一种牛用精液低温保存稀释液的制备和使用方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115119830A(43)申请公布日2022.09.30(21)申请号202210922046.3(22)申请日2022.08.02(71)申请人塔里木大学地址843300新疆维吾尔自治区阿拉尔市塔里木大学(72)发明人高庆华王杰方翟崔宝山牛鹏王洁茹(74)专利代理机构北京翔石知识产权代理事务所(普通合伙)11816专利代理师范金娇(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权利要求书4页说明书10页附图3页(54)发明名称一种牛用精液低温保存稀释液的制备和使用方法(57)摘要本发明涉及动物繁殖技术领域，尤其涉及一种牛用精液低温保存稀释液的制备和使用方法，主要成分为先将双蒸水、蜂蜜、低密度脂蛋白、恩诺沙星调配为第一混合溶液，之后将TE液、HePeS液、三羟甲基氨基甲烷、BSA，调配为第二混合溶液；之后将阿拉伯糖、鞣酸、左旋肉碱、甾醇、松弛素、鼠李糖加入第一混合溶液调配为第三混合溶液；最后将第二混合溶液和亮肽素、肌肽分别倒入第三混合溶液内，轻微混匀后用无菌滤器过滤制成第四混合溶液，本发明方法配置的稀释液用于低温保存牛用精液的过程中，在保证精液成活率和保存时长的前提下，提高了DNA完整度和顶体完度，从而提高了人工受精的受胎质量。CN115119830ACN115119830A权利要求书1/4页1.一种牛用精液低温保存稀释液的制备方法，其特征在于，包括：步骤S1、预设组份A的重量份数为Ai，分别配置重量份数为A1的双蒸水、重量份数为A2的蜂蜜、重量份数为A3低密度脂蛋白、重量份数为A4恩诺沙星加入容器，通过搅拌装置调配制得第一混合溶液；步骤S2、预设组份B的重量份数为Bi，分别配置重量份数为B1的TE液、重量份数为B2的HePeS液、重量份数为B3的三羟甲基氨基甲烷、重量份数为B4的BSA加入容器，通过搅拌装置调配制得第二混合溶液；步骤S3、预设组份C的重量份数为Cj，分别配置重量份为C1的数阿拉伯糖、重量份为C2的鞣酸、重量份为C3的左旋肉碱、重量份为C4的甾醇、重量份为C5的松弛素、重量份为C6的鼠李糖加入第一混合溶液的容器内，通过搅拌装置调配制得第三混合溶液；步骤S4、预设组份D的重量份数为Dm，分别配置重量份数为D1的亮肽素、重量份数为D2的肌肽以及配制好的第二溶液分别倒入第三混合溶液的容器内，轻微混匀后用无菌滤器过滤制成第四混合溶液；步骤S5、制成稀释液后放入低温环境备用。2.根据权利要求1所述的牛用精液低温保存稀释液的制备方法，其特征在于，在所述步骤S1中，所述第一混合溶液中各组份重量份数为双蒸水60‑100mL、蜂蜜2‑8g、低密度脂蛋白5‑10g、恩诺沙星20‑200mg；所述步骤S2中，所述第二混合溶液中各组份重量份数为TE液5‑20mL、HePeS液5‑25mL、三羟甲基氨基甲烷1‑4g、BSA100‑500mg；所述步骤S3中，所述第三混合溶液中各组份重量份数为阿拉伯糖0.5‑5g、鞣酸0.3‑1g、左旋肉碱200‑500mg、甾醇200‑600mg、松弛素50‑200mg、鼠李糖2‑5g；所述步骤S4中，所述第四混合溶液中各组份重量份数为亮肽素50‑150mg、肌肽50‑150mg。3.根据权利要求2所述的牛用精液低温保存稀释液的制备方法，其特征在于，在所述步骤S1中，当调配所述第一混合溶液时，设置预设双蒸水的温度F0实时获取双蒸水的实际温度F，若F＜F0时，对双蒸水的温度进行升温处理，若F≥F0时，对双蒸水进行恒温处理，并分别按预设重量份数加入蜂蜜、低密度脂蛋白、恩诺沙星，当进行所述第一混合溶液的组份物质调配时，设定第一混合溶液的拌时长为Ta，在设定的搅拌时长Ta完成后，记录实际搅拌漩涡底角至容器内壁底端的第一距离Qa，将第一距离与预设距离对比，判断是否进行二次搅拌，设置第一预设距离Q1和第二预设距离Q2，第一混合溶液的第一预设二次搅拌时长Ta1和第一混合溶液的第二预二次搅拌时长Ta2，Q1＞Q2，Ta1＞Ta2，若Qa≤Q2，不进行二次搅拌；若Q1＞Qa＞Q2，采用第一混合溶液的第一预设二次搅拌时长Ta1作为二次搅拌时长；若Q1≤Qa，采用第一混合溶液的第二预二次搅拌时长Ta2作为二次搅拌时长；在二次搅完成时，若Qa≤Q2，判断为第一混合溶液各组份重量份数配置不需要调整；若Q1＞Qa＞Q2，判断第一混合溶液各组份重量份数配置是否需要调整；若Qa＜Q1，将调节后的第一混合溶液的拌时长设置为Ta+Tai，其中i＝1，2。4.根据权利要求3所述的牛用精液低温保存稀释液的制备方法，其特征在于，当判断第2CN115119830A权利要求书2/4页一混合溶液各组份重量份数配置是否需要调整时，获取实际调配第一混合溶液的重量份数Ai、获取当前搅