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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105534963A(43)申请公布日2016.05.04(21)申请号201610024291.7(22)申请日2016.01.14(71)申请人中南民族大学地址430074湖北省武汉市洪山区民族大道182号(72)发明人李玉桑顾洪伟唐和斌张炜陈夕桢(74)专利代理机构武汉宇晨专利事务所42001代理人余晓雪王敏锋(51)Int.Cl.A61K31/131(2006.01)A61K9/08(2006.01)A61K47/44(2006.01)G09B23/28(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图3页(54)发明名称肝脏诱癌剂及其制备方法(57)摘要本发明属于生物技术领域,涉及一种肝脏诱癌剂、肝脏诱癌剂的制备方法以及基于肝脏诱癌剂建立原发性肝癌模型的方法。其中,肝脏诱癌剂是DEN非水溶液,例如是DEN油溶液或者DEN麻油溶液。本发明通过将DEN溶于麻油经口给药增加了小鼠服药的顺应性,克服了DEN水溶造模小鼠之间的个体差异;在二十周时,DEN水溶组及经口高剂量组小鼠肉眼均可见肿瘤结节,但1次/周经口给药组小鼠死亡率最低,即长期低频给药能大大降低造模过程中的死亡率。本发明提供了一种稳定性强、耗时短以及致死率低的肝脏诱癌剂、肝脏诱癌剂的制备方法以及基于肝脏诱癌剂建立原发性肝癌模型的方法。CN105534963ACN105534963A权利要求书1/1页1.一种肝脏诱癌剂,其特征在于:所述肝脏诱癌剂是DEN非水溶液。2.根据权利要求1所述的肝脏诱癌剂,其特征在于:所述肝脏诱癌剂是DEN油溶液。3.根据权利要求2所述的肝脏诱癌剂,其特征在于:所述肝脏诱癌剂是DEN麻油溶液。4.根据权利要求2或3所述的肝脏诱癌剂,其特征在于:所述肝脏诱癌剂是纳米化的DEN油溶液。5.根据权利要求4所述的肝脏诱癌剂,其特征在于:所述纳米化的DEN油溶液中的DEN的含量不低于20.625mg·ml-1。6.根据权利要求5所述的肝脏诱癌剂,其特征在于:所述纳米化的DEN油溶液中的DEN的含量是20.625mg·ml-1-41.25mg/ml-1。7.一种用于制备如权利要求6所述的肝脏诱癌剂的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:1)将DEN以及蛋黄卵磷脂溶于麻油中,制备得到油相;所述DEN的终浓度是10.97%V/V-21.94%V/V;所述蛋黄卵磷脂的终浓度是6%W/V;2)将Tween80以及甘油溶于超纯水中,制备得到水相;所述Tween80的终浓度是1.25%V/V;所述甘油的终浓度是2.81%V/V;3)在60oC恒温水浴的条件下,将步骤1)制备得到的油相滴入步骤2)制备得到的水相中,在1200r/min的条件下搅拌15min;所述油相与水相的体积比是1:4;4)在10000rpm的条件下高剪切2min,最终得到粒径是100nm-200nm的乳化颗粒;5)在1000bar的条件下高压均质5次即得到纳米化的DEN油溶液。8.一种基于如权利要求3或4所述的肝脏诱癌剂的建立原发性肝癌模型的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:1)选用6-8周龄SPF级雄性昆明KM小鼠,体重18-22g,饲养适应环境1周;2)每周按雄性昆明KM小鼠的体重经口给予权利要求3或4所述的肝脏诱癌剂,连续造模20周,建立小鼠原发性肝癌模型;3)模型鉴定。9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:当步骤2)中采用权利要求3所述的肝脏诱癌剂时,所述步骤2)中按雄性昆明KM小鼠的体重经口给予权利要求3所述的肝脏诱癌剂的给药剂量是16.5mg/kg;给药频率是每周1次、3次或7次。10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:当步骤2)中采用权利要求4所述的肝脏诱癌剂时,所述步骤2)中按雄性昆明KM小鼠的体重经口给予权利要求4所述的肝脏诱癌剂的给药剂量是8.25mg/kg;给药频率是每周1次。2CN105534963A说明书1/8页肝脏诱癌剂及其制备方法技术领域[0001]本发明属于生物技术领域,涉及一种肝脏诱癌剂、肝脏诱癌剂的制备方法以及基于肝脏诱癌剂建立原发性肝癌模型的方法。背景技术[0002]原发性肝癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,在我国其发病率和死亡率均为世界首位,是严重危害健康的重大疾病(ThemanagementofhepatocellularcarcinomainAsia:Aguidelinecombiningquantitativeandqualitativeevaluation.BiosciTrends,2010,6:283-287)。遗憾的是其发生机制尚未完全阐明。因此,深入研究肝癌的发病机制,寻找防治肝癌的有效手段,可更好地服务于人类健康(Adecade’sstudiesonme