一种淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113604582A(43)申请公布日2021.11.05(21)申请号202110903662.X(22)申请日2021.08.06(71)申请人上海市农业科学院地址201100上海市闵行区北翟路2901号(72)发明人张浩黄兰兰蒋钦友季香云(74)专利代理机构长沙永星专利商标事务所(普通合伙)43001代理人周咏林毓俊(51)Int.Cl.C12Q1/6888(2018.01)C12Q1/686(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书3页序列表1页附图1页(54)发明名称一种淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列及其应用(57)摘要本发明公开了一种淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列及其应用，其序列为淡足侧沟茧蜂的COI基因，具体如序列1所示。本发明利用DNA条形码技术，针对淡足侧沟茧蜂，建立一种相对稳定和准确的分子鉴定方法，可以对残缺样品进行鉴定，对淡足侧沟茧蜂与其近缘种能够很好的区分鉴定，对淡足侧沟茧蜂能够进行准确的鉴定；对提高淡足侧沟茧蜂分类鉴定的准确性、提高利用淡足侧沟茧蜂作为生物防治因子的使用具有重要的促进作用。本发明利用DNA条形码技术，可以对淡足侧沟茧蜂能够进行快速准确的鉴定。CN113604582ACN113604582A权利要求书1/1页1.一种淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列，其特征在于，其序列为淡足侧沟茧蜂的COI基因，其序列如序列1所示，具体如下：TCAGGGATATTAGGATTTCAATAAGTTTAATTATTCGTTTAGAATTAGGAAGTAACAGGAAATTTAATTGGTAATGATCAAATTTAAATAGAATTGTTACTTCTCATGCTTTTATTATGATTTTTTTATAGTTATACACCTATTATAATTGGTGGATTTGGAAATGGATTAGTTCCATTAATATTGAGTTCACCGATATGGCTTTTCTCGAATAAATAATAAGAATTTTGATTATTAATTCCTTCATTATTTTATTAGTTTTTAGAGATTTGTTAATGTTGGTGTTGGGACAGATGAACTGTGTATCCACCTCTTATCATTAATTTAGGTCATGGAGGTTTATCAGTTGATATAAGAATTTTTGCTTTACATTTAGCTGGTGCATCTTCAATTATGGGGGCTGTTAATTTTATTACAACGGTTTATAATATAACGAATAAATTTTTTTAATTATAGATAAAATTTCATTATTACGTTTGATCTGTATTAATTAACGCTATT。2.根据权利要求1所述的淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列在鉴定淡足侧沟茧蜂中的应用。3.根据权利要求1所述的淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列鉴定淡足侧沟茧蜂的方法，包括以下步骤：1)将待测的淡足侧沟茧蜂样本中提取DNA；2)将步骤1)中提取的DNA进行纯化后，通过正向引物和反向引物，进行PCR扩增，扩增后的产物进行电泳检测，对扩增产物进行测序，测出的序列与淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列的同源性在98％以上，则可判定该检测样本属于淡足侧沟茧蜂。4.根据权利要求3所述的淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列鉴定淡足侧沟茧蜂的方法，其特征在于，所述步骤2)中，正向引物的序列如序列2所示，具体为：5’‑GATCAGGGATATTAGGATT‑3’；反向引物的序列如序列3所示，具体为：5’‑AGCTAATACTGGTAATG‑3’。2CN113604582A说明书1/3页一种淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列及其应用技术领域[0001]本发明属于生物科技和物种鉴定技术领域，具体涉及一种淡足侧沟茧蜂DNA条形码序列及其应用。背景技术[0002]淡足侧沟茧蜂(Microplitispallidipes)，是膜翅目Hymenoptera、茧蜂科Braconidae的一种单寄生蜂，其主要寄生夜蛾科害虫2‑3龄的幼虫，田间寄生率为6％～50％，是重要的生物害虫防治资源，能有效的控制蔬菜上夜蛾科害虫灾害的发生。然而由于部分茧蜂科寄生蜂形态差异不大，尤其是侧沟茧蜂属Microplitis的几种寄生蜂，例如斯氏侧沟茧蜂Microplitissimilis、双斑侧沟茧蜂Microplitisbicoloratus、中红侧沟茧蜂Microplitismediator等物种的形态差异很小，因此通过传统的形态学方法鉴定侧沟茧蜂种类往往很困难。而目前缺少通过分子手段鉴定淡足侧沟茧蜂的相关技术。[0003]COI基因为线粒体DNA(mtDNA)上的细胞色素C氧化酶第I亚基，动物生命中绝大部分阶段都存在明显的COI基因序列；大多数细胞中都有几百个以