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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108822174A(43)申请公布日2018.11.16(21)申请号201810995034.7(22)申请日2018.08.29(71)申请人上海兆维科技发展有限公司地址200233上海市徐汇区上海市桂平路333号6号楼709室申请人上海兆维生物工程有限公司(72)发明人孙波李喜群郑伟建陈虹宇(74)专利代理机构上海专利商标事务所有限公司31100代理人陈静(51)Int.Cl.C07H19/167(2006.01)C07H1/00(2006.01)权利要求书2页说明书7页(54)发明名称新型核苷修饰物2’-EOE-鸟嘌呤核苷及其制备方法(57)摘要本发明涉及一种新型核苷修饰物2’-EOE-鸟嘌呤核苷的制备方法。本发明的方法以2,6-二氨基-嘌呤核苷为起始原料,先与金属氢化物反应,生成醇钠型活性中间体,接着与2-卤代乙基乙基醚反应,生成目标基团修饰的2,6-二氨基-嘌呤核苷中间体,然后通过生化反应,利用生物酶将化合物B特定位点的氨基转化为羰基,从而高收率,高选择性地生成目标产物2’-EOE-鸟嘌呤核苷。本发明的方法可以简便、经济地大量合成2’-EOE-鸟嘌呤核苷。CN108822174ACN108822174A权利要求书1/2页1.一种式A所示化合物的制备方法,其特征在于,所述的方法包括:(1)以化合物C为起始原料,先与金属氢化物反应,生成醇钠型活性中间体;接着与2-卤代乙基乙基醚反应,获得2,6-二氨基-嘌呤核苷中间体B;(2)脱氨酶催化2,6-二氨基-嘌呤核苷中间体C,将其特定位点的氨基转化为羰基,从而获得化合物A。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,(1)中,所述的金属氢化物为NaH,KH、CaH2;较佳地为NaH。3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,(1)中,所述2-卤代乙二醇单乙醚选自:2-氯代乙基乙基醚,2-溴代乙基乙基醚,2-碘代乙基乙基醚;优选地,所述2-卤代乙二醇单乙醚为2-溴代乙基乙基醚。4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,(1)中,醇钠型活性中间体与2-卤代乙基乙基醚反应后,还包括:对含有2,6-二氨基-嘌呤核苷中间体B的粗品进行结晶纯化;优选地,以甲醇或乙醇作为结晶的溶剂;更优选地,以乙醇作为结晶的溶剂;进一步优选地,乙醇的用量与化合物C重量体积比为1∶10-30。5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,(1)中,以N,N-二甲基甲酰胺、DMSO或乙二醇二甲醚作为化合物C的溶剂,优选地以N,N-二甲基甲酰胺作为化合物C的溶剂;溶解后,降温至0±2℃,在惰性气体氛围下与金属氢化物反应;较佳地,按照重量体积比,溶剂的用量为2CN108822174A权利要求书2/2页化合物C的3~10倍。6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,(1)中,金所述化合物C和金属氢化物的摩尔比为1∶1.0-3.0;和/或2-卤代乙基乙基醚用量为化合物C的0.8~1.8摩尔当量,优选地为1~1.5摩尔当量。7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,(2)中,所述脱氨酶为腺苷脱氨酶;优选地,脱氨酶与化合物B按照重量比为1∶1000-3000;优选地,酶催化反应的温度为18~45℃;或(2)中,在中性条件下,较佳地pH=7-8条件下进行反应。8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,(2)中,生成式A所示的化合物后,还包括:将包含式A所示的化合物的产物进行重结晶纯化,获得高纯度的式A所示的化合物;优选地,以水为重结晶溶剂;更优选地,化合物B与水按照重量体积比为1∶20-40。9.一种化合物,其结构式如式A所示:10.如权利要求9所述的化合物,其特征在于,其由权利要求1~9任一所述方法制备获得。11.权利要求9~10所述的化合物的用途,用于合成反义寡核苷酸。3CN108822174A说明书1/7页新型核苷修饰物2’-EOE-鸟嘌呤核苷及其制备方法技术领域[0001]本发明属于核苷化合物合成领域,更具体地,本发明涉及一种新型核苷修饰物2’-EOE-鸟嘌呤核苷的制备方法。背景技术[0002]近年,随着基因组创药的发展,反义寡核苷酸药物被急速开发,究其原因在于其较传统药物来讲具有以下几点优势:1)特异性较强。一个15聚体的反义寡核苷酸含有30-45氢键,而低分子的传统药物(200-600u)与靶点一般只形成1-4个键;2)信息量较大。遗传信息从DNA-RNA-蛋白质,用互补寡核苷酸阻断某种蛋白的合成是很准确的;3)反义药物以核酸为靶点,与蛋白质作为靶点比较,更易合理设计新药物。由于作用于遗传信息传递的上游,所需药量较低,副作用可能较少。[0003]随着技术研究的推进,对反义药物的研究正兴盛起来。国内已有数家科研单位正在开展反义药物的研究,并已有若干反义寡