与玉米雄性生育力相关的DNA分子标记及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109295246A(43)申请公布日2019.02.01(21)申请号201811109688.1C12N15/11(2006.01)(22)申请日2018.09.21C12N15/29(2006.01)(66)本国优先权数据201710919712.72017.09.30CN(71)申请人海南波莲水稻基因科技有限公司地址570125海南省海口市紫荆路2-1号紫荆信息公寓26A(72)发明人黄培劲李新鹏李京琳陈磊李燕群陈江淑陈思兰安保光龙湍吴永忠(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君黄爽(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书13页C12Q1/6895(2018.01)序列表15页附图3页(54)发明名称与玉米雄性生育力相关的DNA分子标记及其应用(57)摘要本发明提供与玉米雄性生育力相关的DNA分子标记，所述DNA分子标记位于玉米基因ZmABCG20核酸序列起始密码子后第326-329位碱基，序列为TGCA，该4个碱基缺失的玉米品系表现出隐性雄性核不育性状。可将本发明的DNA分子标记用于鉴定或选育雄性不育玉米种质资源，还可用于玉米基因ZmABCG20分型以及玉米分子标记辅助育种。CN109295246ACN109295246A权利要求书1/1页1.与玉米雄性生育力相关的DNA分子标记，其特征在于，所述DNA分子标记位于玉米基因ZmABCG20核酸序列起始密码子后第326-329位碱基，序列为TGCA，该4个碱基缺失的玉米品系表现出隐性雄性核不育性状；其中，基因ZmABCG20的cDNA序列为：i)SEQIDNO:2所示的核苷酸序列；ii)SEQIDNO:2所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；iii)在严格条件下与SEQIDNO:2所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或iv)与i)、ii)或iii)的核苷酸序列具有85％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。2.用于扩增权利要求1所述DNA分子标记的引物，其特征在于，包括：上游引物3326_F1：5′-CCAGACGAGGGCAGACCAG-3′和下游引物3326_R1：5′-GATCTCGCCAGGGTCCACA-3′。3.含有权利要求2所述引物的检测试剂或试剂盒。4.权利要求1所述DNA分子标记、权利要求2所述引物、或权利要求3所述检测试剂或试剂盒在玉米分子标记辅助育种中的应用。5.权利要求1所述DNA分子标记、权利要求2所述引物、或权利要求3所述检测试剂或试剂盒在鉴定或选育雄性不育玉米种质资源中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，提取待测玉米的基因组DNA，利用引物3326_F1和3326_R1进行PCR扩增反应，电泳检测扩增产物，若扩增产物出现一条大小为79bp的特征条带，则待测玉米的育性正常，对应的ZmABCG20基因型为野生型；若扩增产物出现一条大小为75bp的特征条带，则待测玉米为雄性不育品种，对应的ZmABCG20基因型为突变体；若扩增产物为79bp和75bp两条带型，则待测玉米为杂合基因型。7.权利要求1所述DNA分子标记、权利要求2所述引物、或权利要求3所述检测试剂或试剂盒在玉米基因ZmABCG20分型中的应用。2CN109295246A说明书1/13页与玉米雄性生育力相关的DNA分子标记及其应用技术领域[0001]本发明属于基因工程和分子育种领域，具体地说，涉及与玉米雄性生育力相关的DNA分子标记及其应用。背景技术[0002]植物雄性不育突变是自然界中十分普遍的现象，至少己在43个科、162个属的617个物种中发现了雄性不育突变体。在遗传上植物雄性不育分为细胞核雄性不育，细胞质雄性不育和细胞核细胞质互作雄性不育三大类：1)细胞核雄性不育由细胞核基因突变产生，有显性突变和隐性突变，有孢子体基因突变和配子体基因突变。显性突变和配子体基因突变只能通过雌配子遗传，隐性突变既可通过雌配子也可通过雄配子进行遗传，而且遵循孟德尔定律。目前已克隆了一些孢子体隐性核不育基因，如拟南芥的ms2，玉米的ms45和水稻的mil1等(Aarts等，1997，TheArabidopsisMALESTERILITY2proteinsharessimilaritywithreductasesinelongation/condensationcomplexes，PlantJournal，12:615-623；Albertsen，2006，Maletissue-preferre