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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112341508A(43)申请公布日2021.02.09(21)申请号202011223603.X(22)申请日2020.11.05(71)申请人内蒙古拜克生物有限公司地址010206内蒙古自治区呼和浩特市托克托县托克托工业园区(72)发明人周彦乐马婷侯争平王奇刘强(74)专利代理机构北京精金石知识产权代理有限公司11470代理人尉月丽(51)Int.Cl.C07H19/167(2006.01)C07H1/06(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种腺苷蛋氨酸的分离纯化方法(57)摘要本发明提供了一种腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,涉及生物工程技术领域。包括以下步骤:S1、细胞破壁;S2、过柱纯化;S3、结晶纯化;步骤S1中破壁过程中加入溶剂为体积比5‑10:1的乙酸和硫酸,能够有效保证小分子溶出,而使细胞中的大分子截留,从而有效地减少了后续处理中的除杂步骤,从而提高了腺苷蛋氨酸的收率,过柱纯化过程中使用混合大孔径树脂,通过控制大孔径树脂的体积比,能够有效去除杂质,使得到的腺苷蛋氨酸纯度高,本发明提供的腺苷蛋氨酸分离纯化方法,最终得到的腺苷蛋氨酸的收率为80%以上,纯度为99.5%以上。CN112341508ACN112341508A权利要求书1/1页1.一种腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:包括以下步骤:S1、破壁处理:取发酵液进行离心处理,去除上清液,洗涤后再次离心去上清液,取沉淀加入溶剂,常温震荡30-60min后离心,经0.22μm滤膜过滤,保留滤液,备用;S2、调整步骤S1中得到的滤液的pH值,然后过弱酸性离子交换树脂,使用硫酸洗脱,得到腺苷蛋氨酸硫酸洗脱液;S3、将步骤S2中得到的腺苷蛋氨酸硫酸洗脱液进行沉淀析出,得到腺苷蛋氨酸硫酸盐;步骤S1中所述的加入溶剂为乙酸和硫酸的混合溶液。2.根据权利要求1所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:步骤S1中所述的加入溶剂为体积比5-10:1的乙酸和硫酸混合溶液。3.根据权利要求2所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:步骤S1中所述的加入溶剂为体积比8:1的乙酸和硫酸混合溶液。4.根据权利要求1所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:所述的乙酸的浓度为0.1-0.3mol/L,所述的硫酸的浓度为0.6-1.0mol/L。5.根据权利要求4所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:所述的乙酸的浓度为0.2mol/L,所述的硫酸的浓度为0.8mol/L。6.根据权利要求1所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:步骤S2中所述的过弱酸性离子交换树脂为D113树脂和D115树脂的混合树脂。7.根据权利要求1所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:所述的D113树脂和D115树脂的体积比为2-3:1。8.根据权利要求1所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:步骤S3中所述的沉淀析出步骤为:将步骤S2中得到的洗脱液缓慢滴加到甲醇溶液中,所述的甲醇溶液的体积分数为60-80%;所述的滴加速度为1分钟20-30滴。9.根据权利要求8所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:所述的甲醇溶液中添加有盐酸。10.根据权利要求9所述的腺苷蛋氨酸的分离纯化方法,其特征在于:所述的盐酸与甲醇的得体积比为5-10mL:50mL;所述的盐酸的浓度为1-2mol/L。2CN112341508A说明书1/7页一种腺苷蛋氨酸的分离纯化方法技术领域[0001]本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及一种腺苷蛋氨酸的分离纯化方法。背景技术[0002]腺苷蛋氨酸,又称为腺苷甲硫氨酸,是甲硫氨酸的活性形式,其结构为:于1951年被发现,广泛存在于动物、植物和微生物中,也是人体内一种重要的生理活性物质,参与了40多种生化反应。在生物体内由蛋氨酸和ATP经腺苷蛋氨酸合成酶催化合成,在此反应中,ATP的腺苷转移到蛋氨酸上,形成一个高能硫原子,通过亲核进攻使与其相连的碳原子活化,从而具有转甲基、转氨丙基、转硫基等作用。腺苷蛋氨酸是与人体中脂肪、蛋白质、糖类等的代谢有关的重要生理活性物质,作为中间代谢物,广泛存在于各种生物体内,参与诸多的生化反应。在生物体内,腺苷蛋氨酸通过S-腺苷蛋氨酸合成酶,消耗ATP时蛋氨酸腺苷合成。[0003]在动物、植物和微生物体内,腺苷蛋氨酸是一种小分子重要代谢产物。同时,作为一种重要的生理活性物质存在于人体内,对生物的生长、代谢和发育起着重要的作用。腺苷蛋氨酸是通过提供基团和作为酶的诱导剂参与体内重要的生化反应的各种代谢途径,如脂类、蛋白质、核酸甲基化反应,转硫反应及多氨合成反应等,因其具有消炎及组织修复等功能,因此多用于关节炎的治疗;由于甲基化作用可以促进大脑和血液代谢多巴