用于治疗骨骼肌病的组合物和方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103764173103764173A(43)申请公布日2014.04.30(21)申请号201280042810.2A61K38/17(2006.01)(22)申请日2012.07.02(30)优先权数据61/504,0482011.07.01US(85)PCT国际申请进入国家阶段日2014.03.03(86)PCT国际申请的申请数据PCT/US2012/0452742012.07.02(87)PCT国际申请的公布数据WO2013/006558EN2013.01.10(71)申请人得克萨斯系统大学董事会地址美国得克萨斯州(72)发明人E.N.奥尔森(74)专利代理机构北京市柳沈律师事务所11105代理人史悦(51)Int.Cl.权利要求书2页权利要求书2页说明书29页说明书29页A61K48/00(2006.01)序列表5页序列表5页附图20页附图20页(54)发明名称用于治疗骨骼肌病的组合物和方法(57)摘要本发明提供一种预防或治疗肌病如骨骼肌病的方法，包括施用miRNA的调控物。在一个实施方案中，所述骨骼肌病是中央核性肌病。所述调控物可以是促进miR-133家族成员的表达、功能或活性的激动剂。所述miR-133家族成员可以是miR-133a或miR-133b。CN103764173ACN103764ACN103764173A权利要求书1/2页1.一种治疗或预防有此需要的受试者中的中央核性肌病的方法，包括对所述受试者施用miR-133家族成员的激动剂。2.一种在有此需要的受试者中维持骨骼肌结构或功能的方法，包括对所述受试者施用miR-133家族成员的激动剂。3.一种在有此需要的受试者中抑制快到慢的肌纤维转化的方法，包括对所述受试者施用miR-133家族成员的激动剂。4.一种在有此需要的受试者中预防或治疗线粒体功能障碍的方法，包括对所述受试者施用miR-133家族成员的激动剂。5.权利要求1-4任一项的方法，其中所述miR-133家族成员是miR-133a。6.权利要求1-4任一项的方法，其中所述miR-133家族成员是miR-133b。7.权利要求5的方法，其中所述激动剂是包含miR-133a序列的多核苷酸。8.权利要求7的方法，其中所述多核苷酸包含pri-miR-133a、pre-miR-133a、或成熟miR-133a序列。9.权利要求8的方法，其中所述多核苷酸包含5’-UUUGGUCCCCUUCAACCAGCUG-3’的序列(SEQIDNO:2)。10.权利要求6的方法，其中所述激动剂是包含miR-133b序列的多核苷酸。11.权利要求10的方法，其中所述多核苷酸包含pri-miR-133b、pre-miR-133b、或成熟miR-133b序列。12.权利要求11的方法，其中所述多核苷酸包含5’-UUUGGUCCCCUUCAACCAGCUA-3’的序列(SEQIDNO:4)。13.权利要求7-12任一项的方法，其中所述多核苷酸配制在脂质递送媒介物中。14.权利要求7-13任一项的方法，其中所述多核苷酸由表达载体编码。15.权利要求7-14任一项的方法，其中所述多核苷酸在骨骼肌启动子的调控下。16.权利要求15的方法，其中所述骨骼肌启动子是肌肉肌酸激酶启动子。17.权利要求7-16任一项的方法，其中所述多核苷酸为双链。18.权利要求7-16任一项的方法，其中所述多核苷酸缀合于胆固醇。19.权利要求7-18任一项的方法，其中所述多核苷酸长度为约70至约100个核苷酸。20.权利要求7-18任一项的方法，其中所述多核苷酸长度为约18至约25个核苷酸。21.权利要求7-20任一项的方法，其中通过皮下、静脉内、肌内或腹膜内施用路径对所述受试者施用所述激动剂。22.权利要求1-21任一项的方法，其中所述受试者是人。23.权利要求1-22任一项的方法，其中所述受试者在肌微管素(MTM1)基因中具有突变。24.权利要求1-23任一项的方法，其中所述受试者在发动蛋白2(DNM2)基因中具有突变。25.权利要求1-24任一项的方法，其中所述受试者在双载蛋白2(BIN1)基因中具有突变。26.一种用于鉴定骨骼肌中miR-133家族成员的调控物的方法，包括：(a)使骨骼肌细胞与候选化合物接触；2CN103764173A权利要求书2/2页(b)评估miR-133家族成员的活性或表达；并(c)将步骤(b)中的活性或表达与在缺少所述候选化合物情况下的活性或表达比较，其中测量的活性或表达之间的差异指示所述候选化合物是所述miR-133家族成员的调控物。27.权利要求26的方法，其中所述miR-133家族成员是miR-133a。28.权利要求26的方法