发酵液中β-葡聚糖酶的泡沫分离方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113969271A(43)申请公布日2022.01.25(21)申请号202111480580.5(22)申请日2021.12.06(71)申请人厦门大学地址361005福建省厦门市思明区思明南路422号(72)发明人邵文尧秦宇航林滢陈国玺(74)专利代理机构厦门南强之路专利事务所(普通合伙)35200代理人马应森(51)Int.Cl.C12N9/24(2006.01)C12R1/84(2006.01)权利要求书1页说明书10页附图5页(54)发明名称发酵液中β-葡聚糖酶的泡沫分离方法(57)摘要发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，属于泡沫分离技术领域。发酵罐发酵生产β‑葡聚糖酶，将β‑葡聚糖酶发酵液配制成不同浓度的β‑葡聚糖酶溶液，测定其起泡能力与泡沫稳定性；检查泡沫分离装置气密性，将发酵液引入泡沫分离装置的气浮管中；打开气瓶主阀和减压阀，调节转子流量计，将分离气速调整至所需值，向发酵液中通入空气，气体抵达气浮管的底部，在气体分布器上均匀分布并向上输送，带动分离泡沫发生管内的溶液溶质，气泡由气浮管顶端排出，并收集到泡沫收集烧杯中，测定泡沫液中的β‑葡聚糖酶的浓度和酶活，计算泡沫分离的回收率和酶活富集比。成本低、条件温和、操作简便，解决产物抑制、分离困难、营养物质利用率低等问题。CN113969271ACN113969271A权利要求书1/1页1.发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于包括以下步骤：1)发酵罐发酵生产β‑葡聚糖酶，得到β‑葡聚糖酶发酵液；2)将步骤1)所得β‑葡聚糖酶发酵液配制成不同浓度的β‑葡聚糖酶溶液，测定β‑葡聚糖酶起泡能力与泡沫稳定性；3)检查泡沫分离装置气密性，将发酵液引入泡沫分离装置的气浮管中；4)打开气瓶主阀和减压阀，调节转子流量计，将分离气速调整至所需值，向发酵液中通入空气，气体抵达气浮管的底部，在气体分布器上均匀分布并向上输送，从而带动分离泡沫发生管内的溶液溶质，气泡最终由气浮管顶端排出，并收集到泡沫收集烧杯中，测定泡沫液中的β‑葡聚糖酶的浓度和酶活，并计算泡沫分离的回收率和酶活富集比。2.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤1)中，所述发酵罐采用Minifors2台式标准发酵罐。3.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤1)中，所述发酵采用重组毕赤酵母，培养基为BMGY培养基。4.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤1)中，所述发酵罐的参数设置为，前期：温度30℃，搅拌速度800～1000rpm，通气4L·min‑1；诱导产酶期：发酵温度为25～30℃，流加甲醇诱导发酵108～120h；优选，前期：温度30℃，搅拌速度800rpm，通气4L·min‑1；诱导产酶期：发酵温度为30℃，流加甲醇诱导发酵108h。5.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤1)中，所述β‑葡聚糖酶发酵液中酶浓度在0.20～3.0mg/mL，发酵液的pH值为自然pH值。6.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤3)中，所述泡沫分离装置由空气钢瓶、气瓶主阀、减压阀、调节阀、截止阀、转子流量计、气体分布器、气浮管、泡沫收集烧杯组成；所述空气钢瓶的出口经减压阀接调节阀的输入端，调节阀的输出端接截止阀的输入端，截止阀的输出端经转子流量计分别接气体分布器和残液排出阀，气体分布器的输出端接气浮管的输入端，气浮管的输出端接收集瓶。7.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤4)中，所述转子流量计采用型号为LZB‑3WB的转子流量计，测量流量范围为100～1000mL/min。8.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤3)中，所述气浮管采用长度120cm、内径30mm的玻璃管。9.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤3)中，所述发酵液的装液体积为100～300mL。10.如权利权利要求1所述发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法，其特征在于在步骤4)中，所述通入空气的气速为200～1000mL/min。2CN113969271A说明书1/10页发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法技术领域[0001]本发明属于泡沫分离技术领域，具体是涉及利用SDS作为起泡剂的一种发酵液中β‑葡聚糖酶的泡沫分离方法。背景技术[0002]β‑葡聚糖酶可以催化β‑葡聚糖的分解，在酵母、真菌和谷物的细胞壁中以结构元素存在。β‑葡聚糖酶可分为四类，其中最受瞩目研究的是β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶(YangSQ