一种金线莲类原球茎的组织培养快速繁殖方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号(10)授权公告号CNCN103283603103283603B(45)授权公告日2014.11.05(21)申请号201310223230.X段。.N.V.KET,ETAL..Micropropagation(22)申请日2013.06.06ofanendangeredorchidAnoectochilus(73)专利权人广西壮族自治区药用植物园formosanus.《BiologiaPlantarum》.2004,第48地址530023广西壮族自治区南宁市长堽路卷(第3期),第339-344页，全文。.189号杨柏云等.金线莲原球茎的诱导与快速繁(72)发明人韦坤华缪剑华李林轩李翠殖.《安徽农业科学》.2008,第36卷(第10期),韦莹第3999-4001页，尤其是第1.2节至第(74)专利代理机构广西南宁公平专利事务所有4000页第2.4节以及图1-3，表1、表3。.限责任公司45104审查员王涛代理人黄永校(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)(56)对比文件CN102907327A,2013.02.06,全文.KR10-2013-0052194A,2013.05.22,全文.CN1843095A,2006.10.11,全文.王建勤等.金线莲原球茎的诱导与植株再生.《植物学通报》.1996,第13卷(第1期),第54-55页，尤其是第2段至第3权利要求书1页权利要求书1页说明书3页说明书3页(54)发明名称一种金线莲类原球茎的组织培养快速繁殖方法(57)摘要一种金线莲类原球茎的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：（1）取金线莲无菌试管苗切成带顶芽或腋芽的小茎段，接种到MS繁殖培养基进行繁殖培养获得类原球茎；（2）将获得的类原球茎置于MS复壮培养基中进行复壮培养得到健壮丛生芽。采用本发明得到的金线莲类原球茎繁殖系数高，复壮时间短，复壮的丛生芽健壮，可在短期内提供成活率高的金线莲优质种苗，有效解决了金线莲的规模化育苗问题。CN103283603BCN103286BCN103283603B权利要求书1/1页1.一种金线莲类原球茎的组织培养快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)类原球茎的快速繁殖培养：取金线莲无菌试管苗，切成带顶芽或腋芽的小茎段，接种到MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天得到类原球茎，其中MS繁殖培养基的组成为：MS基本培养基、2.0-3.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0-0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.05-0.5mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；(2)类原球茎的复壮培养：将步骤(1)中得到的类原球茎置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天得到健壮丛生芽，其中MS壮苗培养基的组成为：MS基本培养基、1.0-1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.3-0.6mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。2CN103283603B说明书1/3页一种金线莲类原球茎的组织培养快速繁殖方法技术领域[0001]本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种金线莲类原球茎的组织培养快速繁殖方法。背景技术[0002]金线莲，又称金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。主要分布在我国的福建、台湾、广西、广东等地。具有清热凉血，除湿解毒，平衡阴阳、扶正固本，阴阳互补、生津养颜、调和气血、五脏、养寿延年等功用。主要用于治疗肺热咳嗽，肺结核咯血，尿血，小儿惊风，破伤风，肾炎水肿，风湿痹痛，跌打损伤，毒蛇咬伤、支气管炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、急慢性肝炎、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症，目前主要作为煲汤、茶饮等保健食品材料使用。[0003]由于金线莲疗效确切，利用价值高，经济效益好，所以近年来金线莲的野生资源被疯狂采挖，到目前为止，野生金线莲资源已经基本绝迹。但在自然条件下，金线莲的资源更新非常缓慢，无法满足市场的需要。而且金线莲种子不具胚乳，无发芽能力，只有在真菌共生下，才促进种子萌发生长，但发芽率非常低。虽然还可以通过分根法式扦插方式繁殖，则所需时间很长，而且繁殖倍率也不高，生产上难以实现大面积栽培。采用生物技术组织培养技术，可以有效快速地提高金线莲种苗的繁殖速度和质量，实现金线莲优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种金线莲类原球茎的组织培养快速繁殖方法