一种石斛生物碱的提纯方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113105465A(43)申请公布日2021.07.13(21)申请号202110288580.9(22)申请日2021.03.18(71)申请人遵义医科大学珠海校区地址519041广东省珠海市金湾区金湾路368号(72)发明人耿璐璐孙浩洋王敏周承宏余莹(74)专利代理机构广州嘉权专利商标事务所有限公司44205代理人尹凡华(51)Int.Cl.C07D491/08(2006.01)权利要求书1页说明书3页附图1页(54)发明名称一种石斛生物碱的提纯方法(57)摘要本发明属于天然药物提取纯化技术领域，公开了一种石斛生物碱的提纯方法，包括以下步骤：(1)将石斛原料粉碎后，用碱水浸润、密封，加入二氯甲烷或氯仿作为提取溶剂进行超声提取，滤过，旋干，用甲酸甲醇进行溶解，得到粗提液；(2)将所述粗提液滤过，得到上样液；将所述上样液上样至已活化的阳离子交换固相萃取柱内，再依次采用酸和甲醇进行淋洗，最后采用碱性有机溶剂进行洗脱，得到含石斛生物碱的洗脱液。所述提纯方法具有反应条件温和，提纯工艺简单，产品收率高和杂质少的突出优点，具备良好的实用价值。CN113105465ACN113105465A权利要求书1/1页1.一种石斛生物碱的提纯方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将石斛原料粉碎后，用碱水浸润、密封，加入二氯甲烷或氯仿作为提取溶剂进行超声提取，滤过，旋干，用甲酸甲醇进行溶解，得到粗提液；(2)将所述粗提液滤过，得到上样液；将所述上样液上样至已活化的阳离子交换固相萃取柱内，再依次采用酸和甲醇进行淋洗，最后采用碱性有机溶剂进行洗脱，得到含石斛生物碱的洗脱液。2.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(1)中所述石斛原料粉碎后的粒度为20‑80目。3.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(1)中所述超声提取的时间为0.5‑2h。4.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(1)中所述碱水的pH＝11.5‑12.5。5.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(1)中所述甲酸甲醇的体积浓度为0.2‑1.0％。6.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(2)中所述上样的速度为0.4‑1.0mL/min。7.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(2)中依次采用甲醇、纯水对所述阳离子交换固相萃取柱进行活化。8.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(2)中所述阳离子交换固相萃取柱选自MCX型或PCX型。9.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(2)中所述淋洗所用的酸为0.02‑0.2mol/L的盐酸。10.根据权利要求1所述的提纯方法，其特征在于，步骤(2)中所述碱性有机溶剂为5‑10％氨水‑乙醇。2CN113105465A说明书1/3页一种石斛生物碱的提纯方法技术领域[0001]本发明属于天然药物提取纯化技术领域，尤其涉及一种石斛生物碱的提纯方法。背景技术[0002]石斛是我国的一种名贵中药材，据《神农本草经》中记载，金钗石斛有养胃生津、滋阴清热、润肺止咳和平肝明目等功效。石斛生物碱是石斛药材中的主要活性成分，也是最早被分离提取并进行了结构确认的化合物，具有止痛、解热、抗肿瘤等作用，可降低心率和血压，具有较高的研究开发价值。由此可见，研究石斛生物碱的提取、纯化方法对于石斛这一中药材的开发具有中药意义。[0003]然而，现有工艺中对于石斛生物碱的提取、纯化操作还面临工艺复杂、产品收率低以及杂质较多等缺陷。因此，希望提出一种操作更为简便、且纯化效果更好的石斛生物碱的提纯方法。发明内容[0004]本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种石斛生物碱的提纯方法，具有反应条件温和，提纯工艺简单，产品收率高和杂质少(石斛生物碱纯度≥98％)的突出优点，具备良好的实用价值。[0005]本发明提供了一种石斛生物碱的提纯方法，包括以下步骤：[0006](1)将石斛原料粉碎后，用碱水浸润、密封，加入二氯甲烷或氯仿作为提取溶剂进行超声提取，滤过，旋干，用甲酸甲醇进行溶解，得到粗提液；[0007](2)将所述粗提液滤过，得到上样液；将所述上样液上样至已活化的阳离子交换固相萃取柱内，再依次采用酸和甲醇进行淋洗，最后采用碱性有机溶剂进行洗脱，得到含石斛生物碱的洗脱液。[0008]采用本发明所述的提纯方法可以有效将杂质物质进行分离，纯化步骤简单易操作，提取效率高，最终洗脱出柱的石斛生物碱样品纯净，杂质含量较少。[0009]优选的，步骤(1)中所述石斛原料粉碎后的粒度为20‑80目。将石斛原料粉碎至合适的粒度，有助于后续对石斛生物碱的超声提取。[0010]优选的，步骤(1)中所述超声提取的时间为0.5‑2