一种利用鸟氨酸催化液制备门冬氨酸鸟氨酸的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113336663A(43)申请公布日2021.09.03(21)申请号202110624190.4(22)申请日2021.06.04(71)申请人无锡晶海氨基酸股份有限公司地址214000江苏省无锡市锡山区东港镇港下(72)发明人宁健飞蔡立明陈晓双(74)专利代理机构哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211代理人林娟(51)Int.Cl.C07C227/40(2006.01)C07C229/24(2006.01)C07C229/26(2006.01)C12P13/10(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种利用鸟氨酸催化液制备门冬氨酸鸟氨酸的方法(57)摘要本发明公开了一种利用鸟氨酸催化液制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，属于生物医药领域。本发明将鸟氨酸转化液利用超滤膜进行超滤处理得到超滤膜清液，然后用门冬氨酸调pH到6.2‑6.7，一方面可以一步法制备门冬鸟氨酸收率高，总收率80％，另一方面可以营造偏酸性环境，减少有关杂质的产生。本发明采用电渗析法脱盐，也可以避免在离子交换柱中进行洗脱时，碱性的洗脱环境容易导致有关物质的产生。CN113336663ACN113336663A权利要求书1/1页1.一种制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，其特征在于，利用鸟氨酸转化液制备门冬氨酸鸟氨酸，包括以下步骤：(1)将鸟氨酸转化液升温至55‑60℃，保温20‑30min，然后采用超滤膜进行超滤处理以除去蛋白与菌体得到超滤膜清液；(2)将步骤所得的超滤膜清液用门冬氨酸调pH到6.2‑6.7；(3)把调过pH的液体进行电渗析法脱盐，电导≤300μs/cm时反应结束，得到门冬氨酸鸟氨酸溶液；(4)将步骤(3)得到的门冬氨酸鸟氨酸溶液浓缩至浓度65‑75％，然后升温55‑60℃，加10‑15％活性炭脱色30‑60min，得到脱色液；(5)将脱色液反滴入4‑5倍体积的乙醇中，30℃搅拌，得到晶体，抽滤、离心、烘干。2.根据权利要求1所述的一种制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，其特征在于，步骤(1)中超滤膜的工作温度为28‑32℃。3.根据权利要求1所述的一种制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，其特征在于，步骤(3)电渗析时，淡室、浓室的体积相同。4.根据权利要求1所述的一种制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，其特征在于，步骤(5)烘干温度是80℃。2CN113336663A说明书1/4页一种利用鸟氨酸催化液制备门冬氨酸鸟氨酸的方法技术领域[0001]本发明涉及一种利用鸟氨酸催化液制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，属于生物医药领域。背景技术[0002]门冬氨酸鸟氨酸能直接参与肝细胞的代谢，并能激活肝脏解毒功能中的两个关键酶，因而能够协助清除对人体有害的自由基，增强肝脏的排毒功能，迅速降低过高的血氨，促进肝细胞自身的修复和再生，从而有效地改善肝功能，恢复机体的能量平衡。[0003]目前，门冬氨酸鸟氨酸的制备方法主要包括两大类：一类是以L‑精氨酸与L‑天门冬氨酸为起始原料，利用化学法或者生物法将L‑精氨酸转化为L‑鸟氨酸，然后再与L‑天门冬氨酸反应制得。这类方法工艺过程较为复杂，尤其是生物法更是条件苛刻，成本较高，不适于工业化大生产。另一类则是以L‑鸟氨酸盐与L‑天门冬氨酸为起始原料，利用L‑鸟氨酸盐制备L‑鸟氨酸自由碱，然后再与L‑天门冬氨酸反应制得。这类方法中采用的L‑鸟氨酸盐包括L‑鸟氨酸盐酸盐、L‑鸟氨酸硫酸盐以及L‑鸟氨酸醋酸盐，其中L‑鸟氨酸硫酸盐不易得到，而L‑鸟氨酸醋酸盐价格相对较高。[0004]采用L‑鸟氨酸盐酸盐与L‑天门冬氨酸为起始原料制备门冬氨酸鸟氨酸的方法主要包括：将L‑鸟氨酸盐酸盐溶解于水中，用氢氧化钠调节pH值后，采用电渗析方法除盐，然后再与L‑门冬氨酸反应制得。该方法中电渗析除盐条件苛刻，价格较高，不适于工业化大生产。或者，将L‑鸟氨酸盐酸盐溶解于水中，利用阳离子交换树脂脱盐，然后再与L‑门冬氨酸反应制得，该方法收率较低，同样不适于工业化大生产，并且在离子交换柱中进行洗脱时，碱性的洗脱环境容易导致有关物质的产生，从而不符合原料药的品质要求。发明内容[0005][技术问题][0006]现有的制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，纯化条件比较严苛，并且采用离子交换纯化方法时还容易产生有关物质。[0007][技术方案][0008]本发明提供一种利用鸟氨酸转化液制备门冬氨酸鸟氨酸的方法，包括以下步骤：[0009](1)将鸟氨酸转化液升温至55‑60℃，保温20‑30min，然后采用超滤膜进行超滤处理以除去蛋白与菌体得到超滤膜清液，其中，超滤膜的工作温度为28‑32℃；所述鸟氨酸转化液是以精氨酸为底物，通过精氨酸酶催化精氨酸转化成鸟氨酸得到的；[0010](2)将步骤所得的超滤膜清液用门冬氨酸