四氢呋喃-2-甲酸的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109868298A(43)申请公布日2019.06.11(21)申请号201711250755.7(22)申请日2017.12.01(71)申请人上海弈柯莱生物医药科技有限公司地址200120上海市浦东新区中国（上海）自由贸易试验区芳春路400号1幢4层436室(72)发明人程占冰孙传民田振华(74)专利代理机构上海一平知识产权代理有限公司31266代理人肖艳刘妍珺(51)Int.Cl.C12P17/04(2006.01)C12N1/21(2006.01)C12R1/19(2006.01)权利要求书2页说明书10页序列表2页(54)发明名称四氢呋喃-2-甲酸的制备方法(57)摘要本发明提供了四氢呋喃-2-甲酸的制备方法。具体地，本发明提供了一种低成本、高效、光学纯度高的(S)-四氢呋喃-2-甲酸制备方法。所述方法利用脂肪酶(例如南极假丝酵母脂肪酶B(CALB))，可以非常高效、高立体选择性(ee值≥98％)地制备得到(S)-四氢呋喃-2-甲酸。本发明方法不仅降低了成本，减少了精制工序，从而极大地提高转化效率(转化率可高达约48％或更高)和缩短反应时间降低生产成本。本发明方法具有收率高、转化率高、成本低、生产周期短、工艺简单、易于放大、适合进行大生产等诸多优点。CN109868298ACN109868298A权利要求书1/2页1.一种制备(S)-四氢呋喃-2-甲酸的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(a)在反应体系中，以化合物A为底物，在脂肪酶催化下，进行反应式I所示的立体异构催化反应，从而形成(S)-四氢呋喃-2-甲酸；其中R为C1-C4烷基；和(b)任选地从所述步骤(a)的反应后的反应体系中分离出(S)-四氢呋喃-2-甲酸。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述R为甲基或乙基。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述(S)-四氢呋喃-2-甲酸的ee值≥80％，较佳地≥85％，更佳地≥90％或≥95％。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶为假丝酵母脂肪酶。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶选自下组：(a)氨基酸序列如SEQIDNO.:1所示的多肽；或(b)将SEQIDNO.:1所示氨基酸序列经过一个或几个，优选1-20个、更优选1-15个、更优选1-10个、更优选1-8个、更优选1-3个、最优选1个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有(a)所述多肽功能的由SEQIDNO.:1所示氨基酸序列的多肽衍生的多肽。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括步骤(a1)：用化合物B与R-OH进行反应，得到化合物A，其中R为C1-C4烷基。7.一种脂肪酶的用途，其特征在于，用于制备一制剂，所述制剂用于催化反应式I所示的立体异构催化反应：8.一种(S)-四氢呋喃-2-甲酸生产菌株，其特征在于，所述菌株表达多肽，所述多肽为外源的脂肪酶，并用于催化反应式I所示的立体异构催化反应：2CN109868298A权利要求书2/2页9.一种生产(S)-四氢呋喃-2-甲酸的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：1)采用生产条件培养权利要求8所述的(S)-四氢呋喃-2-甲酸生产菌株，从而得到(S)-四氢呋喃-2-甲酸；和2)任选地，从1)的培养体系中分离获得(S)-四氢呋喃-2-甲酸。10.一种生产方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(a)利用权利要求1中所述的方法制备得到(S)-四氢呋喃-2-甲酸；和(b)利用所述的(S)-四氢呋喃-2-甲酸制备得到(S)-四氢呋喃-2-乙酰基。3CN109868298A说明书1/10页四氢呋喃-2-甲酸的制备方法技术领域[0001]本发明涉及生物催化领域，具体地涉及一种四氢呋喃-2-甲酸的制备方法。背景技术[0002]头孢维星(cefovecin)是由SmithKlineBeecham公司研发的一种半合成第3代头孢菌素。在20世纪90年代中期，辉瑞动物保健公司收购了SmithK-lineBeecham公司的动物保健部门之后，研发了头孢维星钠盐，即头孢维星钠，大大降低了生产成本，使得头孢维星可以形成商品化规模生产(商品名：康卫宁，Convenia)。头孢维星现主要用于犬和猫，具有吸收迅速、消除缓慢、生物利用度高、药效维持时间长、治疗指数高等特点，可作为犬、猫的长效抗生素使用。[0003](S)-四氢呋喃-2-乙酰基(cas：131328-27-3)是其中的关键中间体，结构式如下：[0004][0005]目前国内外报道的(S)-四氢呋喃-2-乙酰基的制备方法有US20030114693A1公布的以(S)-四氢呋喃-2-甲酰胺为原料，经由甲苯磺酰氯-吡啶脱水剂脱水反应得到(S)-四氢呋喃-