一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号CN109444200B(45)授权公告日2022.02.11(21)申请号201811568084.3(56)对比文件CN108(22)申请日2018.12.21872289A,2018.11.23CN105548233A,2016.05.04(65)同一申请的已公布的文献号CN102576187A,2012.07.11申请公布号CN109444200A汪灿等.基于NMR的代谢组学方法鉴别不同(43)申请公布日2019.03.08花源蜂蜜的研究.《第十七届全国波谱学学术会(73)专利权人钛和中谱检测技术（江苏）有限公议论文集》.2013,司审查员王超地址210000江苏省南京市江北新区探秘路73号树屋十六栋B1-3栋(72)发明人徐锦忠鲁惠玲孙青霞(74)专利代理机构南京常青藤知识产权代理有限公司32286代理人金迪(51)Int.Cl.G01N24/08(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图4页(54)发明名称一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法(57)摘要本发明提供一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法，属于蜂蜜检测技术领域，包括步骤：称取待鉴别的蜂蜜或糖浆样品，用磷酸盐缓冲液稀释，涡旋后静置；用盐酸或氢氧化钾溶液将稀释后的溶液滴定至pH＝2.5‑5.0；量取处理后的样品，加入含2,2,3,3‑四氘代三甲基硅烷丙烯酸和叠氮化钠的重水溶液定容，涡旋均匀后装入核磁管；采用液体核磁共振仪测定核磁管中的样品，获得核磁共振氢谱指纹图谱，在3.0±0.02ppm位移附近存在一个山形的三指峰，则证明所鉴别的蜂蜜或糖浆样品为东北椴树蜜。本发明提供的鉴别方法经济高效，样品处理方式灵活，能够直观准确地鉴定出纯正东北椴树蜜。CN109444200BCN109444200B权利要求书1/1页1.一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、称取待鉴别的蜂蜜或糖浆样品，用磷酸盐缓冲液稀释，经充分涡旋后静置处理；S2、用1mol/L的盐酸或1mol/L氢氧化钾溶液将S1中稀释后的溶液滴定至pH=2.5‑5.0；其中：1mol/L盐酸或氢氧化钾溶液由超纯水配制；S3、量取经S2处理后的样品500‑900µL，加入含0.1‑0.2%2,2,3,3‑四氘代三甲基硅烷丙烯酸和0.01‑0.02%叠氮化钠的重水溶液，定容到1mL，涡旋均匀后量取500‑600µL装入核磁管；S4、采用液体核磁共振仪测定核磁管中的样品，测定条件为：采用预饱和方法压制水峰；脉冲程序为：noesygppr1d；O1：4.7‑4.8；NS：BBI探头16或32，BBO探头32或64；DS=2或4；D1=4s；S5、获得核磁共振氢谱指纹图谱，图谱中在3.0±0.02ppm位移附近存在一个山形的三指峰，则证明所鉴别的蜂蜜或糖浆样品为东北椴树蜜，如果无此特征峰形，则认定为非东北椴树蜜、糖浆或掺假东北椴树蜜、糖浆。2.根据权利要求1所述的一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法，其特征在于，所述S1中，当待鉴别的蜂蜜或糖浆样品为结晶形态时，需在低于60℃的恒温水浴中融化冷却后称量。3.根据权利要求1所述的一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法，其特征在于，所述S1中磷酸盐缓冲液为超纯水配制的0.5mol/L的磷酸二氢钾。4.根据权利要求1所述的一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法，其特征在于，所述S4中的液体核磁共振仪的测定温度为20‑30℃。2CN109444200B说明书1/5页一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法技术领域[0001]本发明属于蜂蜜检测技术领域，具体涉及一种采用核磁共振氢谱指纹图谱鉴别东北椴树蜜的方法。背景技术[0002]椴树蜜是蜜蜂从椴树花上采集的花蜜，常温下为透明浅黄色粘稠液体，低温下易呈乳白色凝脂状结晶，色泽如油脂，味道清香，口感甘甜，是我国东北山区森林盛产的特色野生蜜种。东北椴树蜜曾在清朝时作为皇家贡蜜而闻名于世，因富含葡萄糖及果糖、多种维生素、无机盐、有机酸酶及促进人体生长和活力的生物素，比一般蜂蜜更能补血润肺，促进细胞再生，增加食欲等，也因此深受消费者的青睐。然而，在商业利益的驱使下，很多不法商贩利用各种糖、糖浆以及低廉的油菜蜜等对纯品东北椴树蜜种进行掺假，导致市场上销售的椴树蜜品牌五花八门，价格参差不齐，严重损害了蜂蜜行业的品质信誉和消费者的健康及利益。因此很有必要发明一种简单高效的检测技术实现对纯品蜜种的快速鉴定，以保证消费者买到放心正宗的高品质纯东北椴树蜜。[0003]目前国内蜂蜜检测方面的研究多集中于糖浆掺入分析，而有关蜂蜜品种鉴定的报道则相对有限，专利一种快速识别蜂蜜品种和掺