生物样品冷冻保护剂.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113068686A(43)申请公布日2021.07.06(21)申请号202110381797.4(22)申请日2021.04.09(71)申请人太东（镇江）生物科技有限公司地址212009江苏省镇江市新区楚桥路99号国家大学科技园中心研发区3号楼(72)发明人王红兵(74)专利代理机构北京华进京联知识产权代理有限公司11606代理人王勤思(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权利要求书1页说明书9页附图1页(54)发明名称生物样品冷冻保护剂(57)摘要本发明涉及细胞保存液领域，具体而言，涉及一种生物样品冷冻保护剂。该生物样品冷冻保护剂包括如下活性成分：抗氧化物质：谷胱甘肽1.3g/L～1.7g/L、L‑肌肽0.45g/L～0.65g/L、亚精胺0.12g/L～0.18g/L以及根皮素0.03g/L～0.07g/L；氧化三甲胺55g/L～65g/L，以及聚维酮K3018g/L～22g/L。上述成分彼此配合，能够有效减少细胞在冻存过程中的氧化应激反应，提高细胞回收率。CN113068686ACN113068686A权利要求书1/1页1.生物样品冷冻保护剂，其特征在于，包括如下活性成分：·抗氧化物质：谷胱甘肽1.3g/L～1.7g/L、L‑肌肽0.45g/L～0.65g/L、亚精胺0.12g/L～0.18g/L以及根皮素0.03g/L～0.07g/L；·氧化三甲胺55g/L～65g/L，以及·聚维酮K3018g/L～22g/L。2.根据权利要求1所述的生物样品冷冻保护剂，其特征在于，包括如下活性成分：·抗氧化物质：谷胱甘肽1.4g/L～1.6g/L、L‑肌肽0.50g/L～0.60g/L、亚精胺0.13g/L～0.17g/L以及根皮素0.04g/L～0.06g/L；·氧化三甲胺58g/L～62g/L，以及·聚维酮K3019g/L～21g/L。3.根据权利要求1所述的生物样品冷冻保护剂，其特征在于，所述生物样品冷冻保护剂还包括细胞生长培养基。4.根据权利要求3所述的生物样品冷冻保护剂，其特征在于，所述细胞生长培养基为RPMI‑1640培养基。5.根据权利要求4所述的生物样品冷冻保护剂，其特征在于，所述RPMI‑1640培养基的浓度为9g/L～11g/L。6.根据权利要求1～5任一项所述的生物样品冷冻保护剂，其特征在于，还包括至少一种额外的冷冻保护剂。7.根据权利要求1所述的生物样品冷冻保护剂，其特征在于，还包括能够在0℃～‑196℃下维持pH＝7.0～7.4的缓冲试剂。8.冷冻保存组合物，其特征在于，包含生物样品和权利要求1～7任一项所述的生物样品冷冻保护剂。9.冷冻保存生物样品的方法，其特征在于，包括如下步骤：将被冷冻保存的生物样品与权利要求1～7任一项所述的生物样品冷冻保护剂接触，从而获得冷冻保存组合物，降低所述冷冻保存组合物的温度至冷冻保存温度。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述生物样品包括器官、组织或细胞，或它们的组合物。2CN113068686A说明书1/9页生物样品冷冻保护剂技术领域[0001]本发明涉及细胞保存液领域，具体而言，涉及一种生物样品冷冻保护剂。背景技术[0002]现有细胞冻存液多以基础培养基、血清及DMSO作为保护剂，这些物质可以最大限度的保持冻存细胞在复苏后的活力。在细胞冻存过程中，DMSO可以穿透细胞膜，降低冰点，同时增加细胞膜对水的通透性，在冷冻过程中使细胞内水分渗到细胞外，减少细胞在冻存过程中细胞内部冰晶形成，从而减少冷冻过程中的细胞器损伤，提高细胞复苏后存活率。[0003]由于DMSO含有细胞毒性，以DMSO为冻存保护剂的冻存液保存的细胞在复苏后，会出现生长抑制，影响细胞生长。在细胞治疗中，以DMSO为冻存保护剂的冻存液保存的细胞注入人体后会引起恶心、呕吐及过敏等不良反应。[0004]在冷冻过程中，在提供必要的防护效果的前提下，避免对细胞有毒害的冷冻保护剂成分的使用或降低其浓度，并减小冷冻过程中的应力和损伤是本领域亟待解决的技术问题。[0005]有鉴于此，特提出本发明。发明内容[0006]本发明的第一目的在于提供一种生物样品冷冻保护剂，包括如下活性成分：[0007]·抗氧化物质：谷胱甘肽1.3g/L～1.7g/L、L‑肌肽0.45g/L～0.65g/L、亚精胺0.12g/L～0.18g/L以及根皮素0.03g/L～0.07g/L；[0008]·氧化三甲胺55g/L～65g/L，以及[0009]·聚维酮K3018g/L～22g/L。[0010]可选的，如上所述的生物样品冷冻保护剂，包括如下活性成分：[0011]·抗氧化物质：谷胱甘肽1.4g/L～1.6g/L、L‑肌肽0.50g/L～0.6