一种海产品中短链氯化石蜡的检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112526010A(43)申请公布日2021.03.19(21)申请号202011286800.6(22)申请日2020.11.17(71)申请人浙江省海洋水产研究所地址316021浙江省舟山市定海区临城体育路28号(72)发明人胡红美郭远明李铁军应忠真孙秀梅(74)专利代理机构杭州仁杰专利代理事务所(特殊普通合伙)33297代理人张俊(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/14(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图1页(54)发明名称一种海产品中短链氯化石蜡的检测方法(57)摘要本发明公开了一种海产品中短链氯化石蜡的检测方法，包括以下步骤：(1)采样和制样；(2)取样和加速溶剂萃取；(3)脱脂除杂；(4)顶空固相微萃取；(5)气相色谱‑质谱检测；(6)标准曲线绘制；(7)样品测定。本发明优化了样品净化处理过程及检测条件，采用加速溶剂萃取、顶空固相微萃取、气相色谱质谱法测定海产品中的短链氯化石蜡，该方法操作简单，净化过程无需额外有机溶剂溶剂，环境友好，符合绿色发展需要，整个加速溶剂萃取和顶空固相微萃取过程都可通过仪器完成，自动化程度高，结果准确，具有较高的灵敏度和令人满意的回收率及重现性，能用于海产品中短链氯化石蜡的含量测定。CN112526010ACN112526010A权利要求书1/2页1.一种海产品中短链氯化石蜡的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采样和制样将海产品样品捣碎匀质后，冷冻干燥，‑80℃冷藏，待测；(2)取样和加速溶剂萃取称取四份待测样品，每份2.00g，分别对待测样品进行加速溶剂萃取并收集萃取液，加速溶剂萃取的具体步骤为：在34mL萃取池底部装填经活化的3～5g弗罗里硅土、经活化的3～5g中性硅胶和经活化的1g无水硫酸钠；将待测样品与适量硅藻土混合均匀后装入萃取池13中，加入1ng替代内标C10‑反式氯丹，将萃取池的池顶部用适量硅藻土填满；以体积比(v/v)为1：1的正己烷和二氯甲烷作为萃取剂进行加速溶剂萃取；(3)脱脂除杂分别将萃取液置于‑80℃冷冻脱脂后，离心取上清液；在上清液中加入3～5g酸性硅胶(44％硫酸，w/w)，涡旋后过无水硫酸钠柱，38℃水浴旋转蒸发至干，加入10mLMilli‑Q水(18.2MΩ/cm)溶解，得溶解液；(4)顶空固相微萃取分别将溶解液转移至10mL顶空瓶中，加入氯化钠，立即用顶空瓶盖密封，涡旋溶解氯化钠后，将样品置于32位顶空固相微萃取自动进样器上，按照预先设定好的条件分别进行顶空固相微萃取；(5)气相色谱‑质谱检测将萃取头插入气相色进样口，解析后按照设定好的气相色谱‑质谱检测器条件进行检测，进样四次，得总离子流色谱图；(6)标准曲线绘制定性：选择离子监测模式，取短链氯化石蜡单体总浓度为10ng/μL，氯含量为55.5％的13短链氯化石蜡标准溶液10μL，加入1ng替代内标C10‑反式氯丹，用Milli‑Q水定容至10.00mL，配置成浓度为10μg/L，氯含量为55.5％的短链氯化石蜡标准工作液；将短链氯化石蜡标准工作液按照步骤(4)‑步骤(5)进行四次进样检测，得到标准工作液的总离子流图色谱图；根据保留时间、定性离子、定量离子、色谱峰形状比较进行定性分析；定量：分别取短链氯化石蜡单体总浓度为10ng/μL，氯含量为51.5％、53.5％、55.5％、1359.25％和63％的短链氯化石蜡标准溶液各10μL，加入1ng替代内标C10‑反式氯丹，用Milli‑Q水定容至10.00mL，配置成浓度为10μg/L，氯含量为51.5％、53.5％、55.5％、59.25％和63％的的短链氯化石蜡标准工作液，按照步骤(4)‑步骤(5)进行四次进样检测，建立测得的氯含量与总响应因子之间的标准曲线，标准曲线线性回归方程为y＝35.2x‑2053.7，式中y为总响应因子，x为测得的氯含量，相关系数为0.972，具有良好的线性关系，方法检出限为0.25ng/g，满足分析方法要求；所述短链氯化石蜡标准溶液中的溶质为24种短链氯化石蜡单体，溶剂为丙酮；其中24种短链氯化石蜡单体分别为C10H17Cl5、C10H16Cl6、C10H15Cl7、C10H14Cl8、C10H13Cl9、C10H12Cl10、C11H19Cl5、C11H18Cl6、C11H17Cl7、C11H16Cl8、C11H15Cl9、C11H14Cl10、C12H21Cl5、C12H20Cl6、C12H19Cl7、C12H18Cl8、C12H17Cl9、C12H16Cl10、C13H23Cl5、C13H22Cl6、C13H21Cl7、C13H20Cl8、C13H1