抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株及其在化妆品中的防腐应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110964668A(43)申请公布日2020.04.07(21)申请号201911366694.XC12R1/01(2006.01)(22)申请日2019.12.26(83)生物保藏信息CGMCCNo.182382019.07.17(71)申请人浙江大学地址310058浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号(72)发明人周文文俞笑梅竺莹莹汤曦(74)专利代理机构杭州求是专利事务所有限公司33200代理人郑海峰(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)A61K8/99(2017.01)权利要求书1页说明书5页A61Q19/00(2006.01)序列表1页附图3页(54)发明名称抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株及其在化妆品中的防腐应用(57)摘要本发明公开了一种抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株及其在化妆品中的防腐应用。该菌株分类命名为蜂房芽孢杆菌(Paenibacillusalvei)YM37，保藏于中国普通生物菌种保藏管理中心，保藏编号CGMCCNo.18238。本发明还提供了一种制备该芽孢杆菌培养液及其代谢物的方法。本发明所述蜂房芽孢杆菌(Paenibacillusalvei)及其次级代谢物对化妆品中大肠杆菌的生长能够起到良好抑制作用，适用于多种质地化妆、护肤品，应用前景好、开发潜力强，且具高效节能、环境友好等特点，可应用于化妆品防腐剂的制备。CN110964668ACN110964668A权利要求书1/1页1.一种抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株，其特征在于所述菌株的分类命名为蜂房芽孢杆菌(Paenibacillusalvei)YM37，保藏单位：中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏编号：CGMCCNo.18238，保藏日期为2019年7月17日。2.一种权利要求1所述抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株的发酵液制备方法，其特征在于所述方法为：将活化后的蜂房芽孢杆菌(Paenibacillusalvei)YM37按体积比2％-10％接种量接种于装有LB液体培养基的锥形瓶中，37℃、180rpm密闭培养过夜，即得到含有抗菌代谢物的芽孢杆菌发酵液。3.一种芽孢杆菌发酵提取物，其特征在于制备方法为：将权利要求2所述含有抗菌代谢物的芽孢杆菌发酵液，用5000rpm-15000rpm条件进行离心。对离心所得上清液进行过滤得到上清液粗提物；和/或对离心所得沉淀物进行超声破碎或高温破碎，得到细胞破碎物；所述上清液粗提物或细胞破碎物即为芽孢杆菌发酵提取物。4.权利要求1所述抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株或其发酵液或其发酵提取物在制备化妆品或护肤品防腐剂中的应用。5.权利要求1所述抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株或其发酵液或其发酵提取物在化妆品或护肤品贮存抑制大肠杆菌中的应用。6.一种化妆品保藏方法，其特征在于方法如下：1)对化妆品贮藏容器进行包装密封前灭菌，放入适量化妆品；2)使用权利要求2所述方法制备的芽孢杆菌发酵液，浓缩发酵液菌浓度为106-109CFU/mL，进行细胞破碎得到细胞破碎物或上清液提纯得到上清液粗提物；3)将化妆品与步骤2)中的细胞破碎物或上清液粗提物置于同一容器中保存，细胞破碎物或上清液粗提物在化妆品容器中的体积比为不超过1％；置于25-37℃下保藏。2CN110964668A说明书1/5页抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株及其在化妆品中的防腐应用技术领域[0001]本发明属于新菌种筛选技术及微生物技术领域，特别涉及一种抗大肠杆菌蜂房芽孢杆菌菌株及其在化妆品中的防腐应用。背景技术[0002]化妆品及护肤品已经成为世界各地女性的必需品之一，然而由于化妆品本身成分、质地适宜微生物生长，因此常添加各种化学合成的防腐剂，而这些防腐剂常导致使用者产生红肿、瘙痒等过敏、异常症状。[0003]目前国内外为了抑制化妆品腐败，常添加尼泊金酯和苯氧乙醇作为防腐剂。根据《化妆品与盥洗用品》(CosmeticsandToiletries)杂志定期地发表关于化妆品防腐剂使用频率的报告，截至2014年(数据公布于2016年1月)，尼泊金酯仍然是美国化妆品市场上最常用的防腐剂，使用频率超过77％(梁辰宇.化妆品防腐剂及其发展[J].科技创新与应用,2015,22:10-11)。在国内，四川省疾病预防控制中心的蔡伦华等人对2013－2015年在该中心检测的1134份化妆品中防腐剂使用情况、使用种类和使用频率进行研究。结果显示所有化妆品中，使用防腐剂26种(类)，其中使用频率最高的就是苯氧乙醇(蔡伦华,康晓熙,万莉,蔡梅.1134份化妆品中防腐剂使用现状[J].预防医学情报杂志,2016,32(11):1198-1200)。该报告同时显示，苯氧乙醇与尼泊金酯两类防腐剂使用频率之和占总数六成以上。上