一种双酶分步酶解制备人参多肽的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109517870A(43)申请公布日2019.03.26(21)申请号201910065930.8(22)申请日2019.01.24(71)申请人吉林大学地址130012吉林省长春市前进大街2699号(72)发明人胡良海程显惠李潇影张贵元杨晓敏(74)专利代理机构长春吉大专利代理有限责任公司22201代理人王恩远(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种双酶分步酶解制备人参多肽的方法(57)摘要本发明的一种双酶分步酶解制备人参多肽的方法，属于酶解植物蛋白制备多肽的技术领域。是以人参粉末为原料，经过制备人参蛋白粗提液、制备人参总蛋白、双酶酶解的过程制取人参多肽；所述的双酶酶解，选择酶活力为20U/mg的风味蛋白酶酶和酶活力为200U/mg的碱性蛋白酶按等量混合酶解4～6h，或按等量分先后用碱性蛋白酶酶解4～6h、风味蛋白酶酶解20h。本发明方法合理，工艺简单，易于操作，不必反复调节pH和温度，酶解效果明显，多肽纯度高，收率高损失少；所提取的人参多肽安全性好，在食品、药品、保健品、化妆品等领域具有良好的应用前景。CN109517870ACN109517870A权利要求书1/1页1.一种双酶分步酶解制备人参多肽的方法，首先以人参粉末为原料制备人参蛋白粗提液，其特征在于，再按制备人参总蛋白、双酶酶解的过程制取人参多肽；所述的制备人参总蛋白的过程，是将人参蛋白粗提液与预冷丙酮混合，其中人参蛋白粗提液与丙酮体积比为1:5～10；-20℃静置过夜，离心弃去上清挥干剩余丙酮后，加蒸馏水复溶，得到人参总蛋白提取液；所述的双酶酶解的过程，是将人参总蛋白提取液80℃预热10min，降至酶解温度50～60℃，调pH至6.0～8.0；分别按人参粉末质量的0.1％～0.3％加风味蛋白酶和碱性蛋白酶，酶解4～26h；酶解结束后，90℃水浴中加热5～10min灭酶，冷却至室温，3000～5000r/min离心10min，上清液冷冻干燥得多肽冻干粉。2.根据权利要求1所述的双酶分步酶解制备人参多肽的方法，其特征在于，所述的制备人参蛋白粗提液，具体过程是：人参根经清洗、干燥、切块、粉碎，得到的人参粉末；将人参粉末加入到磷酸盐缓冲液中，室温条件下用超声破碎仪超声30～60min，再4℃搅拌浸提12～20h，得到的浸提液离心留上清；沉淀再加入到磷酸盐缓冲液，4℃搅拌二次浸提12～20h，得到的二次浸提液离心留上清；合并两次上清液，得到人参蛋白粗提液。3.根据权利要求1或2所述的双酶分步酶解制备人参多肽的方法，其特征在于，在制备人参蛋白粗提液的具体过程中，所述的粉碎，是将人参根切块经研磨后再用组织捣碎机粉碎；所述的人参粉末，是过80目筛的粉末。4.根据权利要求1或2所述的双酶分步酶解制备人参多肽的方法，其特征在于，在制备人参蛋白粗提液的具体过程中，浸提时，人参粉末与磷酸盐缓冲液的质量体积比为1:10～20；二次浸提时，沉淀与磷酸盐缓冲液的质量体积比为1:10～20。5.根据权利要求1所述的双酶分步酶解制备人参多肽的方法，其特征在于，在双酶酶解的过程中，所述的酶解，使用酶活力为20U/mg的风味蛋白酶酶解和酶活力为200U/mg的碱性蛋白酶酶解。6.根据权利要求1、2或5所述的双酶分步酶解制备人参多肽的方法，其特征在于，在双酶酶解的过程中，所述的酶解，使用酶活力为20U/mg的风味蛋白酶酶和酶活力为200U/mg的碱性蛋白酶按等量混合酶解4～6h，或按等量分先后用酶活力为20U/mg的风味蛋白酶酶酶解20h，用酶活力为200U/mg的碱性蛋白酶酶解4～6h。7.根据权利要求1、2或5所述的双酶分步酶解制备人参多肽的方法，其特征在于，在双酶酶解的过程中，所述的酶解，酶解温度53℃，pH7.0，先加入酶活力为200U/mg的碱性蛋白酶酶解6h，后加入酶活力为20U/mg的风味蛋白酶酶解20h。2CN109517870A说明书1/6页一种双酶分步酶解制备人参多肽的方法技术领域[0001]本发明属于双酶分步酶解植物蛋白制备多肽的技术领域，特别涉及人参多肽的制备方法。背景技术[0002]人参(PanaxginsengC.A.Mey)被誉为“百草之王”，是中国东北地区道地药材，具有滋阴补生，扶正固本的功效，是海内外认可的滋补养生佳品。有记载以来，《神农本草经》最早描述了人参的药理作用：主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，明目，开心益智。人参营养成分主要有氨基酸、蛋白质、糖类、挥发油、核苷酸、黄酮、人参皂苷、有机酸、维生素、甾醇类和无机元素。现代医学研究表明，人参皂苷作为主要活性成分，广泛参与中枢神经系统、应激与性功能以及受体和信号传导功能