一种酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110295209A(43)申请公布日2019.10.01(21)申请号201910608234.7(22)申请日2019.07.08(71)申请人山东德图农业科技有限公司地址261000山东省潍坊市潍城区潍高公路十公里处路南(72)发明人曹文禹徐静王之波(74)专利代理机构北京卓特专利代理事务所(普通合伙)11572代理人段宇(51)Int.Cl.C12P19/14(2006.01)C12P19/12(2006.01)C12P19/04(2006.01)C12P19/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法(57)摘要本发明提供一种酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法，涉及寡糖制备技术领域，包括预处理、浸润、软化、酶解、灭酶和过滤。提取褐藻胶寡糖的工艺方法，采用马尾藻为原料，经过预处理、浸润和软化，然后采用复合酶一次酶解，酶解反应温和、无毒无害，保证了食品安全；且酶解较彻底，处理时间短，简化了工艺，提高了褐藻胶寡糖的收率。CN110295209ACN110295209A权利要求书1/1页1.一种酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.预处理将马尾藻清洗干净并烘干，然后进行粗碎得粒度为20～40目的粗粉，最后将粗粉进行破壁处理，得到粒度为400～500目、破壁率30％～40％的马尾藻粉；S2.浸润向所述马尾藻粉中加入10～12倍重量的水，在50～70℃下浸润1～2h，得到浸润液；S3.软化向所述浸润液中加入软化剂，并调节pH为6～7，在50～70℃下软化1～2h，得到马尾藻浆液；S4.酶解将所述马尾藻浆液调节pH为6.5～8.5，并加入pH稳定剂；然后加入复合酶，在30～50℃下酶解6～12h；所述复合酶包括质量比为1～3:1～3:2～5:1～2:1～3:0.2～1:1～2:1～2的蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶、中性淀粉酶、褐藻胶裂解酶；S5.灭酶将所述酶解后的马尾藻浆液在85～95℃下加热15～25min进行灭酶；S6.过滤将所述灭酶后的马尾藻浆液进行过滤、烘干得到褐藻胶寡糖。2.根据权利要求1所述的酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法,其特征在于，步骤S2中，将所述马尾藻粉中加入体积分数70～90％的乙醇后回流提取2～4h，料液体积比为1:5～10，回流结束后除去乙醇，烘干，得到脱脂的马尾藻粉，然后对脱脂的马尾藻粉进行浸润。3.根据权利要求1所述的酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法,其特征在于，步骤S3中，所述软化剂为按照质量百分比包括以下成分：甘氨酸10～20％、柠檬酸15～25％、海藻酸钠1～5％和亚硫酸钾1～5％，其余为水。4.根据权利要求1所述的酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法,其特征在于，步骤S4中，所述pH稳定剂为质量比1～3:1的十二烷基硫酸钠和磷酸二氢钠。5.根据权利要求1所述的酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法,其特征在于，步骤S4中，所述复合酶中，蛋白酶的酶活单位为8～10万/ml，纤维素酶的酶活单位为8～10万/ml，果胶酶的酶活单位为3～5万/ml，木聚糖酶的酶活单位为8～10万/ml，甘露聚糖酶的酶活单位为8～10万/ml，β-葡聚糖酶的酶活单位为8～10万/ml，中性淀粉酶的酶活单位为3～5万/ml，褐藻胶裂解酶的酶活单位为2000～3000万/ml。6.根据权利要求1所述的酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法,其特征在于，所述蛋白酶为木瓜蛋白酶。2CN110295209A说明书1/5页一种酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法技术领域[0001]本发明涉及寡糖制备技术领域，具体涉及一种酶解马尾藻提取褐藻胶寡糖的工艺方法。背景技术[0002]褐藻胶寡糖(alginateoligosaccharides)是褐藻胶经水解而得到的聚合度较小且水溶性好的低分子量片段。褐藻胶寡糖相对分子质量低,具有水溶性好、稳定性高、安全无毒的理化特性,有很多报道称低相对分子质量的褐藻胶寡糖具有多种生物活性,如促进植物生长、提高植物抗逆性、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等,在农业、功能食品开发、医药等领域具有广阔的开发前景。[0003]传统制备褐藻胶寡糖的方法主要是物理法、化学降解法和酶解法。物理法操作简单，无污染，节约试剂，可以有效的切断大分子链，但是降解所得的极限分子质量较大，不易制备出分子量较小的寡糖。化学降解法生产成本低、技术成熟、反应机理明确，但操作步骤繁琐、需要使用刺激性的化学试剂、反应剧烈、易腐蚀设备、造成环境污染,制备的褐藻胶寡糖产量较低,难以达到工业化生产的要求。与化学降解法和物理降解法相比,酶解法具有反应更加温和、底物专一性