一种D-天门冬氨酸的生产方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112813130A(43)申请公布日2021.05.18(21)申请号202110149766.6(22)申请日2021.02.03(71)申请人安徽丰原生物技术股份有限公司地址233700安徽省蚌埠市固镇县经济开发区经二路东、纬四路北(72)发明人曹文文付松崔怀成冯学磊王瑞昌闻龙(74)专利代理机构北京睿阳联合知识产权代理有限公司11758代理人杨金贤王莹(51)Int.Cl.C12P41/00(2006.01)C12P13/20(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种D-天门冬氨酸的生产方法(57)摘要本发明属于氨基酸生产技术领域，具体公开了一种D‑天门冬氨酸的生产方法。本发明提供的D‑天门冬氨酸的生产方法，将反应底料DL‑天门冬氨酸溶液与含L‑天冬氨酸‑β脱羧酶的发酵液混合进行转化反应，采用在反应过程中流加DL‑天门冬氨酸固体及DL‑天门冬氨酸溶液反应底料的方式进行转化，反应得到的转化液体系中D‑天门冬氨酸的浓度高，显著提高了D‑天门冬氨酸产品的收率和纯度。CN112813130ACN112813130A权利要求书1/1页1.一种D‑天门冬氨酸的生产方法，其特征在于，包括步骤：S1：将反应底料DL‑天门冬氨酸溶液与含L‑天冬氨酸‑β脱羧酶的发酵液混合进行转化反应，反应过程中先流加DL‑天门冬氨酸固体，当流加的DL‑天门冬氨酸固体与所述反应底料DL‑天门冬氨酸溶液中DL‑天门冬氨酸重量比达到1:(0.8～1.35)时，停止流加DL‑天门冬氨酸固体；S2：之后一次性流加所述反应底料DL‑天门冬氨酸溶液，流加的量为反应体系体积的0.3～0.6；S3：然后再流加DL‑天门冬氨酸固体，流加至反应体系的pH值不低于6.0且在15分钟内pH值不能回升至6.5时，停止流加DL‑天门冬氨酸固体，反应至反应体系的pH值为6.0～6.5，终止反应，得到转化液。2.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述反应底料DL‑天门冬氨酸溶液的浓度为0.6～0.8g/ml，优选为0.65～0.75g/ml，更优选为0.7g/ml。3.根据权利要求1或2所述的生产方法，其特征在于，所述含L‑天冬氨酸‑β脱羧酶的发酵液中菌体湿重为30～40g/L。4.根据权利要求1～3任一项所述的生产方法，其特征在于，所述反应底料DL‑天门冬氨酸溶液与含L‑天冬氨酸‑β脱羧酶的发酵液混合的体积比为1:(0.5～1.5)，优选为1:(0.9～1.1)，更优选为1:1。5.根据权利要求4所述的生产方法，其特征在于，所述反应底料DL‑天门冬氨酸溶液是以L‑天门冬氨酸为原料，经消旋制得；优选地，反应底料DL‑天门冬氨酸溶液制备过程包括：将L‑天门冬氨酸与水混合，之后调节pH值至7.5～8.5；然后加入天门冬氨酸消旋酶反应，中控等电结晶物料比为0时反应结束，得到反应底料DL‑天门冬氨酸溶液。6.根据权利要求5所述的生产方法，其特征在于，所述流加的DL‑天门冬氨酸固体是采用阿斯巴甜副产的DL‑天门冬氨酸为原料，经消旋、等电结晶制得；优选地，DL‑天门冬氨酸固体制备过程包括：将阿斯巴甜副产的DL‑天门冬氨酸与水混合，之后调节pH值至7.5～8.5；然后加入天门冬氨酸消旋酶反应，中控等电结晶物料比为0时反应结束，反应体系经脱色、过滤，然后等电结晶得到DL‑天门冬氨酸固体。7.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，步骤S1中，当流加的DL‑天门冬氨酸固体与所述反应底料DL‑天门冬氨酸溶液中DL‑天门冬氨酸重量比达到1:(0.8～1.0)时，停止流加DL‑天门冬氨酸固体。8.根据权利要求7所述的生产方法，其特征在于，步骤S2中，反应底料DL‑天门冬氨酸溶液的流加量为反应体系体积的0.3～0.5。9.根据权利要求7或8所述的生产方法，其特征在于，步骤S3中，流加的DL‑天门冬氨酸固体，流加至反应体系的pH值为6.0且在15分钟内pH值不能回升至6.5时，停止流加DL‑天门冬氨酸固体，反应至反应体系的pH值为6.5，终止反应。10.权利要求1～9任一项所述的生产方法制得的D‑天门冬氨酸。2CN112813130A说明书1/5页一种D‑天门冬氨酸的生产方法技术领域[0001]本发明属于氨基酸生产技术领域，特别是涉及一种D‑天门冬氨酸的生产方法。背景技术[0002]D‑天门冬氨酸是一种重要的手性化合物，在医药、食品等方面具有重要作用，是多种手性药物合成的原料。[0003]目前，D‑天门冬氨酸的制备主要有化学法和酶法。化学法需要进行不对称拆分，工艺复杂，且产物D‑天门冬氨酸的纯度低，无工业化价值。酶法生产D‑天门冬氨酸是目前常用的生产方法，一般采用L‑天冬氨酸‑β‑脱羧酶发酵液进行转化反应，但