一种利用离子液体高效制备磷脂酰丝氨酸的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114181983A(43)申请公布日2022.03.15(21)申请号202111302610.3(22)申请日2021.11.04(71)申请人大连医诺生物股份有限公司地址116600辽宁省大连市经济技术开发区49号(72)发明人阮超洪永德范超王碧吴文忠(74)专利代理机构大连格智知识产权代理有限公司21238代理人刘晓琴(51)Int.Cl.C12P13/06(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种利用离子液体高效制备磷脂酰丝氨酸的方法(57)摘要本发明公布了一种离子液体高效制备磷脂酰丝氨酸的方法，主要是采用离子液体作为反应溶剂替代传统双相溶剂或水相乳化，简化合成步骤，促使磷脂酶D高效催化磷脂酰丝氨酸的合成。具体步骤包括为：利用超声、均质、砂磨等方式分别配制反应液A(L‑丝氨酸/离子液体溶液)、反应液B(卵磷脂/离子溶液)、反应液C(磷脂酶D/离子溶液)，然后将反应液A、B、C混合反应制得磷脂酰丝氨酸。该方法反应条件温和、反应效率快、收率高，获得了磷脂酰丝氨酸高效合成工艺，在食品保健品领域具有应用潜力。CN114181983ACN114181983A权利要求书1/1页1.一种离子液体高效制备磷脂酰丝氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：S1、将L‑丝氨酸与离子液体超声混匀；S2、将卵磷脂与离子液体进行均质；S3、将磷脂酶D、氯化钙与离子液体进行砂磨；S4、将步骤S1、步骤S2、步骤S3制得的反应液混合均匀后，在38～42℃搅拌反应后静置、洗涤、制得终产物；其中，步骤S1‑S4中所述的离子液体选自1‑乙基‑3‑甲基咪唑二氨腈、1‑乙基‑3‑甲基咪唑乙酸盐、1‑乙基‑3‑甲基咪唑双(三氟甲基磺酰)亚胺盐、1‑乙基‑3‑甲基咪唑四氯铝酸盐、1‑丁基‑3‑甲基咪唑氯盐、1‑乙基‑3‑甲基咪唑硫酸乙酯盐、三丁基甲基铵双三氟甲基磺酰亚胺盐、螺旋双吡咯四氟硼酸盐、四乙基三氟乙酸铵中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1所述反应液A中L‑丝氨酸的浓度为5～300g/L，优选的浓度为50～200g/L。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2所述反应液B中卵磷脂的浓度为1～100g/L；优选的浓度为10～50g/L。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3中的磷脂酶D的浓度为0.01～100g/L，优选的浓度为0.1～10g/L；氯化钙的浓度为0.2～0.4g/L。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3中的磷脂酶D的酶活80～800U/mg。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中反应液A、步骤S2中反应液B、步骤S3中反应液C为等体积混匀。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2中所述均质时间为0.5～1.5h，步骤S3中所述砂磨时间为0.5～2h。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2中所述反应液B均质后还加入多孔材料进行吸附，所述多孔材料的比表面积>1000m2/g。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2中所述多孔材料选自石墨烯凝胶、单壁碳纳米管凝胶、多孔活性炭、多孔陶瓷、金属有机框架中的至少一种。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S4中所述搅拌速度为150～200rpm。2CN114181983A说明书1/5页一种利用离子液体高效制备磷脂酰丝氨酸的方法技术领域[0001]本发明涉及食品保健品技术领域，尤其涉及一种利用离子液体高效制备磷脂酰丝氨酸的方法。背景技术[0002]磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine，PS)普遍存在于细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞中，随着对其功能的认识，从一种细胞物质化身为一种新资源食品，在保健品、制药等领域具有广泛的应用。磷脂酰丝氨酸膜磷脂还常存在于动物大脑细胞中，具有提高记忆力、缓解紧张、减轻抑郁等功效，为“脑专一性营养物质”。因其具备可保护神经和抗氧化双重作用，甚至能够改善老年人的阿尔茨海默病。[0003]磷脂酰丝氨酸的制备可分为溶剂提取法、化学合成法和酶转化法。中国发明专利CN107266492A公开了一种磷脂酰丝氨酸的提取方法，其利用氯仿和甲醇从动物牛脑中提取磷脂酰丝氨酸。遗憾的是植物或动物牛脑中的磷脂酰丝氨酸含量较低并不利于工业生产。相较而言，酶转化法反应温和易控、简单高效，被逐渐广泛应用。江南大学江波教授课题组采用硫酸铵沉淀、离子交换及凝胶层析纯化了广岛链霉菌SK43.001‑11发酵液中的磷脂酶D，采用双液相体系酶法制备磷脂酰丝氨酸(收率高达74.8％)，其最佳合成工艺为：有机相为乙醚，水相pH＝6.5(二相为等体积比)，L‑丝氨酸与卵磷脂的质量比15∶1