一种测定植物性食品中唑嘧菌胺残留量的液相色谱串联质谱法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112444591A(43)申请公布日2021.03.05(21)申请号201910846588.5(22)申请日2019.08.30(71)申请人谱尼测试集团上海有限公司地址200030上海市徐汇区桂平路680号35号楼3楼(72)发明人熊敏(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称一种测定植物性食品中唑嘧菌胺残留量的液相色谱串联质谱法(57)摘要本发明属于食品安全技术领域，涉及一种测定植物性食品中唑嘧菌胺残留量的液相色谱串联质谱法。称取均匀样品，以甲醇均质提取，无水硫酸镁和PSA净化，高速冷冻离心后，上清液旋蒸至近干，80％乙腈溶解残渣，过OasisPRiMEHLB柱净化，经0.22μm滤膜过滤，经液相色谱串联质谱检测，外标法定量。本发明所述检测方法前处理步骤简单新颖，除杂效果好，方法的灵敏度、回收率高，测定结果的精密度好，可以有效的检测植物性食品中唑嘧菌胺残留量。CN112444591ACN112444591A权利要求书1/1页1.一种测定植物性食品中唑嘧菌胺残留量的液相色谱串联质谱法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取：称取均匀样品10g于50ml离心管中，加入30ml甲醇，均质提取，8000r/min冷冻离心后，取上清液，残渣再用20ml甲醇重复提取一次，合并上清液，加入6g无水硫酸镁和150mgN-丙基乙二胺固相吸附剂，震摇，转移上清液至旋蒸瓶中，40℃旋蒸至近干，80％乙腈溶液复溶并定容至5ml，为待净化液；(2)净化：将待净化液过OasisPRiMEHLB柱净化；上样过程维持1滴/秒，收集流出液，过0.22μm滤膜，得样品溶液，供液相色谱串联质谱测定；(3)测定：在下述液相色谱串联质谱条件下对标准溶液和样品溶液进行测定：a.色谱条件：色谱柱：C18，1.7μm，2.1mm×50mm；流动相：A相为0.1％甲酸溶液+B相为0.1％甲酸乙腈溶液，梯度洗脱，程序为起始流动相比例，0.1％甲酸水溶液；0.1％甲酸乙腈溶液95∶5；2min，0.1％甲酸水溶液：0.1％甲酸乙腈溶液95∶5；5.5min，0.1％甲酸水溶液：0.1％甲酸乙腈溶液0∶100；6min，0.1％甲酸水溶液：0.1％甲酸乙腈溶液0∶100；7min，0.1％甲酸水溶液：0.1％甲酸乙腈溶液95∶5；7.5min，0.1％甲酸水溶液：0.1％甲酸乙腈溶液95∶5；流速：0.5mL/min；进样量：5.0μL；柱温：40℃；b.质谱条件：离子源：ESI电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：MRM多反应监测；离子源温度：120℃；去溶剂温度：450℃；母离子为276.4，定量离子为149.4，定性离子为176.3；锥孔电压为50V，定量离子碰撞能量为35eV，定性离子对碰撞能量为40eV。2CN112444591A说明书1/5页一种测定植物性食品中唑嘧菌胺残留量的液相色谱串联质谱法技术领域[0001]本发明属于食品安全技术领域，具体涉及一种液相色谱串联质谱测定植物性食品中唑嘧菌胺残留量的方法。技术背景[0002]唑嘧菌胺是一个三唑嘧啶类杀菌剂，属于线粒体呼吸抑制剂，是一种高选择性的杀菌剂，对霜霉和疫霉类卵菌纲真菌有控制作用，具有极强的残留活性和耐雨性，能在叶片中重新分布，保护作物健康成长，充分发挥生长潜力。2010年初，唑嘧菌胺在罗马尼亚首先获得登记，主要用于防治葡萄上的晚疫病及霜霉病；2010年7月，在英国获准登记；同年，在荷兰取得登记；2011年，唑嘧菌胺产品Initium上市；2012年，在澳大利亚、加拿大、意大利和美国登记，用于果树、蔬菜、啤酒花、葡萄、马铃薯和观赏植物；2013年8月1日，唑嘧菌胺被列入欧盟农药登记条例已登记有效成分名单，用于葡萄、蔬菜和马铃薯；2013年8月6日，98％唑嘧菌胺原药在我国获得临时登记；迄今，唑嘧菌胺已在全球50多个国家取得登记。包括葡萄、土豆、西红柿、生菜及其他蔬菜等。唑嘧菌胺具有独特的作用机理，这使其成为此分类中唯一的现有杀菌剂，因此与其他商品化的杀菌剂没有交互抗性，这使唑嘧菌胺成为特种作物上真菌抗性治理的理想工具。[0003]我国GB2763-2016《食品中农药残留最大限量》中制订了唑嘧菌胺的临时限量，规定了葡萄、黄瓜以及马铃薯中的临时限量分别为2mg/kg、1mg/kg和0.05mg/kg。但是目前还没有制订相应的检测方法。[0004]研发出植物性食品唑嘧菌胺残留量的检测方法，可以满足农产品生产、销售以及监督抽查各环节对于唑嘧菌胺检测的迫切需求，具备比较广泛的市场前景2016年全球登记或上市的新农药有49个。其中巴斯夫在西班牙等级唑嘧菌胺和烯酰吗啉复