一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112986476A(43)申请公布日2021.06.18(21)申请号202110171428.2(22)申请日2021.02.06(71)申请人广西思浦林科技有限公司地址530000广西壮族自治区南宁市高新区明华路南面南宁国家火炬计划软件产业基地生物工程技术中心A3栋厂房第5层(72)发明人何明远颜鸿飞孟嫣韦松茂胡晓艳巫兴玲(74)专利代理机构长沙优企知识产权代理事务所(普通合伙)43243代理人刘佳芳(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图5页(54)发明名称一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法(57)摘要本发明公开了一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法，用纯水提取样品中残留的络氨铜，提取液经二氯甲烷液液萃取净化后，用液相色谱‑串联质谱仪(LC‑MS/MS)检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正标准溶液工作曲线，外标法定量。本方法平均添加回收率为80%〜95%，平均相对标准偏差(RSD)为5.3%〜9.9%，测定低限为0.05mg/kg，具有操作简便、快速、定性定量准确的优点。该方法能满足农药残留登记试验质量规范的要求，能够快速、灵敏、准确的测定果蔬中络氨铜农药残留量，为络氨铜农药残留检测提供了一种新的检测技术。CN112986476ACN112986476A权利要求书1/2页1.一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）提取称取10.0‑20.0g蔬菜和水果匀浆样品于具塞离心管中，加入20‑25mL纯水提取2‑5min后，在4000‑8000r/min下离心3‑5min，取上层清液，残渣再用20‑30mL纯净水重复以上提取过程，合并上层清液，用纯净水定容至50‑100mL，混匀；（2）液液分配净化移取4‑6mL步骤一的样品提取液于离心管中，加入与样品等体积的二氯甲烷，涡旋振荡2‑5min，静置或离心分层后，弃去二氯甲烷层，再重复以上液液萃取过程2‑3次，取一定量水相清液，过水系滤膜后，用液相色谱‑串联质谱仪检测；（3）标准工作溶液的配制标准溶液的配制：称取适量标准品，用1%‑1.5%的氨水溶液溶解定容，制成标准储备液1000mg/L，用于配制成系列浓度标准工作液；系列浓度标准工作液：将不含络氨铜的同种类基质空白样品按与步骤(1)、(2)相同的条件进行处理，得空白样品提取净化液，再用空白样品提取净化液将标准储备液逐级稀释，液配制成至少5个浓度的络氨铜系列标准工作液；（4）测定和结果计算将步骤(3)中各浓度的标准工作液进行LC‑MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(1)、(2)中净化后的样品液注入LC‑MS/MS进行测定，测得样品液中络氨铜的色谱峰面积，代入基质标准工作曲线，得到样液中络氨铜含量，然后根据样液所代表试样的质量计算得到样品中络氨铜残留量。2.根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法，其特征在于，步骤(1)中蔬菜和水果样品若为脱水样品，需降低称样量，并加适量水充分浸润。3.根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法，其特征在于，步骤(2)中采用液液分配净化时需加入与提取液体积相同体积的二氯甲烷萃取，提取次数不少于3次。4.根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的LC‑MS/MS测定方法，其特征在于，步骤(4)中API4000LC‑MS/MS的液相色谱分析条件为：2.1mm×50mm，粒径1.8μm的ZORBAX，EclipsePlusC18色谱柱，柱温为35℃；流速为0.2‑0.4mL/min，进样体积为2μL；流动相为：含0.1%甲酸水溶液和乙腈，梯度洗脫；梯度洗脫程序为：时间(min)0.1%甲酸水溶液(％)乙睛(％)09010190102.010903.010903.190104.09010质谱条件为：离子源：ESI；喷雾电压（V）：4500；干燥气和鞘气均为氮气，气帘气压力（psi）：30；雾化气压力（psi）：55；辅助气压力（psi）：55；加热气温度（℃）：500；鞘气压2CN112986476A权利要求书2/2页力（psi）：9；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测(MRM)；131.4〜132.4，子离子分别为121.5〜122.5和103.5〜104.5。3CN112986476A说明书1/8页一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法技术领域[0001]本发明涉及一种蔬菜和水果中络氨铜残留量的测定方法，更具体地说是采用液相色谱‑串联质谱仪(LC‑MS/MS)定性定量测定蔬菜和水果中残留的络氨铜含量的方法，属