HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105866279A(43)申请公布日2016.08.17(21)申请号201610248797.6(22)申请日2016.04.20(71)申请人广西壮族自治区梧州食品药品检验所地址543000广西壮族自治区梧州市西环路中段198号(72)发明人陈学松林冬杰李亚梁慧敏李澄(74)专利代理机构广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙)44295代理人黄为蔡国(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法(57)摘要本发明提供了一种HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法，旨在提供一种操作简便，结果准确可靠，可作为清喉利咽颗粒的质量控制方法；该方法包括下述步骤：制备供试品溶液；制备阴性对照溶液；制备对照品；专属性试验，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各2μl注入液相色谱仪检测，所述的色谱条件如下：色谱柱：PhenomenexC18；流动相：甲醇－0.5％磷酸；流速0.8mL/min；波长：280nm；柱温：30℃；进样量2μl；属于化学检测技术领域。CN105866279ACN105866279A权利要求书1/1页1.一种HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：1)制备供试品溶液取本品粉末2g，加热水20ml溶解，离心，取上清液；通过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用水洗，弃去水洗液，再用70％乙醇5ml洗脱，收集洗脱液，蒸干用10ml甲醇溶解，用0.22μm微孔滤膜用0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品；2)制备阴性对照溶液取按处方制法制得同时缺枳壳清喉利咽颗粒阴性对照1g，研细，加甲醇5mL，超声30min，用0.22μm微孔滤膜用0.22μm微孔滤膜滤过，补足5ml，取续滤液作为阴性对照溶液；3)制备对照品取柚皮苷对照品5g，超声30min溶解，用0.22μm微孔滤膜滤过，补足10ml制得作为对照品储备液；吸取对照品储备液10ml置20ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液；4)专属性试验分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各2μl注入液相色谱仪，检测。所述的色谱条件如下：色谱柱：PhenomenexC18，100mm×4.6mm，2.6μm；流动相：甲醇－0.5％磷酸；流速0.8mL/min；波长：280nm；柱温：30℃；进样量2μl。2.根据权利要求1所述的HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法，其特征在于，所述的甲醇－0.5％磷酸体积比为40：60。2CN105866279A说明书1/3页HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法技术领域[0001]本发明提供一种柚皮苷的鉴别方法，具体地说，是一种HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法；属于化学检测技术领域。背景技术[0002]清喉利咽颗粒是由黄芩、西青果、桔梗、竹茹、枳壳、胖大海、橘红等13种中药组成。功效清热利咽，宽胸润喉。用于外感风热所致的咽喉发干、声音嘶哑；急慢性咽炎、扁桃体炎见上述证候者，常用有保护声带作用。其质量标准收载于：《中国药典》2005年版一部，只有黄芩苷的含量测定指标，不利于控制该药品的质量。发明内容[0003]针对上述不足，本发明的目的是提供一种操作方便，设备简单，检测结果重现好的清喉利咽颗粒中柚皮苷的鉴别方法。[0004]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：[0005]一种HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法，依次包括下述步骤：[0006]1)制备供试品溶液[0007]取本品粉末2g，加热水20ml溶解，离心，取上清液；通过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用水洗，弃去水洗液，再用70％乙醇5ml洗脱，收集洗脱液，蒸干用10ml甲醇溶解，用0.22μm微孔滤膜用0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品；[0008]2)制备阴性对照溶液[0009]取按处方制法制得同时缺枳壳清喉利咽颗粒阴性对照1g，研细，加甲醇5mL，超声30min，用0.22μm微孔滤膜用0.22μm微孔滤膜滤过，补足5ml，取续滤液作为阴性对照溶液；[0010]3)制备对照品[0011]取柚皮苷对照品5g，超声30min溶解，用0.22μm微孔滤膜滤过，补足10ml制得作为对照品储备液；吸取对照品储备液10ml置20ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液；[0012]4)专属性试验[0013]分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各2μl注入液相色谱仪，检测。[0014]所述的色谱条件如下：[0015]色谱柱：PhenomenexC18，100mm×4.6mm，2.6μ