以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110079569A(43)申请公布日2019.08.02(21)申请号201910354160.9(22)申请日2019.04.29(71)申请人河北鑫合生物化工有限公司地址055650河北省邢台市新河县城西工业区兴龙街10号(72)发明人张禹张国沛张少华贾敬敏(74)专利代理机构石家庄海天知识产权代理有限公司13101代理人田文其(51)Int.Cl.C12P19/04(2006.01)C12R1/01(2006.01)权利要求书2页说明书10页(54)发明名称以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法(57)摘要本发明涉及微生物发酵，特备是指一种以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法。它包括将鞘氨醇单胞菌(Sphingomonassp.)CGMCCNo.1650接种到灭菌后且含有碳源、氮源及营养物质的培养液中；调节培养液的pH，进行通气发酵，将发酵结束后的发酵液进行沉降萃取得到纤维状三赞胶；培养液中的碳源选用废糖蜜、废葡萄糖母液中的一种或其结合；氮源选用无机氮及有机氮组成的复合氮源；发酵过程中采用通风量及温度分段控制，在通气发酵时补入碳源。本发明解决了现有技术中三赞胶收率、凝胶强度低等技术问题，具有收率及凝胶强度等技术指标明显优于现有产品，生产成本低等优点。CN110079569ACN110079569A权利要求书1/2页1.以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，是将鞘氨醇单胞菌(Sphingomonassp.)CGMCCNo.1650接种到灭菌后且含有碳源、氮源及营养物质的培养液中；调节培养液的pH，进行通气发酵，将发酵结束后的发酵液进行沉降萃取得到纤维状三赞胶；其特征在于还包括如下工艺条件：A、培养液中的碳源选用废糖蜜、废葡萄糖母液中的一种或其结合；氮源选用无机氮及有机氮组成的复合氮源；B、通气发酵过程中压力为0.03MPa-0.05MPa，pH值＝5.0-7.0，发酵过程中采用通风量及温度分段控制，自发酵开始至发酵20小时温度为32℃-34℃，自发酵20小时至发酵结束温度为28℃-31℃，自发酵开始至发酵30小时通风量逐渐增加，自发酵30小时至发酵结束通风量逐渐降低；C、在通气发酵11-20小时及21-30小时分别补入碳源，所述的碳源选自废糖蜜、废葡萄糖母液中的一种或其结合。2.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的发酵过程中的温度及通风量控制条件如下：0-10小时：温度32℃-34℃，通风量0.2vvm-0.3vvm；11-20小时：温度32℃-34℃，通风量0.4vvm-0.5vvm；21-30小时：温度28℃-31℃，通风量0.7vvm-0.9vvm；31-40小时：温度28℃-31℃，通风量0.6vvm-0.7vvm；41-50小时：温度28℃-31℃，通风量0.2vvm-0.3vvm。3.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的通气发酵过程中采用氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、磷酸、硫酸或磷酸盐调节发酵过程中的pH＝5.0-7.0。4.根据权利要求3所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸、硫酸或磷酸盐采用质量百分比浓度为10％-15％的溶液。5.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于在通气发酵11小时至20小时及21小时至30小时分别补入占发酵液总质量1％-2％的碳源。6.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于发酵结束后的发酵液进行沉降萃取前进行预处理，预处理的工艺条件为：在发酵结束后的发酵液中加入质量百分比浓度为10％-20％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液，加入量为每升发酵液加入固态氢氧化钠或氢氧化钾2-4克。7.根据权利要求6所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于萃取时用有机酸或无机酸调节发酵液pH，使萃取液与发酵液的混合物的pH＝0.5-4.0后将其升温至55℃-90℃，萃取得到纤维状三赞胶。8.根据权利要求7所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于有机酸或无机酸选用柠檬酸、甲酸、丙酸、丁酸、辛酸、盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、硼酸、碳酸等中的一种或至少两种以上的混合物。9.根据权利要求1、6、7或8中任一项所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三2CN110079569A权利要求书2/2页赞胶的方法，其特征在于在萃取后得到的纤维状三赞胶中加入强碱弱酸盐或二价碱调节pH＝6.5-7.5后制成均匀的膏状物料。10.根据权利要求