认为雪莲性温，味微苦，入肝、脾、肾三经，具有散寒除湿、活血通经、强筋助阳、抗炎、镇痛、收缩子宫等功能。民间用于治疗风湿性关节炎、肩周炎等疾病、妇女小腹冷痛、闭经、胎衣不下、麻疹不透、肺寒咳嗽、阳萎等症，在治疗跌打损伤、雪盲和牙痛方面也有使用。现代药理学证明雪莲具有抗肿瘤、清除自由基、抗感染和免疫调节等作用。从已有文献来看，新疆雪莲中化学成分种类比较丰富(黄酮、萜类、香豆素和植物甾醇等)并且具有很好的药理活性(抗炎镇痛、抗癌、解痉降压、终止妊娠和抗染色体损伤等)。天山雪莲(Saussureainvolucrata)种子在零摄氏度发芽，3～5℃生长，幼苗能经受-20℃的严寒。在生长期不到两个月的环境里，高度却能超过其他植物的五到七倍。它虽然要五