一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113156017A(43)申请公布日2021.07.23(21)申请号202110455452.9(22)申请日2021.04.26(71)申请人陕西汉王药业股份有限公司地址723000陕西省汉中市汉台区（经济开发区北区）迎宾西路(72)发明人罗欢欢冯泽宇李捷田惠玲谢艳华肖会敏王四旺李志平(74)专利代理机构北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司11139代理人马鑫(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书1页说明书10页附图6页(54)发明名称一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法(57)摘要本发明公开了一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法。该方法能够同时测定强力定眩片中天麻素、没食子酸、5‑羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内脂、蒙花苷12种化学成分的含量。研究结果表明，使用本发明的方法检测12种化学成分，在试验范围内线性关系良好(r＞0.9990)，平均加样回收率为96.0％～117.0％，RSD为1.00％～2.80％。本发明首次建立了采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，该方法准确、灵敏、测定结果不受药材、制剂中其他物质的干扰，专属性强，能够较为全面地对强力定眩片进行定性及化学成分的定量分析，为强力定眩片的质量控制提供了参考和依据。CN113156017ACN113156017A权利要求书1/1页1.一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，其特征在于，所述的12种化学成分为天麻素、没食子酸、5‑羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备取供试品5‑10片，去除薄膜衣，研细，精密称取0.4g，置5mL量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理15‑45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(2)对照品溶液的制备精密称取天麻素、没食子酸、5‑羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内酯、蒙花苷对照品适量，加甲醇制成混合对照品溶液；(3)单味药材及阴性样品溶液的制备采用水煎煮、乙醇回流提取、浓缩和减压干燥工艺，分别制备天麻、杜仲、杜仲叶、野菊花、川芎单味药材样品和缺天麻、缺杜仲和川芎、缺杜仲和杜仲叶、缺野菊花和川芎的阴性模拟样品，按步骤(1)的方法制成相应阴性对照溶液；(4)HPLC法测定12种化学成分含量色谱柱：LamdoStamsilC18柱(250×4.6mm，5μm)；流动相乙腈(A)‑0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱(0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A)；检测波长：280nm；进样量：5μL；体积流量：0.8mL/min；柱温：30℃；(5)线性回归方程的制备分别精密吸取混合对照品溶液适量，逐级稀释成一系列不同质量浓度的标准溶液，按步骤(4)的色谱条件进样测定，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得到线性回归方程；(6)供试品溶液中12种化学成分含量的测定吸取供试品溶液按步骤(4)的色谱条件进样测定，得到供试品溶液中12种化学成分的色谱图，并确定相应的峰面积，分别将12种化学成分的峰面积带入所述线性回归方程，即可得到样品溶液中12种化学成分的含量。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中超声处理的时间为15‑30min，功率为250W，频率为40kHz。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中每1mL所述的混合对照品溶液中含天麻素1.045mg、没食子酸1.002mg、5‑羟甲基糠醛0.185mg、对羟基苯甲醇0.41mg、新绿原酸0.102mg、绿原酸0.1mg、香草酸0.135mg、对羟基苯甲醛0.136mg、松脂醇二葡萄糖苷0.109mg、槐角苷0.108mg、藁本内酯22mg、蒙花苷0.111mg。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中所述的稀乙醇为45％‑55％(v/v)的乙醇溶液。2CN113156017A说明书1/10页一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法技术领域[0001]本发明涉及一种采用HPLC法测定药物中化学成分含量的方法，特别涉及一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中1