用于治疗癌症的单克隆抗体及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109593132A(43)申请公布日2019.04.09(21)申请号201811614901.4(22)申请日2018.12.27(71)申请人宜春莲泽生物科技发展有限公司地址336000江西省宜春市袁州区银泰广场8栋501(72)发明人巫满香杨骏(51)Int.Cl.C07K16/18(2006.01)A61K39/395(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书1页说明书9页序列表8页附图1页(54)发明名称用于治疗癌症的单克隆抗体及其应用(57)摘要本发明公开了一系列能够与EF4具有高亲和力的单克隆抗体，同时这些抗体能够显著的抑制细胞中的EF4蛋白表达，从而达到治疗癌症的效果，有着广阔的医学应用前景。CN109593132ACN109593132A权利要求书1/1页1.一种单克隆抗体，其能够结合EF4蛋白并抑制EF4活性，并且所述抗体以≤10nM的Kd结合EF4。2.如权利要求1所述的单克隆抗体，其中所述抗体的重链可变区和轻链可变区序列分别如(A)～(F)任一所示：(A)重链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：1；轻链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：7；(B)重链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：2；轻链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：8；(C)重链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：3；轻链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：9；(D)重链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：4；轻链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：10；(E)重链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：5；轻链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：11；(F)重链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：6；轻链可变区的氨基酸序列：SEQIDNO：12。3.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是选自Fab，Fab’-SH，Fv，scFv，或(Fab’)2片段的抗体片段。4.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是人抗体、人源化的抗体或嵌合的抗体。5.抑制EF4活性的方法，所述方法包括将表达EF4的细胞暴露于权利要求1-5中任一项的抗体。6.治疗癌症的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用有效量的权利要求1-5中任一项的抗体。7.权利要求1-5中任一项的抗体用于制备治疗与EF4增加的表达或活性相关的疾病的药物中的应用。8.权利要求1-5中任一项的抗体用于制备治疗恶性肿瘤的药物中的应用。9.如权利要求9所述的应用，其特征在于：所述恶性肿瘤为神经胶质瘤。2CN109593132A说明书1/9页用于治疗癌症的单克隆抗体及其应用技术领域[0001]本发明涉及用于治疗癌症的单克隆抗体及其应用，属于医药生物技术领域。背景技术[0002]线粒体是位于细胞之内的一种细胞器，它是身体的能量加工厂，在氧的参与下，经过一系列的生化反应，线粒体把葡萄糖的分解产物丙酮酸转化为能量，这是一个有氧代谢的过程。但是，如果过多的线粒体遭到破坏(一个细胞内有数百到数千个线粒体)，身体就不能产生足够的能量来满足细胞的需求。缺乏能量细胞难以生存，为了能够生存下去，细胞必须通过其它的途径(不需要线粒体)来获得能量，这个途径就是无氧代谢(即糖发酵)。糖发酵的过程中会产生大量的乳酸，使体内环境变酸，正常细胞难以在这样的酸性环境下生存，但细胞经过癌变以后就没有问题了。所以，癌变是细胞求生存的一种方式。[0003]因此，收到来自于线粒体的痛苦信号以后，DNA中的一组基因就被激活了，包括癌基因和产生肿瘤血管的基因，DNA根据线粒体的指令，把正常细胞转变成癌细胞，这样的转变就保证了能量的供应，有了足够的能量，就保证了细胞的继续生存。经过其中的一系列复杂过程，最后癌细胞变成了永生不死的发酵体。[0004]线粒体是真核细胞物质和能量代谢的“超级工厂”，可全方位接收和处理应激信号，调整细胞内环境以应对外界环境的变化。近年来，诸多研究证实线粒体于细胞而言远远不止"细胞能量站"，其参与了各项细胞功能调控，与癌症等多种人类疾病存在着莫大的联系，但线粒体在癌细胞中的作用机制目前并未被完全阐明。线粒体在细胞的不同生命时相、生理过程和环境下，形态、数量和分布具有高度可变性，其往往集中于能量消耗更旺盛的区域，而这种动态变化与线粒体功能息息相关。研究发现，癌细胞中的线粒体大量集中于细胞边缘。由于癌症转移的一个重要途径—伪足的形成与线粒体有关。在伪足形成过程中，微管和微丝会发生动态变化，而这个过程需要消耗大量的ATP，所以，作为ATP主要供应商的线粒体自然要大量集中于此了。换句话说，通过控制和调节癌细胞中线粒体的数量和分布，就可以影响癌症的侵袭和转移。[0005]EF4蛋白是所有已知的基因组中最保守的蛋白，在原核生物中，