牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113466356A(43)申请公布日2021.10.01(21)申请号202110619647.2(22)申请日2021.06.03(71)申请人石家庄君乐宝乳业有限公司地址050000河北省石家庄市石铜路68号(72)发明人齐晓茹白晓云苏运聪柴艳兵张耀广李兴佳夏卫东张敏姚启禛马晓冲王鸽(74)专利代理机构石家庄科诚专利事务所(普通合伙)13113代理人左燕生任丽梅(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/72(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书1页说明书12页附图3页(54)发明名称牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法(57)摘要本发明公开了一种牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法，是在样品前处理过程中通过乙腈甲酸萃取液有效萃取，经固相萃取柱过滤后蒸干，经甲醇水溶解，上机于高效液相色谱仪串联质谱仪，测定牛乳中矮壮素、甲胺磷、灭蝇胺、氯氨吡啶酸、氯丙嘧啶酸及咪唑烟酸农药残留的含量。本发明通过添加合理配比的乙腈甲酸萃取液有效解决牛乳样品检测中特定农药残留成分提取困难的问题，显著提高精准度和回收率，适用于对牛乳中农药残留含量进行检测。CN113466356ACN113466356A权利要求书1/1页1.一种牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法，其特征在于，它包括依次进行的以下步骤：S1.样品前处理：取待测生牛乳加入乙腈甲酸萃取液，经涡旋混匀，离心，取上清液过固相萃取柱净化，得流出液和待洗脱固相萃取柱；取乙腈甲酸萃取液过待洗脱固相萃取柱，得洗脱液；将流出液和洗脱液混合，干燥，经甲醇水溶液溶解，滤膜过滤，得上机液；其中：所述乙腈甲酸萃取液中乙腈和甲酸的体积比为450‑550：1；S2.样品分析：取上机液于高效液相色谱仪串联质谱仪分别测定矮壮素、甲胺磷、灭蝇胺、氯氨吡啶酸、氯丙嘧啶酸和咪唑烟酸含量，得检测结果。2.根据权利要求1所述的牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述甲醇水溶液的体积分数为50‑80%。3.根据权利要求1所述的牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述待测生牛乳和乙腈甲酸萃取液的体积比为1：3.5‑4。4.根据权利要求1或2或3所述的牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述离心的温度为0‑4℃，转速为7000‑12000r/min，时间为5‑15min；所述固相萃取柱为经体积分数为75‑80%的乙腈水溶液活化的OasisHLB固相萃取柱。5.根据权利要求1或2或3所述的牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述干燥是以38‑42℃的温度蒸干；所述滤膜为有机微孔滤膜，所述滤膜的孔径为0.22μm。6.根据权利要求1或2或3所述的牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法，其特征在于，步骤S2中，所述高效液相色谱仪串联质谱仪测定的参数为：I.高效液相色谱仪的参数：色谱柱为1.7μm、2.1×100mm的C18色谱柱；流动相A相为甲醇；流动相B相为含1mL甲酸和5mmol甲酸铵的水溶液；柱温为34‑37℃；进样量为2μL；流速为0.3mL/min；II.质谱仪的参数：离子源为电喷雾离子源；检测方式为多反应选择离子检测；雾化气、气帘气和辅助加热气均为高纯氮气；碰撞气为高纯氩气；毛细管电压为2kV；锥孔反吹气为150L/h；脱溶剂气温度为450℃；脱溶剂气流量为900L/h。2CN113466356A说明书1/12页牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法技术领域[0001]本发明属于农药残留检测方法技术领域，涉及牛乳中农药残留含量测定，具体地说是牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法。背景技术[0002]农药残留随着食物链的食物营养供求序列在人类食物中逐渐积累，进入人体的农药成分90％以上来自于食物链积累，此外农药残留还可通过大气和饮用水被人体摄入。随着牛乳制品被记入各年龄层的日常食谱，牛乳中残留的微剂量农药成分对人体微量但长期的危害不容忽视，控制乳制品中农药残留污染，对农药成分精确检测，确保乳制品安全，正日益受到关注。[0003]目前针对牛乳中农药残留含量测定的方法较少，GB/T23210‑2008和GB/T23211‑2008中分别规定了牛乳中511种和493种农药的测定方法，但这些检测方法存在样品前处理操作繁琐、试剂消耗量大等问题。[0004]对于均易溶于水，具有较强的极性的甲胺磷(methamidophos)、矮壮素(chlormequat)、灭蝇胺(cyromazine)、咪唑