一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109536544A(43)申请公布日2019.03.29(21)申请号201811557808.4(22)申请日2018.12.19(71)申请人江苏德和生物科技有限公司地址214400江苏省无锡市江阴市科技大道8号(72)发明人任雪音刘剑宏浦平南陈仕昌郁步霞秦静凤葛秋霞(74)专利代理机构北京中济纬天专利代理有限公司11429代理人张军(51)Int.Cl.C12P17/16(2006.01)C12N11/08(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法(57)摘要本发明公开了一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，利用载体对多酚氧化酶进行吸附固定，采用自上而下的进液方式，以及自下而上的进气方式，有效增大了空气、茶多酚反应液以及固定化酶三者之间的接触面积，同时使反应液进行多次重复循环反应，充分提高茶黄素生产过程中多酚氧化酶以及茶多酚的利用率，从而有效提高了反应效率和反应完全度，提升了茶黄素产品的收率和质量，同时达到节能环保的目的，具有良好的经济和社会效益，有利于推广和普及。CN109536544ACN109536544A权利要求书1/1页1.一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于，包括以下步骤：a.取鲜茶叶进行粉碎后，向其中依次加入纯水，利用缓冲溶液调节pH至4-6之间，搅拌后得到浸提液，对该浸提液进行粗滤、超滤以及浓缩，得到粗酶液；b.利用载体对上述粗酶液进行固定化处理，得到固定化多酚氧化酶；c.向配料罐中依次加入乙酸乙酯和茶多酚，得到茶多酚反应液；d.将步骤b得到的固定化多酚氧化酶置于反应柱内部，将步骤c中得到的茶多酚反应液通入该反应柱内，控制反应液上进下出，同时向反应柱内通入空气，控制空气下进上出，使反应液、固定化多酚氧化酶以及空气三者充分接触进行反应；e.反应后的料液从反应柱底部流出后重新通入反应柱内重复进行反应，如此重复循环反应一段时间后结束整个反应；f.循环反应结束后，将料液通入萃取塔，利用纯水进行萃取提纯；g.萃取结束后将料液通入浓缩罐进行浓缩，同时加入纯水，去除乙酸乙酯，将料液转换成水相，浓缩后得到的水相料液浓度控制在20-60％；h.对上述浓缩后的料液进行喷雾干燥，最终得到茶黄素粉。2.如权利要求1所述的一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于：步骤a中，浸提温度为0-30℃，搅拌时间为10-40min。3.如权利要求1所述的一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于：步骤b中，所述载体为活化处理后的离子交换树脂。4.如权利要求1所述的一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于：步骤c中，所述茶多酚的纯度为60-90％，茶多酚反应液的浓度为5-20％。5.如权利要求1所述的一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于：步骤d中，茶多酚反应液进入反应柱时的流速为1.5-5.5mL/min，空气进入反应柱时的流速为50-500mL/min，反应温度为15-55℃。6.如权利要求1所述的一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于：步骤e中，重复循环反应的时间为1-8h。7.如权利要求1所述的一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于：步骤f中，料液进入萃取塔时的流速为800-1200L/h，纯水进入萃取塔时的流速为400-900L/h，萃取温度23-32℃。8.如权利要求1所述的一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法，其特征在于：步骤g中，浓缩后得到的水相料液浓度控制在20-60％。2CN109536544A说明书1/4页一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法技术领域[0001]本发明涉及茶黄素生产技术领域，具体涉及一种利用固定化多酚氧化酶生产茶黄素的方法。背景技术[0002]茶黄素是红茶中的重要品质成分和功能成分，具有降血脂、降血压、抗氧化、抗辐射、抗菌、抗癌等多种生物活性和药理功效，因而具有良好的医药保健功能。茶黄素是茶色素系列产物中分子量最小、结构最简单、生物活性最明确的化学成分，是唯一一个药理作用明确的茶活性成分。[0003]茶黄素是茶多酚类物质和氧气在多酚氧化酶的催化作用下生成邻醌，邻醌进一步氧化为联苯酚醌类中间产物，该联苯酚醌类物质一部分被还原为双黄烷醇类，另一部分在多酚氧化酶催化作用下进一步氧化得到茶黄素。茶黄素最早是从红茶中直接提取的，然而红茶本身含有的茶黄素仅占0.5-2.0％，因而导致其提取收率较低。目前工业上生产茶黄素主要采用茶多酚酶促氧化法，将鲜茶叶粉碎后投入反应釜，加入溶剂和茶多酚，通空气进行反应，利用鲜茶叶中天然存在的多酚氧化酶催化合成得到茶黄素。但由于茶叶中的多酚氧化酶含量